目的 建立北五味子商品饮片质量评价标准.方法 收集50批北五味子,以其杂质、水分、灰分、酸不溶性灰分、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素含量作为质量评价的内在指标.对外在指标与内在指标采用Person相关性分析确定分级指标.建立主成分分析模型,并与商品信息中的等级进行对比,确定等级划分模式.结果 建立北五味子商品等级划分数学评分模型,以五味子醇甲含量≥0.4%、颜色红色、无白霜、得分>0者为一等品,五味子醇甲含量≥0.4%、颜色暗红色、有或无白霜、得分<0者为二等品.结论 所建立的等级划分标准可用于综合评价北五味子饮片质量.
采用HPLC测定不同品种淫羊藿黄酮类即淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C4种有效成分含量,结合主成分分析对不同品种淫羊藿进行质量分析与评价,并考察淫羊藿对大鼠肾阳虚保护作用.将实验动物随机分为阳虚模型对照组(模型组)、金匮肾气丸干预组(阳性组)、淫羊藿低(125 mg/kg)、中(250 mg/kg)、高(500 mg/kg)剂量组.四周后测定肾阳虚大鼠血清中尿酸(UA)、肌酐(CRE)和尿素氮(BUN).主成分分析结果显示,主成分1淫羊藿苷、朝藿定C和主成分2朝藿定B是影响样品质量评价的主要因子.12批淫羊藿药材整体质量较好.药理学结果显示,与空白组相比,大鼠血清中UA、CRE和BUN含量显著降低.上述结果表明:本方法同时测定淫羊藿黄酮类4种有效成分,为建立淫羊藿质量评价提供参考;淫羊藿对氢化可的松诱导的肾阳虚具有明显的保护作用,具有量效关系.
目的:初步阐释红参和红景天在化学和药效学层面的配伍机制,为临床应用提供理论依据.方法:利用高分离度快速液相色谱与四极杆-飞行时间质谱联用(RRLC-Q-TOF-MS)分析了红参和红景天配伍前后化学成分的变化,并通过负重游泳实验及血清尿素、血乳酸、肝糖原的测定考察了红参和红景天配伍前后的抗疲劳活性变化.结果:在红参和红景天配伍合提液中共鉴别了51种化学成分,丙二酰基人参皂苷(mRg1,mRb1,mRb2,mRb3和mRd等)含量明显降低,人参皂苷(Rb1,Rb2,Rb3,Rd,F2和Rg3等)含量明显升高.药效实验显示,与空白组比较,合提液组和合并液组小鼠竭力游泳时间均明显延长(P<0.01);两组小鼠的血清尿素氮(P<0.05,P<0.01)和乳酸(P<0.05,P<0.01)水平明显降低,而肝糖原水平明显升高(P<0.05,P<0.01).红参和红景天配伍合提液抗疲劳作用较红参和红景天单煎合并液明显增强.结论:该研究在化学成分变化方面揭示了红参和红景天配伍过程中的增效机制,为临床应用和产品开发提供了理论参考.
目的:优化复方人参健体方4种组方药材(人参、山药、枸杞子、益智仁)的配比,并考察其抗疲劳活性及急性毒性.方法:通过水提取、浓缩、减压干燥制备复方人参健体方水提物.采用单因素试验,以小鼠负重游泳时间为指标,考察人参、山药、枸杞子、益智仁的处方量等4个因素的影响.在单因素试验的基础上,以小鼠负重游泳时间和运动后血清尿素氮含量、肝糖原含量和血乳酸曲线下面积的综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优化处方配比.将小鼠分为空白对照组(水)、阳性对照组(人参红景天胶囊,0.135 g/kg)和复方低、中、高剂量组[最优配比复方人参健体方提取物(以下简称"优化复方")4.08、8.16、12.24 g/kg,以生药量计],灌胃给药或水20 mL/kg,每日1次,连续30 d.以给药后小鼠的负重游泳时间和运动后血清尿素氮含量、肝糖原含量和血乳酸曲线下面积的综合评分验证优化复方的抗疲劳活性;同时,以复方中剂量组小鼠的测定数据计算综合评分,比较其与理论预测值的差距.对小鼠灌胃优化复方(总剂量为16.00 g/kg,以提取物计),连续14 d观察并记录小鼠的一般状态、体质量变化、中毒特征以及死亡情况等,并测定半数致死量(LD50)和最大耐受剂量(MTD).结果:复方人参健体方的最优处方配比为人参1.5 g、山药10 g、枸杞子10 g、益智仁3 g.抗疲劳活性验证试验显示,优化复方较空白对照组可显著延长小鼠负重游泳时间,降低血清尿素氮含量和血乳酸含量及曲线下面积(低剂量组除外),提高肝糖原含量(P<0.05或P<0.01);且复方中剂量组的综合评分平均值为96.95分,与理论预测值97.01分仅相差0.06%.急性毒性实验显示,小鼠均未见死亡现象发生,优化复方的经口MTD均大于15 g/kg,属无毒级.结论:优化的复方人参健体方对小鼠具有显著的抗疲劳活性,且未见明显毒副作用.
目的:研究人参总皂苷对D-半乳糖致PC12细胞衰老的改善作用及其机制.方法:将大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞用D-半乳糖处理以建立细胞衰老模型.采用CCK-8法筛选D-半乳糖的建模浓度和人参总皂苷的给药浓度.试验设正常对照组、模型组和人参总皂苷低、高浓度组,检测各组细胞衰老情况、细胞凋亡率、细胞周期和细胞中线粒体膜电位(MMP)、三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)水平以及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)及其相关蛋X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt-C)]和氧化损伤相关蛋白[核因子2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)]表达水平,另设阳性药物组[5 mmol/L N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)]和阳性对照组[D-半乳糖+5 mmol/L NAC]比较氧化损伤相关蛋白水平.结果:D-半乳糖能显著抑制PC12细胞的存活率,临界浓度为20 mg/mL;人参总皂苷可显著增加D-半乳糖诱导衰老细胞的存活率,半数效应浓度为65μg/mL,故将后续试验人参总皂苷的低、高浓度设置为55、65μg/mL.与正常对照组比较,模型组衰老细胞数明显增加,细胞凋亡率和G1期细胞比例均显著增加,S期细胞比例、细胞中MMP、ATP含量和Bcl-2蛋白以及线粒体中Cyt-C蛋白表达水平均显著降低,ROS含量和Bax、Nrf2蛋白及胞浆内Cyt-C蛋白表达均显著升高(P<0.05或P<0.01).与模型组比较,人参总皂苷低、高浓度组衰老细胞数明显减少,细胞凋亡率和G1期细胞比例均显著降低,S期细胞比例、细胞中MMP、ATP(除低浓度组外)含量和Bcl-2、Nrf2、HO-1蛋白以及线粒体中Cyt-C蛋白表达水平均显著升高,ROS(除低浓度组外)含量和Bax蛋白及胞浆内Cyt-C蛋白表达水平均显著降低;阳性对照组细胞内Nrf2、HO-1蛋白表达水平亦显著升高(P<0.05或P<0.01),但均低于人参总皂苷组.结论:人参总皂苷可改善D-半乳糖诱导的P12细胞衰老,其机制可能与激活Nrf2抗氧化信号途径拮抗D-半乳糖诱导的氧化应激、缓解其所致的线粒体功能障碍有关.
目的:筛选并配伍出具有良好抗疲劳效果的方剂.方法:以负重游泳时间、爬杆时间为指标进行方剂筛选并优选出处方最佳配伍,为分析筛选出的最佳配伍方剂与方剂中各药材的相关性建立10批最佳配伍方剂的指纹图谱,以游泳时间、爬杆时间、游泳后的血清尿素氮(BUN)、肝糖原、血乳酸(LD)、三磷酸腺苷(ATP)、超氧化歧化酶(SOD)为指标对最佳配伍方剂进行抗疲劳活性研究与验证,通过小鼠急性毒性试验记录小鼠状况.结果:筛选出的“鹿茸酒”与“独参汤”二者的组合方能显著延长小鼠负重游泳时间以及爬杆时间,组合方的最佳配比即鹿茸∶人参∶山药=1∶3∶18缓解疲劳效果明显,能显著提高爬杆实验、负重游泳实验运动时间,提高小鼠体内肝糖原、ATP以及SOD含量,降低BUN、LD含量,建立10批最佳配比组合方提取物对照指纹图谱,从中确定9个共有峰,并全部归属到各药材,急性毒性试验表明该方剂无毒性.结论:筛选并配伍出的方剂具有良好的抗疲劳效果,且安全无毒,建立该方剂指纹图谱证明方剂与各药材间的相关性.
To study the chemical composition,pharmacological action and the existing clinical application of purslane,in order to provide a reference for the basic study and development of medicinal properties of purslane.The author conducted a combined retrieval of the key word of ‘ Portulaca olerace'in literatures of Scifinder(R),Pub Med,China Knowledge Network,Weipu and other databases between January 1993 and May 2017,and summarized the status quo of purslane in four aspects,namely chemical composition,pharmacological effects,clinical and development and utilization.Portulaca is both a medicine and food full of nutriments,and widely distributed in temperate and tropical areas in north and south China.In terms of the chemical composition,purslane mainly contains alkaloids,terpenoids,coumarins,flavonoids,organic acids,volatile oil and polysaccharides,including eight new compounds;in the aspect of pharmacological effects,purslane has antiinflammatory,analgesic,antibacterial,hypolipidemic,hypoglycemic,anti-tumor,anti-oxidation,anti-aging,immunity enhancing,anti-fatigue,anticonvulsant,and cough and asthma relieving effects,is mainly used for the treatment of diabetes,inflammation,pruritus,gastrointestinal protection,nasal boil and other diseases.In terms of the development and utilization,purslane is mainly applied in drugs,healthcare food,cosmetics,daily necessities and animal feed,with a good development prospect.
The use of animal medicine has a long history in China, it has the characteristics of high curative effect,strong activity, wide application and great potential. However,the circulation of animal medicine in current market mixed counterfeit variety and complex. Molecular identification technology of DNA barcoding is an emerging molecular biotechnology in recent years, it is a powerful supplement to traditional identification methods. This method can well identify animal species at the molecular level and has high accuracy, it can identify animal medicines quickly and monitor the medicine market effectively. This article summarizes the research process of molecular identification of DNA barcoding, the application of DNA barcoding in medicinal animals identification in recent years, and the limitations of DNA barcoding technology.
Major chemical constituents of Cirsium japonicum are flavonoids,sterols,lignans,lonicol,glycosides,and volatile oils,which has hemostatic,hemostatic,antiturnor and other pharmacological effects.By searching the researches in SciFinder,Chinese knowledge network,and PubMed from 1977 to 2017,the previous studies on C.japonicum were summarized and analyzed from chemical composition and pharmacological effect,which provided reference for the development and basic research of pharmacodynamic substances.
研究三七蛋白的提取工艺和热稳定性.采用单因素考察和L9(33)正交试验法,利用Bradford法测定三七提取液中总蛋白含量,以总蛋白含量为指标进行考察,优选提取工艺方案;采用SDS-PAGE凝胶电泳法,探究不同加热温度和加热时间对蛋白稳定性的影响.结果表明,缓冲溶液的pH对三七蛋白提取率有显著影响.确定最佳提取工艺为:用1.5倍药材量的pH 9的缓冲溶液在4℃条件下浸提2次,每次24 h;三七蛋白热稳定性试验结果表明,蛋白稳定性随着加热温度的升高而发生变化,各种蛋白亚基的热敏感性各不相同;在70℃时,三七蛋白亚基的含量基本不随加热时间改变.优化得到的数据合理,重复性良好,可为三七蛋白的提取工艺及蛋白热稳定性研究提供试验依据.