旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone,P4)的干预作用.收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;采用CCK-8法检测培养不同时间后两种ESCs的细胞活力及孕酮作用的影响.结果显示,胶原酶消化法可分离获得高纯度的犬ESCs;将分离的ESCs培养24 h和48 h时,子宫蓄脓犬ESCs的细胞活力显著高于健康犬(P<0.01).用0、5、15、30 ng/mL等不同浓度P4处理两种ESCs,当作用24 h时,两种细胞的活力与相应的对照比均无显著变化(P>0.05);作用48 h时,30 ng/mL的P4可显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),而对子宫蓄脓犬ESCs的增殖具有显著的抑制作用(P<0.05);作用72 h时,3种浓度P4均显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),但对子宫蓄脓犬ESCs的增殖均无显著影响(P>0.05).以上结果表明,子宫蓄脓犬ESCs的快速增殖可能与子宫内膜的囊性增生密切相关,P4可促进健康犬ESCs的增殖,但在一定程度上抑制子宫蓄脓犬ESCs的增殖.

宠物临床治疗方式多为输液观察治疗,而输液可能会带来冷刺激,引起一些不良反应,给宠物输液加热35～39℃ 来使输进动物体内的药物与体温相当就显得尤为重要,这样有利于药物更好的发挥作用.

为了解当前湖南省猪伪狂犬病病毒(PRV)病原特性及基因变异情况,研究于2017—2018年从湖南省长沙、株洲、岳阳和怀化等4个地区疑似发生猪伪狂犬病(PR)的8个猪场采集组织病料8份,经荧光定量PCR检测,其中5份为PRV阳性,将PRV阳性组织样品处理后接种于猪肾上皮细胞(PK15)并连续传代,最终成功分离到5株病毒,且进一步PCR鉴定证明分离的5株病毒均为PRV.其后对5株PRV TCID50进行测定,同时对所有毒株的毒力或免疫相关基因(gB、gG、gH、gI、gL、gM、gE、TK和PK)进行扩增、测序及分析.根据地区来源将5株PRV分别命名为HuN-HH株、HuN-YY株、HuN-NX株、HuN-ZZ株和HuN-LY株,滴度分别为10-6.37、10-7.12、10-7.44、10-7.62和10-7.94 TCID50/100μL.进一步序列分析结果发现研究分离的5株PRV的毒力或免疫相关基因核苷酸序列相对保守,与国内2012年以后流行的PRV变异株同源性最高,与国内流行的传统株和国外疫苗株同源性相对较低,值得注意的是,HuN-HH株gG基因有一段连续的氨基酸序列插入.以上研究结果表明,研究分离的PRV毒株均属于变异株,且部分毒株特定基因序列存在较大变异,但其影响还需要进一步探究.

为了解湖南某规模猪场引起繁殖障碍主要病原的感染情况,本研究通过荧光定量PCR检测了血液样品中的6种病原,发现存在PCV2感染.对阳性样品进行全基因组扩增、克隆和测序后,与国内外其他PCV毒株进行同源性比对,绘制系统遗传进化树,并通过猪肾细胞系对病毒进行分离培养及免疫荧光鉴定.结果显示,样品中分离的2株毒株均为PCV2d型,基因组全长均为1 767 bp,其核苷酸同源性为99.7％,四处差异均位于ORF2区,其中命名为NX-P3-1毒株的第97位精氨酸突变为甘氨酸,位于衣壳蛋白T细胞表位区;与其他毒株相比,与海南HN1407株同源性最高,分别为99.7％和99.6％,遗传亲缘关系较为接近;PCV2d型毒株之间的差异主要位于B细胞表位区;免疫荧光鉴定显示NX-P3-1毒株可稳定感染和增殖.本研究为分析湖南PCV2流行情况提供了参考依据.

猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)是引起猪圆环病毒相关系统疾病的主要病原体,给全球的养猪业造成了巨大的经济损失.PCV2含有11个开放阅读框(Open reading frame,ORF),当前对其ORF1～ORF4所编码的相关蛋白研究较多,了解这4个主要蛋白在PCV2复制中的功能及其与宿主细胞间的相互作用,有助于揭示PCV2复制和致病的分子机制.文中对PCV2 0RF1～ORF4基因所编码蛋白的结构及在病毒生命周期中所发挥的作用进行了综述.

宠物犬很容易出现骨折现象,其中犬髋骨骨折较为常见.2019年6月江苏宿迁某宠物医院所接收一起病例,根据其病因、临床症状及实验室诊断确诊为犬髋骨骨折,并确定对应的治疗方案,手术1周后治愈,预后良好.1个月后,该犬因轻微的撞击再次入院就诊.文章对该病例进行了分析和小结,为完善犬髋骨骨折的治疗方案提供参考.

旨在研究细菌脂多糖(LPS)急性暴露对小鼠睾丸及其功能的影响.将健康雄性小鼠随机分为4组:对照组(Control)、1.25 mg·kg-1 LPS组、2.5 mg·kg-1 LPS组和5.0 mg·kg-1 LPS组,对照组腹腔注射200 μL生理盐水,其余3组注射等体积含不同剂量的LPS,作用12h.收集睾丸组织制作石蜡切片,染色后观察其病理变化,记录体重、睾丸和附睾指数,并测定精子品质相关指标,用RT-qPCR法检测炎症相关基因TNF-α、IL-6、GAS6和TGF-β1的转录,同时用ELISA检测血清中睾酮(T)的含量.结果表明,与对照组相比,LPS急性暴露时,以剂量依赖性方式降低小鼠体重(P＜0.05或P＜0.01),同时显著降低睾丸指数(P＜0.05或P＜0.01)、精子密度(P＜0.01)及精子活力(P＜0.05或P＜0.01),增加精子畸形率(P＜0.05或P＜0.01);使睾丸组织发生不同程度的病理学变化,表现在生精细胞凋亡,曲细精管管腔增大,精子数量减少等;导致血清中睾酮(T)的含量显著下降;另外,LPS还呈剂量依赖方式增加促炎因子TNF-α和IL-6及抑制抗炎因子GAS6和TGF-β1的转录.结果提示,细菌LPS急性暴露可通过破坏机体中炎症因子的平衡,使睾丸组织受到损伤从而导致生精障碍.

热休克蛋白27(Hsp27)是一种结构上高度保守的小热休克应激蛋白,具有多重生物学功能,在调节蛋白质稳态以维持细胞骨架有至关重要的作用.近年来,热休克蛋白(HSPs)在疾病预防和药物开发中取得较大突破,有研究发现在许多病毒感染宿主细胞后,细胞中Hsp27的表达会发生显著变化,表明Hsp27与病毒感染之间有密切关联,但Hsp27在病毒感染中的应用尚不成熟.论文主要介绍病毒感染宿主细胞后,Hsp27通过抑制细胞的自噬 、凋亡 、干扰素形成及维持病毒复制等发挥其在病毒感染中作用,此方面研究为以HSPs为靶点研发抗病毒药物提供了新思路.

研究猪伪狂犬病病毒（PRV）-YY株感染对宿主细胞增殖和热休克蛋白（HSP）27、70和90表达的影响。用Reed-Muench法测定PRV-YY滴度后,用不同病毒量感染PK-15细胞,采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖,并用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和免疫印迹试验（Western blot）分别检测感染后细胞中病毒核酸含量及三种HSPs mRNA和蛋白质表达的变化。结果表明,当用80 TCID 50 和100 TCID 50 的病毒量(滴度为10~6TCID 50 ·0.1 mL -1 )感染细胞时,在所监测的时间内细胞指数均显著低于对照组;当感染60 h时,除10 TCID 50 感染组外,其余各组的细胞指数均极显著低于对照组（P＜0.01）;用10 TCID 50 病毒感染细胞60 h时,细胞中病毒核酸含量达峰值;当病毒黏附结束即感染0 h时,HSP70和90 mRNA的转录升高（P＜0.01）,两者分别在感染6、12 h后表达降低（P＜0.01）,而HSP27在感染0 h升高（P＜0.05）,3 h时极显著高于对照组（P＜0.01）,但在感染48 h后其表达降低;PRV感染细胞后三种HSP蛋白的变化趋势基本与其mRNA水平的变化类似（部分时间点不同）。结果表明,一定滴度的PRV可显著抑制PK-15细胞的增殖,PRV感染可诱导PK-15细胞迅速发生应激反应,使HSP27、70和90表达快速升高,三种HSP的快速应答可能在保护细胞免受PRV-YY的感染损伤起着重要作用。

本试验旨在研究白藜芦醇(RES)对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用,并探索其可能的作用机制.首先,用不同浓度(0、150、200、250、300 μmol/L)的过氧化氢(H2O2)处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h,确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度;然后,用不同浓度(0、2.5、5.0和10.0 μmol/L)的RES分别处理正常细胞24 h,确定RES安全浓度;最后,用安全浓度的RES处理氧化损伤细胞24 h.在整个培养过程中采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖情况;待安全浓度的RES处理氧化损伤细胞结束后采用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测细胞中活性氧(ROS)的含量,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blotting)法分别检测沉默调节蛋白1(SIRT1)/解偶联蛋白2(UCP2)信号通路中关键因子SIRT1和UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量.结果表明:1)用浓度为150μmol/L及以上的H2O2处理细胞8h后,极显著降低细胞存活率(P＜0.01),因此确定150 μmol/L为建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度.2)用10.0μmol/L及以下浓度的RES处理正常细胞24 h后,细胞存活率均无显著变化(P＞0.05);用2.5、5.0和10.0μmoL/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞存活率均显著提高(P＜0.05),且各浓度RES组间无显著差异(P＞0.05).因此,选用5.0 μmol/L为RES的安全浓度.3)用5.0μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后,细胞中ROS的含量极显著降低(P＜0.01);细胞中SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量极显著增加(P＜0.01),而UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量则显著或极显著降低(P＜0.01或P＜0.05).由此可见,适宜浓度的RES可激活SIRT1同时抑制UCP2的表达,UCP2通过负反馈调节方式减少细胞内ROS的生成,从而在一定程度上抑制TM3细胞的氧化损伤.

为探讨不同剂量环磷酰胺作用不同时间后诱导小鼠生精障碍的作用,将80只雄性ICR系小鼠随机分成20、40、80 mg/kg体重环磷酰胺(CTX)处理组和生理盐水对照组,腹腔注射5d,每2d称重1次,2周和4周后分批检测睾丸指数、附睾指数、精子数和精子畸形率,并结合HE染色检测睾丸组织结构变化.结果显示,作用2周时,高剂量的CTX显著影响体重增长,而中低剂量组只有处理后短时间体重降低明显;睾丸的生精指数变化均不显著,但其组织结构发生不同程度的病理变化.作用4周时,只有高剂量组对体重产生显著的作用;生精指数包括睾丸指数、精子数以及精子畸形率,3个组与对照相比均表现出明显差异;睾丸发生病理学病变的程度随剂量的增加而更加明显.采用40 mg/kg CTX腹腔注射5d,作用4周后能建立较为理想的小鼠生精障碍模型.

白藜芦醇是一种天然活性物质,随着对白藜芦醇研究的深入,发现白藜芦醇除了能够提高植物的抗病性,还有益于人类健康的多种生物学活性及药理作用,具有抗肿瘤、抗心血管疾病、治疗突变等生物药理活性.近年来,国内外很多学者对白藜芦醇的部分生物学功能进行了深层研究,由于白藜芦醇的植物资源十分丰富,其临床应用前景广阔,有望成为一种防治疾病的新型药物.本文就近年来发现的白藜芦醇对病毒抑制作用,按照DNA病毒、RNA病毒进行分类列举,并对部分机制进行归纳,为白藜芦醇作为抗病毒药物的应用提供理论支持.

犬瘟热是由犬瘟热病毒侵入犬的机体从而引起的一种高度接触性的急性传染病,文章依据在上海市某动物医院所接收的一例非典型性犬瘟热的病例,对其进行研究,调查内容主要包括主诉及发病情况、诊断结果、治疗方案以及治疗效果几个方面,经过治疗最终病犬病情得到好转.

犬胃肠炎是指胃及肠组织表层黏膜或深层组织发生炎症的疾病,文章依据在湖南益阳某宠物医院所接收的一例病例,根据其病因、临床症状及实验室诊断结果确诊为犬胃肠炎,并提出了相应的治疗方案,最终将其治愈.

基于生物信息学方法,发现并验证了与RBP4基因LS性状(litter size)候选分子标记MspⅠRFLP (SNP G1223C)临近的SNP A1027G(SNPs,single nucleotide polymorphisms),并对大白猪和湖南黑猪群体的RBP4多态性与母猪LS性状的相关性进行了研究.结果表明:RBP4基因SNP G1223C在2个群体中均与母猪LS性状显著相关(P＜ 0.05);RBP4基因SNP A1027G在混合群体中与母猪LS性状显著相关(P＜0.05);这2个多态性位点构建的单倍型也与母猪LS性状显著相关(P＜0.05),其优势单倍型母畜的LS性状值明显优异于单个SNP位点优势基因型的LS性状值.在分子标记辅助育种中采用RBP4单倍型作为LS性状重要候选基因的分子标记比采用单个多态性位点更具价值.

猪细小病毒是引起母猪繁殖障碍的重要病原之一。细胞培养法是体外分离纯化病原最基本的方法。本文介绍了病毒细胞模型的建立、细胞模型在病毒诊断中的应用、病毒在细胞培养模型上培养条件的优化等，并分析了病毒与细胞模型相互作用、抗病毒药物在细胞模型上的研究进展。

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起新生仔猪和断奶仔猪腹泻的主要病原之一.通过免疫母猪,新生仔猪通常可以从初乳和乳汁得到有效保护,但在断奶阶段,母乳的保护消失.有关研究发现,引起断奶仔猪腹泻常见的ETEC菌株均有菌毛F4或F18.这些菌毛是重要的毒力因子,它们使细菌结合到宿主易感肠上皮细胞,在肠内定植繁殖,随后分泌肠毒素引起腹泻.文章针对由菌毛F4和/或F18产毒素大肠杆菌引起的腹泻,概括了在养猪生产中其相关免疫接种途径,包括口服弱毒苗和亚单位疫苗、胶囊疫苗和注射免疫接种等.

Sanguinarine is a benzene phenanthridine isoquinoline alkaloid which can anti-bacterial,anti-in-flammatory,anti-tumor,insecticidal effects and can induce apoptosis,and has been as a new type of drug in medicine and agricultural production.This review summarized research progress of sanguinarine on anti-tumor effects and its mechanism,which could provide a reference for the application of sanguinarine in clinical.

植物雄性不育是利用植物杂种优势的一种重要手段,对植物雄性不育的研究既具有重要理论意义也具有重大的实践价值.随着基因工程技术的快速发展,采用基因工程技术选育雄性不育系变得更加便捷、经济和有效.综述了植物隐性核雄性不育基因及其育性恢复基因的研究进展,介绍了种子生产技术(SPT)体系并列举了与此相关的基因与启动子,分析了各自的优缺点,并对SPT技术的实际应用前景进行了展望.

仔猪腹泻是猪场常见的一种肠道疾病,由于其高发病率和死亡率,严重影响仔猪的健康生长和存活,由于抗生素的使用越来越受到限制,新型的饲料添加剂或药物越来越受到重视.本文主要综述纳米氧化锌和蒙脱石在抗仔猪腹泻中的应用,旨在为仔猪健康生长提供参考.