采用试剂盒对氟中毒绵羊的血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)质量浓度进行测定,以期判断氟中毒绵羊骨组织损伤情况.结果显示:严重组血清碱性磷酸酶活性[(11.29±3.06)U/L]极显著高于对照组[(6.56±2.98)U/L]和中度组[(4.84±4.01)U/L](P＜0.01);严重组羟脯氨酸质量浓度[(14.23±4.94)mg/L]显著低于对照组[(15.86±4.93)mg/L](P＜0.05),但与中度组[(14.87±5.60)mg/L]差异不显著(P＞0.05).

为了建立一种能够方便、高效检测溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)的方法,试验将溶血性曼氏杆菌重组质粒pET-32a-PlpE转化至BL21(DE3)感受态细胞,然后经IPTG诱导表达并纯化.以重组蛋白PlpE为包被抗原,通过优化抗原最佳包被浓度、一抗及二抗最佳稀释度、最佳反应时间和最佳显色时间等试验条件,建立了检测PlpE抗体的间接ELISA方法.结果 表明:重组质粒pET-32a-PlpE转化至感受态细胞BL21 (DE3)后利用IPTG诱导,重组蛋白主要在沉淀中大量表达,经包涵体纯化试剂盒纯化后获得纯度较高的目的 蛋白.重组蛋白PlpE具有良好的反应性,且蛋白大小符合预期.确定的检测条件为抗原包被浓度2μg/mL,一抗稀释度1∶300,酶标二抗稀释度1∶80000,反应时间45 min,一抗反应时间30 min,显色时间15 min.用该方法检出溶血性曼氏杆菌阳性血清的最低效价可达1∶1280,检测牛病毒性腹泻病毒阳性血清、牛传染性鼻气管炎病毒阳性血清、口蹄疫病毒阳性血清、副结核分枝杆菌阳性血清、布鲁氏杆菌阳性血清,结果均为阴性;批内重复性试验和批间重复性试验变异系数分别为0.70％～4.70％和0.50％～5.60％,均小于6.00％,该方法重复性较好.说明本试验建立的检测PlpE抗体的间接ELISA方法具有较高的敏感性和特异性,可用于临床牛血清抗体的检测.

化隆县2016～2018年开展了为期3年的包虫病防治,为了对3年的包虫病防治效果进行评估,分别从终末宿主和中间宿主感染率,犬粪包虫病抗原监测、培训宣传等多方面进行调查和分析,结果发现驱虫后感染率明显下降、人们防治意识提高.

针对兽医实验室实用布鲁氏菌病检测方法进行分析,常规方式包含细菌分离培养、PCR技术及凝集试验等.但是受到实验设施、检验成本等因素的影响,检验的结果不够理想.随着现代兽医学的方法,酶联免疫吸附试验、荧光偏振分析技术及环介导等温扩增技术等开始在布鲁氏病菌检测中得到应用,可提升临床检测的准确度,为针对性治疗活动奠定基础.

为体外表达牛源多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)PlpE基因及制备抗PlpE蛋白多克隆抗体,根据PlpE基因核酸序列设计了1对特异性引物,通过PCR扩增PlpE基因,构建重组质粒pET-32a-PlpE;摇菌提取质粒,进行双酶切鉴定,鉴定正确后将重组质粒pET-32a-PlpE转化至BL21(DE3)感受态细胞,加入IPTG进行诱导,对诱导蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot鉴定;使用纯化蛋白PlpE免疫北京大耳白兔,制备多克隆抗体,并进行间接ELISA和Western Blot分析.结果显示,扩增的PlpE基因大小为1050 bp,在原核细胞中诱导表达的PlpE蛋白约56 kDa.间接ELISA结果显示,所制备多克隆抗体效价可达1:512000;Western Blot结果显示,所制备多克隆抗体反应性良好.PlpE蛋白的成功表达和多克隆抗体的成功制备,为下一步多杀性巴氏杆菌诊断方法的建立和疫苗研发奠定了基础.

口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)引起的偶蹄兽的一种急性、热性、高度接触性传染病.该病感染途径多、传播速度快,严重危害畜牧业的发展和国际经济贸易的流通,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类疾病,该病为必须上报的疾病.我国也将其列为一类传染病,并列为国家强制性免疫的动物疫病之一.根据口蹄疫血清型不同,口蹄疫病毒分为O、A、C、SATⅠ、SATⅡ、SATⅢ、AsiaⅠ七个型血清型,且各个血清型间没有交叉保护力,每个血清型又有很多亚型,型内不同毒株间的变异可导致抗原差异,这为口蹄疫的诊断和预防带来了极大的困难.

本研究旨在利用细胞中和实验方法测定单克隆抗体是否具有中和病毒的活性.利用细胞中和法测定两株包被(捕获)单克隆抗体3D7(含O/Mya98/XJ/2010株抗体)和7G3(含O/GX/09-7株抗体)对不同病毒的中和抗体值,验证这两株单抗是否具有中和病毒的活性.结果表明:7G3可以中和O/GX/09-7株病毒,但不能中和其他毒株病毒,虽然中和能力不强,但是特异性中和,进一步验证该抗体仅与O/GX/09-7株反应;3D7仅与缅甸98株发生特异性结合反应,与其他毒株均不产生反应,而且中和效价达1:128,属于具有中和能力的单抗抗体.

应用间接血凝(IHA)试验对化隆县的四个乡的绵羊血清200份进行了衣原体病的血清学检测,结果检出羊阳性血清14份,血清阳性率为7%。

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii引起的人畜共患寄生虫病,对于牛羊来说,弓形虫主要侵害幼畜和新生仔畜.国内学者对于牛羊弓形虫病的研究较多,表明我国牛弓形虫感染普遍存在,不同地区的感染率各不相同.羊弓形虫的感染情况较牛弓形虫病严重,同时存在混合感染的现象.

<正>猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病。据有关资料统计表明,在猪的死因中,因患病致死的约占80%以上,而在猪的所有疾病中,传染病约占70%～80%,其中猪瘟、猪丹毒、猪肺疫又占猪传染病的70%。因此,在猪病防治中,猪瘟的防制问题就成为了一个不可忽视的重要方面。我国早已在上世纪50年代

通过对化隆县屠宰场绵羊肉胴体的检疫,发现绵羊感染有住肉孢子虫,感染率为42.22%。感染最多的是膈肌部位,感染率高达37.22%。

应用间接血凝实验(IHA)方法对采自青海省化隆县6个乡镇的120头牦牛血清进行了弓形虫病血清学调查,以抗体效价≥1:64为阳性判定标准,结果检出阳性17份,血清学阳性率为14.17%。

应用阴道海绵栓和氯前列醇处理临床健康适龄繁殖母羊共316只。结果表明:经阴道栓处理的母羊同期发情率为90.63%,用氯前列醇处理的母羊同期发情率为97.58%,两者相比较,用氯前列醇处理的母羊发情率比用阴道栓处理阴的母羊同期发情率提高7%。经阴道栓处理的母羊情期受胎率为65.5%,用氯前列醇处理的母羊情期受胎率为42.15%,两者相比较,用阴道栓处理处理的母羊受胎率比用氯前列醇处理的母羊受胎率提高了13%,差异极显著。

利用优良肉用陶赛特种公羊,采用人工授精技术对本地四个绵羊品种进行杂交改良,测定了陶赛特杂一代羊初生、3月龄、6月龄、12月龄体重,并于当地山谷型藏系羊进行了对比,其体重分别提高了0.7kg,9.51kg,12.5kg,9.9kg,表明杂一代羊具有较强的杂种优势,尤其是与寒藏一代的杂交效果最好。

牛皮蝇是双翅目,皮蝇科,皮蝇属的昆虫,牛皮蝇病是牛皮蝇幼虫寄生于牦牛的背部皮下组织内引起的一种慢性人畜共患寄生虫病,感染后就会不同程度的影响牦牛生产性能.为了及时掌握本地区牛皮蝇感染情况以及防治效果,为今后防治工作提供数据资料和科学依据,笔者从2004-2006年3～4月份对连续三年化隆县牦牛牛皮蝇感染情况进行了调查,现将结果报道如下:

棘球蚴病是一种人畜共患寄生虫病.牛羊受到感染后就会不同程度地影响其生产性能,甚至引起死亡.为了摸清化隆县牛羊棘球蚴感染情况,笔者对化隆县清真牛羊肉定点屠宰场屠宰的1 575头只牛羊进行了调查.现将结果报道如下.

在养鸡生产中,鸡的人工采精存在许多问题,特别是纯种公鸡,因长期连续采精,体力消耗较大,很容易使肾阳亏虚,性机能衰竭,采精量下降,精子密度稀薄,有的出现阳萎,甚至采不出精,造成种用价值低下,经济效益受损.为使种公鸡在整个采精期中,保持足够的性欲,并维持一定的排精水平和较高的精液品质,我们从增强肾阳、滋补肾阴、促进精液的生成等方面出发,运用中药进行试验,收到了一定效果.现报道如下.

39 Han-sheep with small-tail introduced into Qinghai Province were used to measue twelve indexes of live function.The results showed as follows:Activity of serum glutami-pyruvic transaminase 37.63±10.37IU/L;Activity of serum glutamic-axaloacetic transaminase,143.8±61.15IU/L;zinc sulfate turbidity test,4.67±2.72 Kunkel's U;thymol turbidity test,1.22±0.59 Maclagun's U;content of serum total protein,73.1±4.2g/L;content of serum albumin,38.61±5.05g/L;content of serum globulin,34.69±5.27g/L;serum protein fraction(%):albumin,52.91±6.35;α-globulin,10.05±2.92;β-globulin,11.13±2.8;γ-globulin,25.96±4.77;A/G,1.16±0.29.

绵羊链球菌病(民间俗称胆溢病)是绵羊的一种急性热性传染病,对养羊业危害较大,2004年4月化隆县雄先乡农牧民饲养的绵羊有70多只相继发病,死亡32只,通过病理学和病原菌调查,诊断为绵羊链球菌病.报告如下.

对化隆县10只绵羊部分脏器进行了寄生虫区系调查。结果发现:绦虫1种,线虫12种,吸虫2种,住肉孢子虫1种,单体平均荷虫数为617条。优势虫种为捻转血矛线虫、普通奥期特线虫及蒙古马歇尔线虫,感染率分别为100%、100%、80%。