研究采用有限稀释法将MDBK细胞进行克隆,并放大培养.将2种生物型(致细胞病变型和非致细胞病变型)的牛病毒性腹泻/黏膜病毒混匀,接种克隆的MDBK细胞并收获毒液.采用间接免疫荧光技术检测病毒含量,筛选BVDV敏感细胞.试验成功获得4株单克隆细胞,其中C3株对病毒高度敏感且产毒稳定,确定为BVDV敏感细胞株.

本研究采用有限稀释法将ST细胞进行克隆,将获取的单克隆细胞放大培养后接种猪瘟兔化弱毒株(C株),通过实时荧光定量RT-PCR技术定量检测毒液中病毒含量,筛选对猪瘟兔化弱毒株敏感的细胞株.试验结果获得D3株、C4株、C8株、D5株、E10株、E11株、F9株和H9株共8株ST单克隆细胞.其中,C4株和E11株细胞对C株高度易感,收获毒液RNA拷贝数能够维持在106 copies/mL,并且高峰期毒液拷贝数可达107 copies/mL.

为简便、快速地区分与鉴定伪狂犬病毒感染,该研究针对猪伪狂犬病野毒株与基因缺失株设计了一种荧光定量PCR检测方法,分别选取伪狂犬病病毒gB基因和gE基因的保守区,设计相应引物和探针,通过建立双重荧光定量PCR方法,不仅可以区分临床中野毒株与基因缺失株感染,还可以对伪狂犬病毒进行定量分析.试验结果表明:该研究所建立的检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高,对猪伪狂犬病的诊断检测及疫苗生产具有重要的参考价值,有利于伪狂犬的免疫与净化.

我国医疗技术和科学技术快速、稳定地发展,特别是在一些较为严重的传染病方面,我国医学技术处于国际先进水平.禽流感病毒是一种常见的病毒类型,这种病毒传播十分广泛,并且传播速度也极快,我国在对禽流感病毒检测的方法方面有很多研究.近年,环介导恒温扩增技术得到突飞猛进的发展,我国禽流感的检测具有快速、便捷的特点,在检测中也起到非常重要的作用,该文主要论述禽流感病毒的特点以及环介导恒温扩增技术对禽流感病毒的检测2个方面的内容.