为了解福建地区猪源CTX-M阳性大肠杆菌耐药性、耐药基因流行情况以及耐药质粒特征,本研究采用琼脂二倍稀释法测定福建地区分离的67株猪源CTX-M型超广谱β-内酰胺酶阳性大肠杆菌对13种抗菌药物的敏感性,通过PCR检测其重要的耐药基因;通过供体菌与受体菌(C600)的接合转移试验,检测携带CTX-M耐药基因耐药质粒的水平转移情况,并测定接合子的药物敏感性变化以及耐药质粒的复制子类型.结果显示,分离菌株对头孢噻呋(100％)、头孢噻肟(100％)和四环素(94.0％,63/67)耐药性较高,对阿米卡星相对敏感,耐药菌株仅占7.5％(5/67).耐药基因检测结果显示,53.7％(36/67)的分离株携带3个以上耐药基因,黏菌素耐药基因mcr-1(49.3％,33/67)和氟苯尼考耐药基因floR(37.3％,25/67)的检出率较高,氟喹诺酮类耐药基因aac(6')-Ib-cr和oqxAB、四环素类耐药基因tetA、酰胺醇类耐药基因cmlA和磷霉素耐药基因fosA3的检出率在10.4％～19.4％,氨基糖苷类耐药基因rmtB(4.5％,3/67)的检出率最低;其中以CTX-M+mcr-1+floR耐药基因的组成模式流行为主,检出率为25.4％(17/67).通过接合转移试验共获得21株接合子,与受体菌C600相比,其对受试药物,如头孢噻呋、头孢噻肟和庆大霉素等的最小抑菌浓度(MIC)提高了 2～32倍.复制子分型结果显示17株分离菌分型成功,4株分离菌未能分型,其中以IncF型质粒为主.福建地区猪源CTX-M阳性大肠杆菌对抗菌药物呈较为严重的耐药性,耐药基因的携带率普遍较高且以mcr-1和floR基因流行为主,耐药质粒以IncF型为主.本研究为福建地区猪源大肠杆菌耐药性的风险评估与抗菌药的合理应用提供科学依据.

目的 为了解耐第三代头孢菌素的宠物源大肠杆菌对公共卫生的影响,测定宠物源大肠杆菌耐药性情况、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的流行性及其分子传播机制,以期对其风险评估提供科学依据.方法 2014年从广州市4个动物医院采集92份患病犬猫的肛门拭子,共分离56株大肠杆菌.通过采用琼脂二倍稀释法测定17种抗菌药物的敏感性;采用PCR方法测定ESBLs的流行性及种族系统进化关系;通过接合转移试验获得CTX-M接合子,并对接合子进行复制子分型.结果 药敏试验结果表明,除黏菌素(7.1％)、头孢西丁(16.1％)和头孢他啶(10.7％)稍敏感外,有11种抗菌药物的耐药率均达到50％以上,其中动物专用的第三代头孢菌素,头孢噻肟和头孢噻呋耐药率分别为55.4％和57.1％.ESBLs检测结果表明,13株携带有CTX-M,检出率为23.2％ (13/56),其中主要流行的亚型依次为CTX-M-14、CTX-M-65和CTX-M-55;7株CTX-M基因阳性菌成功接合转移,主要为FIB型复制子.未检测到TEM、OXA和SHV型.种族系统进化关系显示,分离株主要分布在A组和B1组.结论 患病犬猫的肛门拭子分离的大肠杆菌耐药性较为严重,其中以共生型为主.分离株对第三代头孢耐药的机制以产CTX-M-14,CTX-M-65和CTX-M-55酶为主.提示宠物与人之间耐头孢菌素药物的大肠杆菌的互相传递存在风险.

目的 对福建地区分离的猪源大场杆菌进行耐药性测定以及对ESBLs流行性进行分析,以期为临床合理用药科学提供依据.方法 采用琼脂稀释法测定373株菌大肠杆菌对12种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法检测ESBLs耐药基因的携带情况以及分析CTX-M阳性菌的种系发育关系.结果 分离株对甲氧苄啶/磺胺甲嗯唑、萘啶酸、氟苯尼考及氨苄西林耐药率较高,分别为93.8％、82.8％、73.7％和70.0％;对恩诺沙星、四环素、庆大霉素、多西环素、环丙沙星、卡那霉素、头孢噻呋和头孢噻肟的耐药率依次为54.4％、53.1％、52.0％、46.6％、44.0％、41.0％、35.9％和30.8％.在373株大肠杆菌中,共有122株菌携带有ESBLs耐药基因,检出率为32.7％,其中CTX-M、TEM及OXA的检出率分别是18.0％(67)、12.1％(45)和7.5％(28),其中CTX-M的阳性菌中以CTX-M-14最为流行,其次是CTX-M-65和CTX-M-55;其种系发育显示分离株主要分布在A群.结论 福建地区猪大肠杆菌对抗菌药表现出较强的耐药性,ESBLs在猪源大肠杆菌中广泛流行,CTX-M是其主要流行的基因型,并且多数菌以共生型大肠杆菌为主.

为了解闽西地区规模化猪场大肠杆菌对临床常见氨基糖苷类药物的敏感性及rmtB耐药基因流行情况,试验对从11个规模化猪场采集的237份猪肛门拭子进行菌株分离与鉴定,采用琼脂二倍稀释法测定分离得到的菌株对氨基糖苷类药物的最低抑菌浓度(MIC),并通过PCR方法检测rmtB耐药基因流行情况.结果表明:通过分离培养得到230株大肠杆菌,经生化鉴定和16S rRNA分析符合大肠杆菌特征;分离菌株对链霉素的耐药率最高为61.3％ (141/230),阿米卡星耐药率最低为22.2％(51/230),庆大霉素和卡那霉素的耐药率分别为56.1％(129/230)和42.6％ (98/230);PCR检测显示,有36株大肠杆菌携带rmtB耐药基因,检出率为15.7％(36/230).说明闽西地区大肠杆菌对氨基糖苷类药物耐药性较为严重,rmtB基因在菌群中流行较广.

Polyphenol oxidase(PPO,EC.1.14.18.1) is an enzyme that is very important in the browning of fruit and vegetable.Browning of potato in the process of storage and process usually is caused by the effect of PPO itself.In this paper,we partly purified the PPO from potato and studied some physical and chemical characters of this enzyme.Optimum temperature and pH were determined to be 30℃ and 6.0,respectively.The Michaelis-Menten constant(K_m) and the maximal velocity(V_m) were determined to be(7.24) mmol/L and 617.0 μmol/(L·min) at 30℃ and pH=6.8.The enzyme activity was stable at the pH ranging from 5.15~8.75 and at 50℃.The inhibitory effects of 2-hydroxy-3-methoxybenzoic acid,4-methoxysalicylic acid,5-methoxysalicylic acid,3-hydroxy-4-methoxybenzoic acid,and 4-hydroxy-3-methoxybenzoic acid on potato PPO have been studied.The inhibitor′s concentration leading to 50% activity lost(IC_(50)) of them were determined to be 1.78,0.28,0.53,0.14 and 2.49 mmol/L,respectively.The inhibition of these benzoic acid derivatives on the enzyme belongs to reversible and competitive type on the enzyme.The inhibition constant(K_I) was determined to be 1.56,0.24,0.46,0.12 and 2.37 mmol/L,respectively.