目的:建立可见-紫外分光光度法检测丹眠颗粒总皂苷的含量.方法:采用岛津UV-2501PC可见-紫外分光光度计,检测波长为560 nm.以人参皂苷Re为对照品,经显色测定吸光度,绘制标准曲线计算含量.结果:总皂苷在0.04 ～0.20 μg/mL范围内线性关系良好,回归方程为Y=3.667 3x-0.022 2,r=0.999 0;精密度、重复性、稳定性试验RSD均小于2.0％;平均回收率为98.46％(RSD为1.56％,N=6).结论:本实验方法简便准确、重复性好、灵敏度高、含量测定方法稳定可行,适用于丹眠颗粒中总皂苷的含量测定,可更好控制其质量.

目的:研究建立黔产忍冬叶薄层鉴别方法,为其质量标准的建立提供依据.方法:采用薄层鉴别法,以绿原酸、木犀草苷作为定性鉴别指标,对黔产忍冬叶进行鉴别与分析.结果:绿原酸以乙酸乙酯∶丙酮∶甲酸∶水(7∶3∶1∶1.2)为展开系统,木犀草苷以乙酸丁酯∶甲酸∶水(7∶2.5∶2.5)上层溶液为展开系统,两者均以1％三氯化铁为显色剂,所得薄层色谱图谱供试品与对照品在相应位置上显相同颜色的斑点,斑点清晰、圆整、明显.结论:所建立的薄层鉴别方法简单、快捷,结果易于判定,可作为黔产忍冬叶的薄层鉴别方法.

目的:建立红景天破壁粉碎前后HPLC指纹图谱,分析红景天破壁粉碎前后化学成分的差异,为红景天破壁饮片的质量控制提供依据.方法:采用Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.02％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长:278 nm;流速:0.8 mL/min;柱温:30℃.结果:10批红景天破壁饮片与传统饮片指纹图谱的相似度均在0.900以上,共确定22个共有峰,并指认了1、2、4、14号共有峰分别为没食子酸、红景天苷、酪醇、芦丁.红景天破壁粉碎前后,其色谱峰数目相同.结论:本研究可较全面地反映红景天破壁粉碎前后化学成分的变化情况,可用于红景天破壁饮片的质量控制,并为后期红景天破壁饮片的安全有效性评价提供参考.

目的:在细胞水平上探讨红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞的保护作用并对比两种饮片药效差异.方法:以H9c2心肌细胞为研究对象,实验分为八组,分别为正常组:正常培养基培养8h;模型组:无糖无血清的培养基置于缺氧盒37℃密闭缺氧培养8h;给药组:模型组+红景天传统饮片和破壁饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200 mg·mL-1)进行相关指标检测.采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8)法检测药物对细胞存活率的影响,比色法检测各组细胞培养液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)含量及细胞内丙二醛(Malonic dialdehyde MDA)、肌酸激酶(Creatine kinase CK)、总超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase T-SOD)、三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate ATP)含量.实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase3) mRNA和蛋白相对表达量.结果:与正常组比较,模型组H9c2心肌细胞培养液LDH含量、细胞内MDA、CK含量、细胞Caspase3 mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P＜0.05),细胞内T-SOD、ATP含量均显著降低;与模型组比较,红景天破壁饮片与传统饮片各剂量组均可显著降低H9c2心肌细胞培养液LDH活性,细胞内MDA、CK含量,升高T-SOD、ATP含量(P＜0.05),显著降低受损H9c2心肌细胞Caspase3 mRNA和蛋白相对表达量(P＜0.05),且破壁饮片不同程度优于传统饮片.结论:红景天破壁饮片与传统饮片通过抑制氧化应激损伤,提高细胞活力对H9c2心肌细胞起保护作用,且红景天破壁饮片对H9c2心肌细胞损伤的保护作用优于传统饮片,作用机制可能与调控H9c2心肌细胞的MDA、CK、T-SOD、ATP含量及调节Caspase3 mRNA及蛋白表达水平有关.

目的:建立金钱胆通颗粒中药味茵陈的薄层鉴别及金钱胆通颗粒中虎杖苷含量的测定方法.方法:采用TLC法鉴别茵陈;HPLC法测定虎杖苷的含量,采用kromasil C18(5μm,250×4.6mm)柱;流动相为乙腈-水(16:84),流速:1mL/min;柱温:30℃,进样量:10μL;检测波长:306nm;理论踏板数按虎杖皂苷峰计算应不低于3000.结果:药味茵陈的TLC斑点清晰,阴性对照无干扰.虎杖苷浓度在0.8704～43.52μg·mL-1范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),加样回收率在95.05％～95.91％之间,平均回收率为95.44％,RSD为0.30％(N=9).精密度、稳定性、重复性良好,RSD分别为0.17％、0.27％和0.33％.结论:本研究建立的茵陈薄层鉴别及虎杖苷含量测定方法准确可行,能够有效控制金钱胆通颗粒的质量.