A method was developed for the determination of monofluoroacetic acid (MFA) in plasma and urine by ion chromatography-triple quadrupole mass spectrometry (IC-MS/MS). A plasma sample was extracted with 3% (v/v) perchloric acid aqueous solution, and the extract was centrifuged to remove the protein and lipids. A urine sample was acidulated with 3% (v/v) perchloric acid aqueous solution. The target analyte was extracted with methyl tert-butyl ether (MTBE) at a pH between 0.5 and 1.0. After the MTBE was removed by blowing with nitrogen, the MFA in the residues was dissolved into 0.1% (v/v) ammonia solution. The separation of MFA was carried out on a Dionex Ionpac AS 19 analytical column (250 mm×2 mm, 7.5 μm) with gradient elution using KOH solution electrolytically generated from an on-line eluent generation cartridge. Before the eluent flow entered the mass spectrometer, an in-line suppressor was used to remove potassium ions. The MFA was detected with a negative electrospray ionization source in the multiple reaction monitoring (MRM) mode, and quantified with the stable isotope internal standard method. The correlation coefficient of the linear calibration curve of MFA was greater than 0.999 at the corresponding ranges of 0.1-1000 μg/L. The average recoveries were 96.2%-120% of MFA in plasma and urine samples with relative standard deviations of 1.1%-13.1% (n=6). The limits of detection of MFA in plasma and urine samples were 0.03 μg/L and 0.1 μg/L, respectively. The method is simple, sensitive and accurate, and can be applied for the determination of MFA in plasma and urine samples.
目的 比较瑞安市2019年-2021年早孕期及中孕期孕妇血清学筛查数据,分析筛查结果,探讨产前血清学筛查的临床应用价值.方法 收集2019年1月-2021年12月早孕期(9周～14周)和中孕期(15周～21周)在瑞安市妇幼保健院进行血清学筛查的22 618例早孕期孕妇及29 608例中孕期孕妇的资料,并随访产前诊断及妊娠结局.结果 对22 618例早孕期孕妇血清学产前筛查结果分析,唐氏综合征(DS)和18-三体综合征(ES)筛查阳性率分别为3.44％和0.28％;对29 608例中孕期妇女血清学产前筛查结果分析,DS、ES及开放性神经管缺陷(ONTD)筛查的阳性率分别为2.04％、0.16％和0.35％.≥35岁年龄组的孕妇DS、ES及ONTD筛查,各项合计高风险检出率高于＜35岁年龄组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血清学产前筛查不仅可以筛查出胎儿畸形,还对不良妊娠的解决有指导作用,尤其对高龄妊娠妇女指导意义更为显著,对于胎儿遗传缺陷的诊断和管理具有重要意义,是降低缺陷胎儿出生的有效措施.
目的 建立游泳池水中三卤甲烷的顶空-毛细管柱气相色谱测定方法.方法 改进标准溶液配制方式,取10 ml水样加入4 g氯化钠,于40℃恒温培养箱中平衡30 min取上部空间气体上机测定游泳池水中三卤甲烷含量.结果 三卤甲烷各单体质量浓度在1 μg/L～50 μg/L内线性相关系数(r)为0.999 4～0.999 7;检出限为0.01 μg/L～0.09 μg/L,定量限为 0.03 μg/L～0.30 μg/L,相对标准偏差(RSD)为 1.1％～5.4％;回收率在 93.7％～105.3％.结论 该方法操作简单、快捷省时、灵敏准确,适合基层实验室的推广和批量样品的快速测定.
目的 了解平湖地区3家医院感染侵袭性真菌的菌种分布及对常用抗真菌药物的敏感性和耐药性.方法 收集本地区2019年1月-2021年12月临床分离的侵袭性酵母样真菌,对所有菌株均采用质谱鉴定,统一采用比色微量肉汤稀释法进行抗真菌药物敏感性试验.结果 临床分离念珠菌共94株,其中白念珠菌占37.23％(35/94).2019年-2021年白念珠菌的分离率均排在第一位,分离率分别为31.03％、31.25％、48.48％,呈逐年上升趋势(2x趋势=6.663,P=0.016).老年患者热带念珠菌对氟康唑和伏立康唑的耐药率均为60.00％,非老年患者均为33.33％.检出的14株热带念珠菌中,6株热带念珠菌对唑类药物耐药,并对氟康唑和伏立康唑呈现交叉耐药;未发现4种常见致病念珠菌对棘白菌素和两性霉素B耐药菌株.结论 本地区临床白念珠菌的分离率逐年升高,流行具有一定的地域性特征;热带念珠菌对唑类抗真菌药物的耐药率较高,并且有上升趋势,值得临床在治疗过程中关注.
目的 建立一种可快速富集生活饮用水中土霉素的前处理方法.方法 以Fe3O4NPs为磁源将表面活性剂十二烷基磺酸钠(SDS)修饰于其表面制备了 Fe3O4NPs@SDS功能材料,该材料表面SDS所带的负电荷与土霉素的正电荷通过静电吸引作用有效达到对土霉素的富集.实验考察了材料用量、表面活性剂SDS的量、洗脱剂的种类以及体积等影响因素,最后通过超高效液相色谱检测.结果 取得最佳的优化前处理条件,在该条件下获得了满意的萃取效果(回收率达到87.7％～90.5％),材料至少可重复使用5次.并对南昌市各水厂的生活饮用水共43批次中土霉素的含量进行检测,结果均未检出.结论 该方法前处理简单快速,材料可重复利用,在前处理方面有较高的应用前景,有机溶剂使用量少,适用于饮用水中土霉素的检测.
目的 了解广州地区2018年-2021年6个月～12岁儿童血铅水平及铅中毒情况,探讨血铅水平与红细胞参数及贫血的关系,为儿童铅中毒的早发现和制定干预措施提供依据.方法 采用横断面研究,收集2018年-2021年于广东省某妇幼保健院体检儿童36 523例.采集儿童空腹静脉血,用原子吸收光谱仪检测血铅,用全自动血液分析仪检测红细胞参数.结果 广州地区儿童血铅水平为21.24(16.08～28.80)μg/L,铅中毒率为4.50％,男童血铅水平和铅中毒率均高于女童(P＜0.01).不同年龄段儿童血铅水平差异有统计学意义,血铅水平随儿童年龄增加而升高(P＜0.01),铅中毒率随儿童年龄增加逐渐升高(X2趋势=8.863,P＜0.05).2018年-2021年儿童血铅水平和铅中毒率均呈逐年下降趋势,差异有统计学意义(P＜0.01).铅中毒儿童血红蛋白、平均血红蛋白量均低于正常儿童,铅中毒儿童红细胞分布宽度、贫血检出率均高于正常儿童,差异均有统计学意义(P＜0.01).血铅水平与血红蛋白、平均血红蛋白量均成负相关,与红细胞分布宽度成正相关.结论 广州地区儿童血铅处于较低水平,血铅升高可能导致红细胞参数发生改变.应定期检测儿童血铅水平,密切关注红细胞参数的变化,对儿童铅中毒早发现早干预.
目的 分析卒中患者呼吸道多重耐药(MDR)感染发病率,并探讨其影响因素.方法 回顾性采集杭州市临安区第一人民医院2021年1-12月200例卒中患者临床资料,于患者住院期间进行细菌培养及药敏试验,评估患者呼吸道MDR感染情况;查阅患者病历资料,记录患者基线资料及实验室指标[白蛋白(ALB)],采用logistic回归分析影响卒中患者呼吸道MDR感染的相关因子.结果 200例卒中患者中23例次发生呼吸道MDR感染,感染发生率为11.50％;MDR感染组与非MDR感染组卒中类型、吞咽障碍情况、血清ALB水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05);2组其他资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05);logistic回归分析结果显示,出血性卒中、有吞咽障碍、血清ALB低表达均是卒中患者呼吸道MDR感染的影响因素(P＜0.05).结论 卒中患者呼吸道MDR发生较高,可能受出血性卒中、伴吞咽障碍、血清ALB低表达等因素的影响,临床需重视上述因素,以此降低呼吸道MDR发生率.
目的 探讨细胞焦亡相关因子NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白介素-1β(IL-1β)及白介素-18(IL-18)表达对2型糖尿病(T2DM)患者合并动脉粥样硬化性心血管病(ASCVD)的预测作用.方法 回顾性分析2020年1月-2021年6月于本院就诊的90例T2DM患者的临床资料,全部患者均于入院后测定NLRP3炎性小体、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平,根据是否合并ASCVD将其分为ASCVD组与单纯T2DM组,采用单因素及多因素logistic回归分析T2DM患者合并ASCVD的影响因素,通过绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估NLRP3炎性小体、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平对T2DM患者合并ASCVD的预测价值.结果 单因素分析结果显示,ASCVD组年龄、男性占比、高血压占比、空腹血糖、T2DM病程以及血浆NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达水平高于T2DM组(P＜0.05);多因素logistic回归结果显示,年龄(大)、高血压以及血浆NLRP3炎性小体、IL-18水平升高是T2DM患者合并ASCVD的风险因素(OR＞1,P＜0.05).ROC分析结果显示,当血浆NLRP3炎性小体≥559.450 pg/ml时,诊断T2DM合并ASCVD的灵敏度为93.5％、特异度为76.3％;当血浆Caspase-1≥93.655 pg/ml时,灵敏度为83.9％、特异度为71.2％;当血浆IL-1β≥15.810 pg/ml时,灵敏度为87.1％、特异度为82.9％;当血浆IL-18≥20.545 pg/ml时,灵敏度为90.3％、特异度为67.8％.结论 T2DM患者并发ASCVD的影响因素众多,其中NLRP3炎性小体、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平对T2DM患者合并ASCVD具有一定预测价值.
目的 观察血清1型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、内皮素-1(ET-1)水平在股骨颈骨折术后患者中的表达情况,并分析上述血清指标与股骨头坏死发生的关系.方法 纳入2014年4月-2021年6月在浙江省湖州市福音医院行手术治疗的96例股骨颈骨折患者作为研究对象,所有患者均在术后1 d测定血清PAI-1、ET-1水平,并以门诊复诊方式随访1年,统计随访期间患者股骨头坏死发生情况,将发生股骨头坏死的患者纳入病例组,反之纳入常规组,并采用SPSS 25.0软件分析股骨颈骨折术后患者血清PAI-1、ET-1水平表达与股骨头坏死发生的关系.结果 随访1年,96例股骨颈骨折术后患者中共有19例发生股骨头坏死,发生率为19.79％;病例组血清PAI-1、ET-1水平高于常规组,差异有统计学意义(P＜0.05);经点二列相关分析证实,股骨颈骨折术后患者血清PAI-1、ET-1水平与股骨头坏死发生成正相关(r值分别为0.526、0.559,P＜0.05);经多项logistic回归分析,结果显示,血清PAI-1、ET-1水平升高是股骨颈骨折术后患者股骨头坏死发生的危险因素(P＜0.05).结论 股骨颈骨折术后患者血清PAI-1、ET-1水平表达异常与股骨头坏死有关,且血清PAI-1、ET-1水平升高是患者术后股骨头坏死发生的危险因素.
目的 了解甘肃某核设施周围水及生物样品的放射性特征,并建立核设施周边水和生物样品的基线数据库.方法 以甘肃某核设施周围水和生物样品为检测对象,采用高纯锗γ谱仪和低本底测量仪等设备,对核设施周边的黄河水、蔬菜、粮食、肉类等生物样品进行放射性水平分析.结果 核设施周围黄河水丰水期、枯水期的放射性水平低于国家标准放射性指标指导值,枯水期总α、总β均值分别为0.05 Bq/L和0.09 Bq/L,丰水期总α、总β均值分别为0.06 Bq/L和0.12 Bq/L.在叶菜类和肉类样品中检出微量人工放射性核素137Cs,叶菜类最高检出比活度为0.051 Bq/kg,肉类样品最高检出比活度为0.153 Bq/kg;在粮食样品中检出天然放射性核素226Ra、232Th、和40K,比活度均高于肉类和蔬菜类样品;在肉类样品中检出天然放射性核素238U,最高检出比活度为9.0 Bq/kg,高于粮食和蔬菜;所有样品中均检出天然放射性核素40K.结论 核设施周边黄河水和生物样品放射性水平均在国家标准限值范围之内,属于天然本底水平.
目的 建立高灵敏度的超高效液相色谱串联荧光检测器检测人体血清中16种痕量多环芳烃的分析方法.方法 200μl血清样品,加入400μl正己烷,涡旋振荡后高速离心分离,取上层有机相,重复萃取2次,合并萃取液,氮吹至近干,再复溶于100μl乙腈中.经PAH C18色谱柱(5 μm,4.6 mm×150 mm),在甲醇-水为流动相下梯度洗脱,超高效液相色谱串联荧光检测器测定.结果 血清中的16种多环芳烃在0.20μg/L～5.00μg/L浓度内呈良好的线性关系,线性相关系数均＞0.998.该方法,检出限为0.1μg/L;加标回收率为60.5％～96.0％,RSD为1.5％～7.6％.结论 该方法操作简便、生物样本用量少、检出限低,适用于人群中多种多环芳烃的监测.
目的 采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)筛选产KPC型肺炎克雷伯菌(KPC-Kp)的特征峰,建立快速检测KPC-Kp的方法.方法 收集耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)共37株,PCR方法检测常见碳青霉烯酶耐药基因(blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaIMP和blaOXA-48-like);全基因组测序分析CRKP菌株的相关遗传特性,包括多位点序列分型(MLST)和blaKPC-2基因周围环境;用布鲁克ClinproTools 3.0软件以及Flexanalysis 3.0图谱分析软件筛选出KPC-Kp的特征峰,分析特征峰与KPC-Kp的MLST分型和blaKPC-2基因周围环境的关系.结果 PCR结果显示,35株CRKP携带blaKPC-2基因,2株CRKP携带blaNDM-1基因.MLST分析结果显示,37株CRKP共有5个ST型,其中35株KPC-Kp分为3个ST型,分别是ST11型(28株)、ST252型(5株)、ST111型(2株).blaKPC-2基因周围环境分析结果显示 KPC-Kp 共有 3 种核心结构,包括 ISKpn27-blaKPC-2-ISKpn6、IS26-ISKpn27-blaKPC-2-ISKpn6 和 blaKPe-2-ISKpn6.MALDI-TOF MS筛选获得KPC-Kp的特征峰为(4 521±1)m/z和(4 514±1)m/z,灵敏度分别为34.3％和5.7％.结论 MALDI-TOF MS可检出产KPC型肺炎克雷伯菌的特征峰为(4 521±1)m/z和(4 514±1)m/z,对快速检测KPC-Kp具有临床价值.
目的 对绍兴市某学校一起空肠弯曲菌引起的食源性疾病事件进行病原学研究,为食源性疾病突发事件的应急处置提供依据.方法 采集该事件患者肛拭子、食堂工作人员肛拭子、留样食品样品和环境样品共46份,采用快速多重病原基因检测系统筛查病原体,锁定目标病原后,将病原菌分离鉴定与实时荧光PCR同步检测,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)探究菌株同源性,采用琼脂稀释法检测菌株耐药情况.结果 采集的46份样品中,分离鉴定出空肠弯曲菌4份,均来自患者.PFGE聚类分析结果显示,4株空肠弯曲菌同源性为100.0％.药敏结果显示,4株菌对萘啶酸、环丙沙星、氟苯尼考和四环素4种抗生素均耐药.结论 这是绍兴市首次由空肠弯曲菌感染引起的食源性聚集疫情,建议加强学校食堂卫生管理、在校学生和教职员工的健康教育,养成良好的卫生习惯.
目的 探讨多部门综合干预,对提高临床病原微生物标本送检质量的效果.方法 选取某三甲医院2020年—2021年治疗性使用抗菌药物的住院患者,2020年12月开始实施综合干预措施,比较干预前组(2020年1月—12月)和干预后组(2021年1月—12月)住院患者抗菌药物治疗前微生物标本送检率、不同类型微生物标本构成及血培养标本送检情况.结果 共调查治疗性使用抗菌药物20 530例,干预前9 096例,干预后11 434例.干预后抗菌药物、限制级抗菌药物、特殊级抗菌药物治疗前微生物标本送检率分别为76.32％、82.59％、94.76％,高于干预前的65.6％、68.36％、89.5％,差异有统计学意义(P＜0.01).无菌部位标本由干预前的17.72％提高至干预后的20.95％.2套以上血培养标本由干预前的58.73％提高至干预后的62.75％,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 应用综合干预措施,可提高微生物标本送检率和送检质量
维生素D3即胆钙化醇,为固醇类衍生物,可以促进肠道对钙的吸收,诱导骨质中钙和磷的沉淀,对儿童的佝偻病和成人缺钙所产生的疾病起到良好的预防作用.但是人体内维生素D3过多则会造成高钙血症,导致人体动脉粥样硬化,严重时会造成肾功能的损害和软组织钙化.若加入化妆品作用于人体皮肤表面,维生素D3通过人体表面吸收后会产生皮肤钙化等不良后果,对皮肤造成不可逆的伤害,是化妆品的禁用成分.
目的 探究外周血Nod样受体蛋白3(NLRP3)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)在原发性肾病综合征(PNS)患者中的表达及检测意义.方法 回顾性分析本院2020年6月-2021年6月收治的PNS患者80例,将其作为PNS组,同期选取75例健康体检者作为对照组,给予PNS组患者醋酸泼尼松龙+环磷酰胺治疗,比较2组受试者以及PNS组不同临床疗效和不同复发情况患者的NLRP3 mRNA表达和血清BMP-7水平,并采用Pearson相关性分析PNS患者NLRP3 mRNA与BMP-7的相关性.结果 PNS组的NLRP3 mRNA表达量高于对照组,血清BMP-7水平低于对照组(P＜0.01);治疗前后,PNS完全缓解患者的NLRP3 mRNA均低于部分缓解和未缓解患者,BMP-7水平均高于部分缓解和未缓解患者(P＜0.01);治疗前后,PNS未复发患者的NLRP3 mRNA均低于复发组,BMP-7水平均高于复发组(P＜0.01);Pearson相关性分析显示,PNS患者NLRP3 mRNA与血清BMP-7成负相关(r=-0.763,P＜0.01).结论 PNS患者外周血中NLRP3 mRNA呈高表达,血清BMP-7呈低表达,二者有望作为预测PNS疗效和预后的重要指标.
2021年4月15日开始实施的《生物安全法》明确规定"设立病原微生物实验室,应当依法取得批准或者进行备案."《病原微生物实验室生物安全管理条例》也要求"新建、改建或者扩建一级、二级生物安全实验室,应当向设区的市级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门备案."为了落实这项工作,加强生物安全实验室的规范化管理,浙江省卫生健康委员会在2007年就研发了备案信息化管理平台—浙江省病原微生物实验室管理信息网[1-2],杭州市卫生健康委员会把备案审批工作具体委托给杭州市疾病预防控制中心落实执行.
目的 研究2021年浙江省湖州市致泻性大肠埃希菌分离株的检出情况、主要毒力基因、耐药性以及分子分型特征.方法 对2021年哨点医院腹泻患者粪便标本和市场采集的食品标本进行分离,运用多重荧光定量PCR方法检测其毒力基因,并对其中104株进行耐药性检测和脉冲场凝胶电泳分子分型.结果 病例源中肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)检出率最高为60.66％,食品源中也是EAEC检出率最高,为92.86％.DEC引起的发病人群以20岁～39岁年龄组最高,发病高峰在6月-8月.耐药率最高依次为氨苄西林(63.46％)、四环素(62.50％)、萘啶酸(57.69％).经Xba Ⅰ酶切后,对EAEC和ETEC进行分别聚类,EAEC相似度为41.7％～100.0％,ETEC相似度为40.7％～100.0％.结论 2021年湖州市检出的致泻性大肠埃希菌以EAEC为主,对氨苄西林的耐药率最高.建立本地PFGE分子分型数据库,为DEC防控提供数据支撑.
目的 对枣庄市1起学校乙型Victoria系(BV系)流感聚集性疫情的病原学和遗传特征进行分析,为BV系流感的防控提供参考依据.方法 收集13例患者的咽拭子标本进行核酸检测和病毒分离,对毒株进行全基因组测序,利用生物信息学软件构建进化树并分析分子进化特征.结果 引起本次学校聚集性感染的病原体为BV系流感病毒,核酸阳性率为76.92％(10/13),分离毒株5株.与疫苗株B/Washington/02/2019相比,核苷酸同源性为98.4％～99.6％.血凝素(HA)进化树中5株BV系毒株与疫苗株B/Washington/02/2019共同归属于1A分支.HA蛋白9个氨基酸位点发生置换,其中6个位点发生在抗原决定簇,未发现神经氨酸酶(NA)抑制剂耐药位点和酸性聚合酶(PA)抑制剂耐药位点发生变异.HA均发生N197D置换,M1均发生T15I置换,多个蛋白的磷酸化位点发生改变.结论 引起枣庄市学校聚集性疫情的病原体是BV系流感病毒,应加强学校疫情监测并督促防控措施落实.
目的 探讨外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、中性粒细胞CD64(nCD64)指数及单核细胞HLA-DR(mHLA-DR)表达率联合检测在肺部感染诊断中的价值.方法 将本院2022年1月—6月收治的340例肺部感染患者作为感染组,健康体检者48例作为对照组.分别检测外周血NLR、nCD64指数、mHLA-DR表达率,分析上述指标在肺部感染诊断中的价值.结果 肺部感染组外周血中NLR、nCD64指数高于对照组,肺部感染组mHLA-DR表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.001);外周血NLR与nCD64指数成正相关关系(r=0.449,P＜0.01),外周血NLR与mHLA-DR表达水平成负相关关系(r=-0.493,P＜0.01),nCD64指数与mHLA-DR表达水平成负相关关系(r=-0.324,P＜0.01);NLR、nCD64指数和mHLA-DR表达率诊断肺部感染的曲线下面积分别为0.774、0.737、0.679(P＜0.05),联合诊断时曲线下面积为0.842(P＜0.05).结论 外周血NLR、nCD64指数及mHLA-DR表达率是肺部感染辅助诊断的良好指标,三者联合检测可提高对肺部感染的诊断效能.
