背景:金丝桃苷具有抗炎、抗氧化等多种药理作用,但将其应用于修复子宫内膜损伤的研究并不多见.目的:制备金丝桃苷纳米粒,利用泊洛沙姆407搭载金丝桃苷纳米粒,研究其对大鼠子宫内膜损伤的修复作用.方法:分别制备金丝桃苷纳米粒、泊洛沙姆407水凝胶与泊洛沙姆407水凝胶搭载金丝桃苷纳米粒.取24只雌性SD大鼠,随机分4组,每组6只:模型组、单纯水凝胶组、载药水凝胶组以搔刮法建立子宫内膜损伤模型,分别向子宫内注射PBS、泊洛沙姆407水凝胶、泊洛沙姆407水凝胶搭载金丝桃苷纳米粒,空白对照组仅行开腹不进行造模.造模7 d后取材,苏木精-伊红染色观察子宫内膜形态学变化,采用ELISA法检测子宫内膜组织中白细胞介素1β、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α水平,免疫荧光染色检测宫内膜组织中血管内皮生长因子、角蛋白、波形蛋白的表达.结果 与结论:①苏木精-伊红染色显示,与空白对照组比较,模型组大鼠子宫内膜层变薄,内膜结构不完整,血管及腺体及明显减少稀疏;与模型组比较,单纯水凝胶组大鼠子宫内膜增厚、内膜结构较完整,载药水凝胶组大鼠子宫内膜增厚、内膜结构较完整、腺体较丰富;②与空白对照组比较,模型组的白细胞介素1β、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α水平均升高(P<0.01);与模型组比较,单纯水凝胶组、载药水凝胶组的白细胞介素1β、白细胞介素8、肿瘤坏死因子α水平均下降(P<0.01);③免疫荧光染色显示,与空白对照组比较,模型组的血管内皮生长因子、角蛋白、波形蛋白表达均降低(P<0.01);与模型组比较,载药水凝胶组血管内皮生长因子、角蛋白、波形蛋白表达均升高(P<0.01),单纯水凝胶组血管内皮生长因子表达升高(P<0.01);④结果表明,水凝胶搭载金丝桃苷纳米粒对大鼠子宫内膜损伤有修复作用.

背景:水凝胶作为一类组织工程的支架材料,为移植细胞在体内增殖分化提供了良好的物理支持.目的:探讨水凝胶搭载骨髓间充质干细胞对大鼠受损子宫内膜的修复效果.方法:将分离培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞进行CM-Dil标记,然后制备成泊洛沙姆407-骨髓间充质干细胞复合物.取30只8周龄SD雌性大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、水凝胶组、干细胞组、复合物组,除假手术组外,其余4组建立子宫内膜机械损伤模型,然后每侧宫角分别注射0.2 mL PBS、泊洛沙姆407水凝胶、骨髓间充质干细胞悬液或泊洛沙姆407水凝胶-骨髓间充质干细胞悬液.观察7 d后取出子宫组织,进行苏木精-伊红染色、免疫荧光染色和酶联免疫吸附检测.结果 与结论:①与假手术组相比,模型组、水凝胶组、干细胞组与复合物组内膜厚度变薄(P<0.05),其中水凝胶组、干细胞组和复合物组内膜厚度较模型组均有明显改善(P<0.05),复合物组改善最明显,但水凝胶组与干细胞组间差异无显著性意义(P>0.05);②与干细胞组相比,复合物组CM-Dil标记的骨髓间充质干细胞迁移至子宫内膜数量更多(P<0.01),并且两组细胞均具有向子宫内膜间质细胞分化潜能;③与模型组相比,水凝胶组、干细胞组和复合物组子宫内膜组织中白细胞介素1β、白细胞介素6和和肿瘤坏死因子α水平明显下降(P<0.01),其中,干细胞组和复合物组白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平显著低于水凝胶组(P<0.05),干细胞组白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平低于复合物组(P<0.01),但两组白细胞介素1β水平无显著差异(P>0.05);④结果表明,泊洛沙姆407水凝胶搭载骨髓间充质干细胞治疗子宫内膜损伤具有可行性,为修复受损子宫内膜提供新思路.

目的:该研究通过网络药理学的方法探讨归肾丸治疗薄型子宫内膜的关键核心靶点及相关信号通路等作用机制,进一步运用动物实验加以验证所得靶点,验证归肾丸对薄型子宫内膜的影响.方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库检索归肾丸中8味中药组成的有效化学成分、活性成分靶点和靶点简称;运用GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)检索薄型子宫内膜相关的靶点基因;运用韦恩软件对归肾丸的药物靶点和薄型子宫内膜的疾病靶点进行取交集操作,将交集靶点导入STRING数据库及Cytoscape 3.7.2软件进行可视化分析获得"药物-疾病"的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;再将交集靶点输入Enrichr数据库和David数据库分别进行基因本体(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.以得到的可能核心关键靶点作为理论基础,建立大鼠薄型子宫内膜模型,归肾丸及雌激素干预21d后,通过苏木素·伊红(HE)染色法观察大鼠的内膜厚度;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测表皮生长因子受体(EGFR),基质金属蛋白酶9(MMP9),白细胞介素1β(IL-1β),丝裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)这4个核心关键靶点的蛋白和mRNA的表达水平.结果:通过韦恩软件共获得130个交集靶点;将130个交集靶点导入STRING数据库和Cytoscape软件中,得到包括33个节点,107条边的蛋PPI网络;DAVID 6.8数据库进行GO分析中的功能注释分析,共涉及167个生物过程(BP),22个细胞组分(CC),39个分子功能(MF);DAVID 6.8数据库进行KEGG富集分析,与薄型子宫内膜相关的通路共34条;Western blot和Real-time PCR分别对6组大鼠子宫内膜组织中的EGFR,MMP9,IL-1β,MAPK14蛋白和mRNA的表达结果进行分析,归肾丸能够增强EGFR,MMP9,IL-1β,MAPK14蛋白和mRNA在薄型子宫内膜上的表达.结论:通过网络药理学的理论分析及动物实验的研究结果发现,归肾丸能够有效改善薄型子宫内膜的相关指标,并通过增加EGFR,MMP9,IL-1β,MAPK14蛋白和mRNA表达水平,促进内膜组织增殖,改善内膜偏薄的症状.

去势抵抗性前列腺癌是前列腺癌的难治类型,其预后较差,现代医学治疗手段有限.崔学教教授认为,去势抵抗性前列腺癌病机为本虚标实,正气、脏腑亏虚为本,气滞血瘀、毒结下窍为标.辨证论治应扶正与去邪并行,强调补法与通法的应用,治以益肾健脾扶正、疏肝行气散结、解毒活血化瘀为法,并随证加减、个体化施治,可取得较好临床疗效.

目的 验证同源基因A10(hoxA10)对10号染色体缺失的磷酸酶、张力蛋白同源基因(pten)、磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)和蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响.方法 设计SD大鼠骨髓间充质干细胞hoxA10基因的短发夹RNA(shRNA)靶序列,并构建pLVSHG01-Rat HoxA10重组慢病毒.用敲低型慢病毒感染SD大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs),将BMSCs分为感染组(感染hoxA10敲低型慢病毒)和空白对照组(未感染).用嘌呤霉素筛选出感染成功的细胞株后,以蛋白质印迹法检测感染后BMSCs中HoxA10蛋白表达,用实时荧光定量反转录-PCR法检测各组骨髓间充质干细胞中hoxA10、pten、pi3k和akt基因的表达水平.用双染流式细胞凋亡试剂盒检测各组细胞的凋亡率和周期.结果 成功构建了hoxA10低表达的SD大鼠骨髓间充质干细胞,空白对照组和感染组的hoxA10基因表达量分别为6.22±0.20和3.09±0.06;这2组的pten基因表达量分别为1.97±0.18和5.09±0.07;这2组的pi3k基因表达量分别为6.06±0.05和2.72±0.10;这2组的akt基因表达量分别为5.98±0.09和2.48±0.35.上述指标:空白对照组与感染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001).空白对照组的细胞凋亡率(18.88±1.71)％明显低于感染组(36.01±0.45)％,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 HoxA10基因能够负向调控pten/pi3 k/akt信号通路.

目的 通过网络药理学方法,对崔学教教授前列腺癌自拟方治疗前列腺癌的潜在机制进行预测分析.方法 使用TCMSP、TCMID数据库检索并查阅文献获得自拟方15味药物的主要活性成分及作用靶点;利用GeneCards等数据库查询疾病靶点;利用Venn软件获取药物与疾病共同靶点;通过String平台与Cytoscape 3.7.2软件对共同基因进行蛋白互作网络分析;利用David、Metascape数据库对共同基因进行GO、KEGG等生物通路富集分析,使用GEPIA数据库验证关键基因表达量.结果 自拟方15味药物共得到140个活性成分及278个靶点,前列腺癌疾病靶点1 1 046个,二者共同靶点260个,根据度值分析,关键活性成分为quercetin、kaempferol、luteolin、ursolic acid,关键靶点为PTGS2、PTGS1、PRSS1、AR.蛋白互作网络分析显示核心靶点为CXCL8与APP.GO分析得到2 665个条目,主要包括生物刺激、生物调节、细胞代谢等;KEGG富集分析得到202个条目,主要涉及癌症、细胞周期、细胞凋亡、血管生成等.根据-log10P确定Pathways in cancer为首要通路.结论 崔学教教授自拟方通过多靶点、多通路的协同作用,抑制肿瘤细胞增殖,促进凋亡,抑制迁移及血管生成,从而达到其抑制前列腺癌的目的.

目的 运用数据挖掘分析治疗遗精中成药的组方规律.方法 筛选《中国药典》和《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》中收录的治疗遗精的中成药,基于中医传承辅助平台(V2.5),采用改进互信息法及复杂系统熵聚类等方法对所收集中成药的组方规律进行分析.结果 共收集170首处方,主治证候主要为肾阳虚证、肾精亏虚证、肾虚不固证.涉及中药242味.其中补益药出现频次最高,固涩药次之;药性中使用频率最高的为温性;药味主要为甘味,其次为辛、苦;主要归肾、肝、脾经;单味药出现频次≥20％的有19味.使用频率最高的单药为熟地黄(50.29％).在支持度为20％、置信度为0.6的情况下,共有25个核心用药组合,34条药物间关联规则.经复杂熵聚类运算分析,得到核心药物组合10个,新处方5首.结论 治疗遗精中成药的适用症候以肾阳虚证、肾精亏虚证、肾虚不固证为主;主要病机为肾虚;治法以补肾固精、益肾填髓为主,辅以益气养血法;处方多以左归丸为主方进行加减,对临床治疗遗精及新药研发具有一定参考意义.