双侧股四头肌腱断裂临床上较为少见,多见于各种慢性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、慢性肾脏病、结核病、强直性脊柱炎、继发性甲状旁腺功能亢进等慢性疾病[1-2].慢性肾脏病患者多伴随全身多系统功能障碍,其中慢性肾脏病-矿物质和骨异常(chronic kidney disease-mineral and bone disorder,CKD-MBD)是慢性肾脏病患者特有的并发症[3],肾脏无法排除多余的磷及肠道对钙的吸收减少,引起继发性甲状旁腺功能亢进、骨钙化异常、骨质疏松、骨折等.2022年5月上海中医药大学附属曙光医院收治1例肾衰竭伴自发性双侧股四头肌腱断裂患者,现报告如下.

目的 探讨沉默长链非编码RNA(lncRNA)LINC00472对脂多糖(LPS)诱导肾小管上皮细胞损伤的影响及其机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞系HK-2(以下称HK-2细胞),随机分为对照组、LPS组、LPS+si-LINC00472组、LPS+si-NC组、LPS+miR-136-3p组、LPS+miR-NC组、LPS+si-LINC00472+anti-miR-136-3p组和LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组.LPS+si-LINC00472组转染si-LINC00472,LPS+si-NC组转染si-NC,LPS+miR-136-3p组转染miR-136-3p,LPS+miR-NC组转染miR-NC,LPS+si-LINC00472+anti-miR-136-3p组转染si-LINC00472、anti-miR-136-3p,LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组转染si-LINC00472、anti-miR-NC,转染6 h后给予1μg/mL LPS刺激24 h.LPS组不予转染,仅给予1μg/mL LPS刺激24 h.对照组常规培养,不予转染和LPS刺激.收集各组干预后细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA LINC00472、miR-136-3p表达,采用MTT法检测再培养48 h细胞增殖活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用ELISA法检测培养上清液IL-6、IL-8,采用Western blotting法检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4)蛋白表达.通过LncBase Predicted v.2在线预测网站、starBase数据库预测lncRNA LINC00472与miR-136-3p、miR-136-3p与PDCD4的结合位点,并通过双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA LINC00472与miR-136-3p、miR-136-3p与PDCD4的靶向调控关系.结果 LPS组lncRNA LINC00472相对表达量明显高于对照组,miR-136-3p相对表达量明显低于对照组,细胞增殖活性亦明显低于对照组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平均明显高于对照组(P均<0.05).LPS+si-LINC00472组lncRNA LINC00472相对表达量明显低于LPS+si-NC组,miR-136-3p相对表达量明显高于LPS+si-NC组,细胞增殖活性亦明显高于LPS+si-NC组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平均明显低于对照组(P均<0.05).LPS+miR-136-3p组miR-136-3p相对表达量和细胞增殖活性均明显高于LPS+miR-NC组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平和PDCD4蛋白相对表达量均明显低于LPS+miR-NC组(P均<0.05).LPS+si-LINC00472+anti-miR-136-3p组miR-136-3p相对表达量和细胞增殖活性均明显低于LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组,而细胞凋亡率及培养上清液IL-6、IL-8水平和PDCD4蛋白相对表达量均明显高于LPS+si-LINC00472+anti-miR-NC组(P均<0.05).经LncBase Predicted v.2在线预测网站和starBase数据库预测并经双荧光素酶报告基因实验验证,lncRNA LINC00472与miR-136-3p存在靶向结合位点,miR-136-3p与PDCD4存在靶向结合位点.结论 沉默lncRNA LINC00472可通过促进miR-136-3p表达、抑制PDCD4表达,减轻LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤.

目的:研究顺铂短期给药诱发小鼠药源性证候的属性及对类固醇激素合成功能的影响.方法:40只雄性ICR小鼠随机分为对照组及顺铂不同剂量(3、5、10 mg·kg-1·d-1)组,每组10只.各药物干预组小鼠腹腔注射相应剂量的顺铂,连续5 d.分别于干预5 d后和停药5 d后,观察小鼠体征(体质量、摄食量、腋温、爪色泽),并进行行为学测试(抓力、旷场试验和转棒试验).观察期后,取血清;分离肾脏、心脏、胸腺和脾脏,计算脏器指数;收集肾上腺和睾丸.ELISA检测血清皮质酮和睾酮含量;HE染色后光镜下观察肾上腺与睾丸组织形态学变化;PCR、Western blot分别检测肾上腺皮质类固醇激素合成酶和睾丸睾酮合成酶相关的mRNA、蛋白表达.结果:①干预5 d后,顺铂10 mg·kg-1·d-1组小鼠体质量、摄食量、腋温、水平运动及垂直运动较对照组均显著降低(P＜0.05,P＜0.01);顺铂3、5mg·kg-1·d-1组小鼠腋温明显低于对照组,而爪色r值高于对照组(P＜0.05,P＜0.01).停药5 d后,顺铂10 mg·kg-1·d-1组小鼠体质量、摄食量、在棒时间、抓力、腋温、爪色r值、水平运动及垂直运动较对照组均显著降低(P＜0.05,P＜0.01);顺铂3、5 mg·kg-1·d-1组小鼠垂直运动较对照组亦明显减少(P＜0.01).②与对照组相比,10 mg·kg-1·d-1顺铂作用显著抑制小鼠脾脏、胸腺、心脏,脏器指数明显降低(P＜0.05,P＜0.01),而肾脏指数显著升高(P＜0.01);5 mg·kg-1·d-1顺铂作用亦抑制心脏(P＜0.05).③形态学观察显示,顺铂10mg·kg-1·d-1组小鼠肾上腺皮质球状带细胞肿胀明显,顺铂5、10mg·kg-1·d-1组小鼠可见各级生精细胞排列略紊乱,睾丸间质细胞收缩明显.④与对照组相比,顺铂10 mg·kg-1·d-1组小鼠血清皮质酮含量显著升高(P＜0.01),血清睾酮含量无明显变化.⑤与对照组相比,顺铂3 mg·kg-1·d-1组小鼠肾上腺Star、Cyp21a1的mRNA表达受到抑制(P＜0.05),而顺铂10mg·kg-1·d-1组小鼠肾上腺Star、Cyp11b1、Cyp21a1的mRNA表达及StAR、CYP21A2、CYP11B1蛋白表达显著上调(P＜0.05,P＜0.01).⑥与对照组相比,10 mg·kg-1·d-1顺铂作用显著抑制睾丸 StAR、CYP1 1A1、CYP17A1、HSD3B2的 mRNA 与蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01);5 mg·kg-1·d-1 顺铂干预显著抑制 Star 和Hsd3b2的 mRNA 表达(P＜0.05,P＜0.01);3 mg·kg-1·d-1 顺铂作用亦显著抑制 Cyp17a1 和Hsd3b2的mRNA表达(P＜0.01).结论:顺铂短期给药可诱发小鼠虚证表现,以精气亏虚为主,其物质基础与类固醇激素合成及储备下降有关.

目的 研究顺铂不同给药方案对小鼠类固醇激素合成及储备功能的影响.方法 40只雌性ICR小鼠分为4组,顺铂连续和间隔造模组以及两个对照组.顺铂连续造模组给药7 d,每天注射3 mg/kg顺铂;间隔造模组每周注射1次10 mg/kg顺铂,共4次.末次造模前进行旷场实验、转棒疲劳实验、抓力测试;次日处死前称体重,摘取小鼠心脏、脾、胸腺和双侧肾并称重;RT-qPCR检测下丘脑GnRH和CRH、垂体Pomc、Fshb、Lhb、Pou1f1基因表达,以及肾上腺和卵巢类固醇合成酶(StAR、Cyp11a1、Cyp21a1、Cyp17a1、Cyp11b1、Hsd3b2、Cyp19a1、Hsd17b1)及受体(Esr1、Esr2和Gper1)基因表达;Western Blot检测肾上腺和卵巢StAR、CYP11A1、CYP21A2和CYP11B1蛋白表达.结果 与对照组比较:(1)不同频次顺铂造模均可抑制小鼠体重增长,顺铂累积后可以诱导小鼠气虚证表现,并抑制脏器质量.(2)不同频次顺铂造模均能加速激活原始卵泡分化,产生大量闭锁卵泡,诱导膜细胞及颗粒细胞凋亡,健康的成熟卵泡减少;但对肾上腺组织和细胞形态影响不大.(3)连续造模后肾上腺StAR蛋白表达下调;间隔造模后StAR升高,但下调CYP11B1蛋白表达.(4)连续造模后,卵巢Cyp11a1、Hsd3b2、Esr1和Gper1基因表达上调,Star和Cyp17a1基因表达下调;间隔造模后StAR蛋白表达和Hsd3b2基因表达下调.(5)顺铂连续造模后下丘脑GnRH和CRH基因表达明显下调.(6)顺铂连续造模后垂体Pomc、Fshb、Pou1f1基因表达升高,而间隔造模组Lhb表达下降.结论 顺铂能够诱发小鼠气虚、精气不足证的相关表现;合成类固醇激素的卵巢受到选择性损伤大于肾上腺,短期连续给药也进一步抑制HPA轴和HPG轴的高级中枢下丘脑和垂体功能.

目的 观察清源生化汤辅助治疗多发伤继发急性肺损伤(ALI)患者的临床疗效.方法 选取2016年2月—2019年6月收治的89例多发伤继发ALI患者的临床资料进行分析,根据治疗方法不同分为对照组(常规治疗,37例)和观察组(清源生化汤联合常规治疗,52例),分析两组患者治疗后的临床疗效.结果 治疗后,观察组氧合指数、最大中期呼气流量(MMEF)、用力肺活量(FVC)、1 s用力呼气容积(FEV1)水平显著高于对照组(P<0.05);治疗后,观察组血清超氧化物歧化酶(SOD)浓度显著高于对照组,血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、一氧化氮(NO)浓度显著低于对照组(P<0.05);观察组入住ICU时间、总住院时间显著短于对照组(P<0.05).结论 清源生化汤可改善多发伤继发ALI患者呼吸力学和肺功能,缩短住院时间,其机制可能与降低炎症反应,减轻氧化应激损伤有关.

目的 探讨法尼酯X受体(FXR)特异性激动剂GW4064抑制结肠癌细胞生长浸润的机制.方法 体外培养人结肠癌细胞系HT-29,用浓度为0、0.1、1、3、5、7、10 μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞72 h,采用MTT法检测细胞活力;用浓度为0、1、5μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞24 h,用相差显微镜观察细胞形态;用浓度为0、1 μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞24 h,采用细胞划痕实验检测细胞浸润的变化;用浓度为0、1、5 μmol/L的GW4064分别处理HT-29细胞24h,采用PCR检测FXR mRNA和基质细胞衍生因子1(SDF-1)mRNA表达的变化;用浓度为0、1、5、7μmol/L的GW4064分别处理24 h,采用ELISA法检测细胞培养上清液中SDF-1表达的变化.于裸鼠皮下接种HT-29细胞建立裸鼠成瘤模型,灌胃给予GW4064或溶剂DMSO,16d后检测肿瘤生长情况及瘤体中FXR与SDF-1 mRNA的表达.结果 GW4064处理HT-29细胞后,细胞生长受到抑制,且呈剂量依赖性,1、3、5、7、10 μmol/L GW4064组HT-29细胞的生长活力与对照组(0μmol/L)相比差异均有统计学意义(P均＜0.05).用相差显微镜观察可见GW4064处理HT-29细胞后,细胞收缩变圆,从瘦长的细胞向表皮样细胞改变.细胞划痕实验结果显示GW4064处理HT-29细胞后,细胞迁移距离变短,与对照组(0μmol/L)相比差异有统计学意义(P＜0.05).PCR检测结果显示GW4064处理后FXR mRNA表达呈剂量依赖性增加,而SDF-1mRNA表达则相反.ELISA检测结果显示细胞培养上清液中SDF-1的表达量随着GW4064浓度的增加而逐渐下降,1、5、7 μmol/L GW4064组与对照组(0μmol/L)相比差异均有统计学意义(P均＜0.05).给予GW4064后,荷瘤小鼠肿瘤体积变小,与对照组(给予DMSO)相比差异有统计学意义(P＜0.05),并且瘤体内FXR mRNA表达增加、SDF-1 mRNA表达减少.结论 FXR激活后抑制了结肠癌细胞生长浸润,同时抑制了结肠癌细胞SDF-1的表达分泌.

Objective: To investigate the mechanism of the farnesoid X receptor (FXR) activation by GW4064 to inhibit the growth of colon cancer cells. Methods: The effects of specific FXR agonist (GW4064) on the growth of HT-29 cells were studied in vitro by MTT. The infiltration and metastasis of HT-29 cells were detected by the transwell inserts. The m RNA expression of FXR and MMP-7 were determined by RT-PCR, The protein expression of FXR and MMP-7 were measured by Western blot. Results: MTT results showed that the growth inhibition rate of GW4064 in human colorectal HT-29 cells was concentration dependent; Transwell inserts results showed that GW4064 inhibited the invasion and metastasis of colon cancer cells. Compared with the control group, the difference was statistically significant (P＜0.05). RT-PCR and Western blot display GW4064 promoted FXR m RNA and protein expression and inhibited the expression ofMMP-7. The expression of m RNA and protein was significantly different from that of the control group (P＜0.05).Conclusion: GW4064 inhibited metastasis of colon cancer cells. The expression of m RNA and protein of FXR was up-regulated by FXR specific agonist in cell line HT-29, and MMP-7 is just opposite. The activation of FXR may inhibit the metastasis of colon cancer cells by inhibiting MMP-7.

目的 观察清源生化汤辅助治疗胸部创伤后脓毒症患者对多脏器的保护作用,探讨其保护机制.方法 将77例胸部创伤后脓毒症患者随机分为2组,对照组38例给予常规西医综合治疗,包括处理原发病、迅速止血、纠正酸中毒、应用抗生素、营养支持、防治低体温等,观察组39例在对照组基础上加清源生化汤口服或鼻饲.观察2组治疗前及治疗7 d后白细胞计数(WBC)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、APACHEⅡ评分、凝血功能指标以及多器官功能障碍指标变化情况.结果 2组治疗7 d后WBC、PCT、CRP、APACHEⅡ评分均显著降低(P均<0.05),且观察组的降低幅度明显高于对照组(P均<0.05);2组凝血功能指标[血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、D-二聚体(D-D)、血浆纤维蛋白原(FIB)]和多器官功能障碍指标[平均动脉压(MAP)、心率(HR)、氧合指数(p(O2)/FiO2)、血清肌酐(SCr)、血浆总胆红素(TBil)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、腹内压、全身性感染相关性器官功能衰竭评分(SOFA评分)]均显著改善(P均<0.05),且观察组的改善幅度优于对照组(P均<0.05).结论 清源生化汤辅助治疗胸部创伤后脓毒症疗效显著,可以有效改善多器官功能障碍指标,减轻炎性反应、改善凝血功能、促进体内毒害物质排出、抑制血栓形成、改善微循环可能是清源生化汤发挥多脏器保护作用的机制.

Objective:To study the clinical effect of Qingbu therapy of traditional Chinese medicine in the treatment of post-traumatic systemic inflammatory response syndrome. Methods:Forty-eight systemic inflamma-tory response syndrome cases were divided randomly into control group(n=24) and treatment group(n=24). Treatments including treating primary lesion,anti-shock,oxygen therapy,infection prevention,hemostasis,and other necessary supportive measures were administrated in the control group,while,Qingbu formulas were ad-ministrated through gavage in treatment group besides the treatment in the control group. On the 1st day, 3rd day,5th day and 7th day,vital signs were recorded,and blood PCT,IL-6 and IL-8 level were detected. Results:Compared with the control group(45.83%),the effectiveness increased significantly in the treatment group(66.67%)(P<0.05). On the 1st day and 3rd day treatment,plasma PCT,IL-6 and IL-8 level were of no significant differences,but on the 5th day and 7th day,plasma PCT,IL-6 and IL-8 level decreased signif-icantly(P<0.05). Conclusions:Qingbu therapy of traditional Chinese medicine could contribute to reducing blood cell inflammatory factors level,and thus it relieve the post-traumatic systemic inflammatory response and improve clinical efficacy.

目的:观察复方卡尼汀注射液治疗病毒性肝炎的疗效.方法:对照组30例,男性24例,女性6例,年龄(41±s 11)a,常规保肝治疗(菌栀黄20mL,iv,gtt,qd,维生素C 2.0 g及维生素B6 0.2g,iv,gtt,pd等),疗程4 wk.治疗组30例,男性24例,女性6例,年龄(45±10)a,常规保肝治疗加用复方卡尼汀注射液2支,iv,gtt,qd,疗程4wk.结果:2组临床疗效比较差别有显著意义(P＜0.05);2组丙氨酸转氨酶(ALT)治疗前后比较差别均有显著意义(P＜0.05),血清总胆红素(TB)治疗前后比较,治疗组差别有显著意义(P＜0.05),对照组差别无显著意义(P＞0.05);治疗后2组组间比较ALT差别无显著意义(P＞0.05),TB差别有非常显著意义(P＜0.01).2组均无明显副作用.结论:复方卡尼汀注射液是一种有效安全的保肝药,尤以降低TB作用更佳.