2019年1月中旬,常规血清学监测显示湖北某伪狂犬病阴性猪场有转阳迹象,经朔源为一次外购精液所引起,立即淘汰疑似阳性公猪,并对全群公母猪普免某上市公司伪狂犬病变异毒株疫苗.1月下旬,猪场出现临床症状,母猪流产,新生仔猪有神经症状及死亡,对死亡小猪及流产胎儿胎衣进行病原检测,确诊为伪狂犬病病毒,同时对母猪群抽取血样进行抗体监测,母猪群伪狂犬病野毒抗体全群转阳.由于伪狂犬病野毒未能及时得到控制,怀疑疫苗存在问题,因此设计检测伪狂犬病病毒gB、gC基因引物,对分离毒株及疫苗进行测序,结果显示猪场分离株为变异株,但所谓的变异疫苗毒株确为Bartha株,据目前研究数据显示,Bartha株并不能完全有效抵抗变异株.从上述现象侧面反映出目前我国伪狂犬病的防控之路将会更长,一是猪场自身管理问题,二是相关疫苗厂家存在欺骗行为,希望能引起行业的相关重视.

2018年11月,湖南郴州某规模化猪场发生2～3日龄仔猪呕吐、腹泻为主的疫情,发病率70％,死亡率80％,为确定引起仔猪腹泻的原因,从发病猪群中采集2头病死猪的小肠、肺脏、淋巴结等组织进行PCR检测及基因测序分析.检测结果显示猪流行性腹泻和猪蓝耳病均为阳性,猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒均为阴性.测序分析显示所检测到的猪蓝耳病病毒与JXA1毒株高度同源,为高致病性毒株,检测到的猪流行性腹泻病毒为变异毒株,隶属于GⅡ-b群.综合分析,引起此次新生仔猪大批死亡系变异猪流行性腹泻病毒混合感染高致病性猪蓝耳病所致.

2018年1月,湖南省某猪场送来2头保育病猪(1头42日龄,1头70日龄),通过流行病学调查得知,该猪场为公司+农户育肥场,可育肥1500头,小猪约25日龄转入,饲养大半月后开始陆续发病,发病率为30％,死亡率为3％.发病猪体温升高,有喘气、咳嗽、呼吸困难,偶有神经症状,部分仔猪出现关节肿胀、跛行,病程长的仔猪消瘦.病理解剖发现腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结肿大,肺脏表面有肉变,整个肺间质增宽,脾脏边缘有出血性梗死灶,胸腔有大量黄色液体并有纤维索性渗出物,关节部位皮下胶冻样水肿,关节液增多.初步怀疑存在蓝耳病、2型圆环病毒病及猪伪狂犬病感染,伴随有细菌的继发感染,但病理剖检情况复杂,无法确诊,需进一步实验室诊断进行确诊.

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒引起的一种传染病,可引起妊娠母猪流产、死产、木乃伊胎,初生仔猪神经症状及死亡,育肥猪出现呼吸道症状、生长缓慢及饲料利用率下降等.猪伪狂犬病病毒具有潜伏感染特性,感染后在三叉神经内定植,形成终生带毒.自2011年起,猪伪狂犬病病毒在我国大多数地区不同规模猪场暴发,给我国养猪业带来了巨大经济损失. 目前,防控猪伪狂犬病感染的关键还在于预防.猪伪狂犬病gE基因缺失苗的推广使用,配套gE鉴别诊断ELISA试剂盒的应用,为猪伪狂犬病野毒的控制和净化提供了有效的基础,欧美许多国家正是根据此方法根除了猪伪狂犬病野毒.尽管目前我国流行毒株为变异株,但Bartha-k61毒株对于新毒株还有一定的保护效果,我们参考欧美净化猪伪狂犬病思路,采用免疫-引种-监测-淘汰等方法,从2011年起对湖南某规模猪场猪伪狂犬病制定了相应的净化方案,通过4年的持续检测、免疫、淘汰等工作,最终达到控制和净化猪伪狂犬病的目的.

抗体监测是动物疫病诊断、疫病监测、免疫质量评估、疫情预警、疫病控制等工作中的重要一环.通过有计划的定期对猪群进行疫病监测, 可系统科学地掌握猪场疫病发生与流行动态和危害程度,连续监测数据可勾勒出群体在一段时间内的动态曲线,侧面反映猪群健康,从而揭示群体变化,解决滞后性问题, 尤其在蓝耳病、 伪狂犬病等疫病的防控上.我们对2017年某自繁自养场3次普检数据进行了统计分析,从中可反映猪场中蓝耳病、伪狂犬病防控等相关问题,具体案例分享如下.

为了解湖南地区主要疫病免疫情况,对2017年1—6月实验室共接收湖南近60个猪场送检的各阶段猪群血清样品4100份,进行了猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征(简称蓝耳病)、猪伪狂犬病野毒、猪伪狂犬病疫苗及O型口蹄疫血清学监测.结果显示,检测猪瘟抗体3777份,阳性合格率85%,保护率66.2%;检测蓝耳病抗体4071份,阳性率69%,强阳性率(S/P值>2.5)8.5%;检测伪狂犬病野毒抗体3884份,野毒抗体阳性率(带毒率)20.37%;检测伪狂犬病gB抗体3286份,阳性率77.41%,保护率仅66.8%;检测O型口蹄疫抗体1546份,阳性合格率66.28%,保护率54.3%.从各项检测结果分析,所抽检猪群蓝耳病呈不稳定/活跃状态(中低抗体、强阳性高抗体和抗体阴性等多个群体并存);伪狂犬病野毒带毒感染形势依旧严峻;种猪群猪瘟免疫水平较理想,但保育及肥育阶段免疫保护不足;O型口蹄疫免疫保护较差.

通过临床免疫效果的监测,对比研究母源抗体对猪瘟兔化弱毒苗及E2基因工程苗免疫效力的干扰.结果表明,当母源抗体平均阻断率>70％时,其对猪瘟兔化弱毒苗存在显著干扰(免疫前、一免后、二免后平均阻断率分别为86.6％、58.4％、67.3％),而对E2重组苗几乎不干扰(免疫前、一免后、二免后平均阻断率分别为86.1％、73.3％、81.4％);在低水平母源抗体时(平均阻断率<40％),2种疫苗均能迅速刺激机体产生相应的免疫应答.本次研究结果表明E2基因工程苗既能产生较好的免疫应答反应同时又可对抗母源抗体的干扰.

2014年1月上旬,湖南省岳阳汩罗市某一养猪场,喂养80～100 kg肥猪500余头,于当月9日开始突然发病,主要表现为日采食量突然大面积下降,由原来的平均日采食量2.5～3 kg/头逐日减至小于0.5 kg/头,猪群发病率在80％以上,表现精神沉郁、聚堆、喜卧、嗜睡等症状,体温测量发现发病猪有体温升高,在40～41℃之间.部分猪群有流鼻涕,未死猪.

采集衡阳某猪场119份血清样品进行伪狂犬病gE-ELISA （酶联免疫吸附试验）与gB-ELISA抗体检测。gE抗体检测结果表明，该猪场所检测猪群除公猪外都有伪狂犬病野毒阳性，是伪狂犬病阳性场，总阳性率为47%。公猪伪狂犬病野毒抗体阳性率为0，说明公猪暂时还没有感染伪狂犬病野毒，属于阴性猪；母猪群伪狂犬病野毒（gE）阳性率达50%~60%；30～40日龄及60日龄阶段猪群gE抗体阳性率分别为30%和55%，加上可疑的数量达到40%～65%，这阶段野毒抗体阳性估计主要受母源gE抗体的影响，且与母猪阳性背景基本一致，但也不能排除个别仔猪阳性抗体来自病毒感染；90～120日龄阶段gE阳性率不降反升，达到100%，说明90～120日龄阶段猪群是在保育转至肥育舍后被伪狂犬病野毒再次感染，gE抗体S/N值显著下降，抗体水平较高。gB抗体结果表明，该猪场伪狂犬病gB抗体阳性率为98%，公猪伪狂犬病gB抗体阳性率为100%，且公猪的gE抗体阴性，说明公猪gB抗体来源于疫苗免疫；母猪群伪狂犬病gB抗体水平高且整齐，可能是野毒感染和疫苗免疫综合作用的结果；30～40日龄阶段gB抗体水平整齐，这是由于母猪群gB抗体水平高且均匀整齐，其仔猪母源抗体相应较好；60日龄阶段gB抗体水平不整齐，这与母源抗体消退有关；90～120日龄阶段gB抗体水平显著提升，这可能是后期野毒感染所致，因为其gE抗体不降反升。综合该猪场gE和gB抗体检测结果分析表明，该猪场伪狂犬病在种猪群得到了有效控制，生产比较稳定，但种猪带毒且散毒，肥育猪的感染压力加大，造成病毒不断循环，肥育猪伪狂犬病野毒感染的控制成了稳定伪狂犬病阳性场的关键。目前，猪伪狂犬病阳性场应定时监测gE和gB抗体，根据猪场血清学检测结果，结合临床实际情况实时调整免疫程序，以便稳定生产和预防伪狂犬病的暴发。

通过临床免疫效果的对比监测试验,研究不同厂家猪瘟疫苗的首免抗体水平,筛选优秀稳定的猪瘟疫苗.结果表明,4个厂家的猪瘟细胞苗中,以河南某厂家2头份组的首免抗体水平最好(抗体转阳率90％、平均阻断率提升37.12个百分点),河南某厂家1头份组和广东某厂家2头份组效果次之(抗体转阳率分别为70％和60％、平均阻断率分别提升31.17个百分点和30.70个百分点),而四川和湖南某厂家2头份组效果最差(抗体转阳率均为40％、平均阻断率仅分别提升25.50个百分点和20.56个百分点).由此可见,不同厂家猪瘟疫苗的首免抗体水平差异明显,优秀稳定的猪瘟疫苗能使仔猪产生良好的首免抗体水平,提高猪瘟首免效果,有助于避免因首免失败而造成的抗体保护空白期,降低野毒感染风险.

为了研究湖南省内副猪嗜血杆菌流行情况，从湖南省内岳阳、湘阴、娄底、郴州等10个规模化猪场送检的210份患呼吸道或关节病变的病猪组织样进行细菌分离。试验采用HPS 16S rRNA的基因序列对可疑菌落PCFI扩增，得到2株细菌基因序列与预期目的片段相符。细菌学试验证明2株细菌均符合HPS形态、培养与生化特性，药敏试验。结果表明，对头孢噻肟、环丙沙星和先锋Ⅳ高度敏感，对强力霉素、壮观霉素和呋喃妥因中度敏感，对新霉素、青霉素、林可霉素和庆大霉素等多种抗生素严重耐药。

自2011年1—11月,先后从湖南省19个规模猪场采集1096份种猪血清、551份仔猪和肥育猪血清样本,利用 gE-ELISA(酶联免疫吸附试验)方法对湖南省19个使用伪狂犬病 gE 基因缺失疫苗的规模化猪场进行野毒血清抗体的监测与全面分析,结果共检出12份阳性样本,总样品阳性率为0.73%,4个猪场检测到伪狂犬病野毒抗体,猪场阳性率21.05%;显示伪狂犬病仍然在湖南省呈地方性流行,感染压力仍然偏高.种猪野毒总阳性率为0.64%,其中阳性场种猪的阳性率为6.19%,种猪带毒现象仍然普遍.在伪狂犬病阳性场的种猪群中,阳性样本主要集中在后备母猪及胎次较高的母猪群,表明近几年伪狂犬病控制在朝有利的方向发展,但种猪阳性率偏高仍是伪狂犬病控制与净化的关键.在所监测的19个猪场中,仔猪群的样品阳性率和伪狂犬病阳性场仔猪的野毒阳性率都低于对应的种猪群,但有个猪场仔猪伪狂犬病野毒阳性,种猪却没有,表明仔猪野毒感染不容忽视;在仔猪伪狂犬病阳性场中,野毒抗体集中在1~4周龄、17~24周龄.由于仔猪伪狂犬病野毒抗体既可能来自感染,也可能来自母源抗体,因此在进行伪狂犬病野毒血清流行病学调查时应分群、分阶段检测,了解检测样品的来源信息和免疫信息,以准确分析和把握流行动态.结果还表明,生长育成阶段后期有野毒感染,此阶段感染是伪狂犬病流行的重要特点,这与有些规模猪场只重视母猪免疫、忽视仔猪的免疫接种工作有关.目前,疾病呈多重、复杂的趋势,使用优质的 gE 基因缺失疫苗强化免疫是控制和净化伪狂犬病的重要手段,同时要加强环境消毒,细化生产管理,安全引种混群、注重后备猪的选择、加强定期监测工作,采取综合防控措施遏制湖南省伪狂犬病的流行

冬春季节天气寒冷，是口蹄疫的多发季节。由于口蹄疫无特效药物治疗，加之卫生防疫措施难以控制，病原可通过空气进行传播，因此对口蹄疫的主要防控手段是提前接种相应血清型的疫苗。根据历年口蹄疫的发病及流行特点，结合笔者对部分猪场口蹄疫抗原抗体监测和防控实践，探讨冬春季节猪口蹄疫的防控措施，以供养猪同仁参考。

猪丹毒是由红斑丹毒杆菌引起的一种急性、高热性的人畜共患传染病.该病多发于夏季高温季节,主要危害架子猪、肥猪和母猪,临床表现可分为"急性败血型"、"亚急性皮肤疹块型"及"慢性心内膜炎和关节炎型",常给猪场造成巨大损失.多年来,由于猪场的饲养管理水平不断提高,广谱抗生素的广泛应用,典型的猪丹毒病例在规模化猪场已很少见,并逐步令大多数猪场管理者疏于免疫和防范.

口蹄疫、传染性胃肠炎-流行性腹泻和“呼吸道疾病综合症”是规模化猪场冬春季节的三类重要疫病.其中最近三年,口蹄疫的危害主要以“发病急、传播快、流行广、乳仔猪死残率高”等特点在以上三类疫病的危害中位居首位；传染性胃肠炎-流行性腹泻则主要表现出发病猪水样腹泻,迅速脱水死亡,日龄越小的仔猪,死亡率越高等特点,对哺乳及保育仔猪危害较大；而“呼吸道疾病综合症”则是由低温、干燥环境引起的呼吸系统疾病症候群.对口蹄疫和病毒性腹泻的主要防控手段是提前接种相应血清型疫苗与生物安全管理;对低温环境引起的呼吸道疾病则应重点采取保温、防贼风和敏感药物保健相结合的防控措施.

2011年上半年，从湖南的茶陵、郴州、桃源、南县、望城和攸县，在没有进行圆环病毒2型疫苗接种的6个规模猪场共采集血样315份，其中经产母猪血样245份、后备母猪42份、哺乳仔猪17份、保育仔猪11份。用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行圆环病毒2型的抗体检测。结果显示，猪群整体阳性率为95．2％，其中经产母猪群，后备母猪群，哺乳仔猪群和保育仔猪群的抗体阳性率分别为96．3％、97．6％、100％,54．5％。结果表明，PCV-2在湖南省规模猪场的各阶段猪群中感染非常普遍，应引起重视和加强防控，特别是保育仔猪群的抗体阳性率仅为54．5％，很大部分的抗体阴性保育仔猪存在感染发病的风险，这一结果与临床上保育仔猪群肾性皮炎高发情况相一致。

猪圆环病毒病对规模化猪场的危害日益严重,已成为影响养猪业的主要传染病.2011年上半年,笔者从湖南的茶陵、郴州、桃源、南县、望城和攸县,在没有进行圆环病毒2型疫苗接种的6个规模猪场共采集血样315份,其中经产母猪血样245份,后备母猪42份,哺乳仔猪1 7份,保育仔猪11份.用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行圆环病毒2型的抗体检测.结果显示,猪群的整个阳性率为95.2％,其中经产母猪群、后备母猪群、哺乳仔猪群和保育仔猪群的抗体阳性率分别为96.3％、97.6％、100％和54.5％.结果表明,PCV2在湖南省的规模猪场的各阶段猪群中感染非常普遍,要引起足够的重视并加强防控,特别是保育仔猪群的抗体阳性率仅为54.5％,很大部分的抗体阴性保育仔猪存在感染发病的风险,这一结果与临床上保育仔猪群肾性皮炎高发情况相一致.

通过阻断ELISA试验研究母源抗体与超前免疫对仔猪猪瘟抗体水平的影响,结果表明,猪瘟抗体阻断率在70％以上的母猪其母源抗体对所产仔猪的保护时间可以持续到4周龄以上;猪瘟抗体阻断率在70％以下的母猪其母源抗体对所产仔猪保护不够,需进行猪瘟超前免疫;在0～20日龄左右,非超免组猪瘟抗体水平略高于超免组;20～60日龄之间,超免组经20日龄猪瘟首免后抗体水平上升较快,抗体转阳率高,而非超免组首免应答不明显.超前免疫应具有免疫记忆功能,有助于猪瘟首免应答,提高免疫效果;能有效填补仔猪因母源抗体不足或猪瘟首免时间不及时而造成的空白保护期,降低野毒感染风险.