目的 观察活血解毒方对HSG细胞凋亡及自噬表达的影响.方法 活血解毒方中药冻干粉干预IFN-γ+TRAIL联合诱导的HSG细胞凋亡,以白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)作为阳性对照组,实时荧光定量(quantitative real-time fluorescence,PCR)及蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞凋亡内源性途径中及自噬相关蛋白与mRNA的表达、激光共聚焦检测自噬情况.结果 与空白组比较,模型组Bax、LC3B蛋白相对表达量明显升高(P＜0.01),而Bcl-2蛋白相对表达量明显降低(P＜0.01);与模型组比较,两治疗组Bax、LC3B蛋白相对表达量明显降低(P＜0.01),Bcl-2蛋白相对表达量明显升高(P＜0.01);与TGP组比较,中药组LC3B蛋白相对表达量降低(P＜0.05);与空白组比较,模型组Bax mRNA相对表达量明显升高(P＜0.01),Bcl-2 mRNA相对表达量明显降低(P＜0.01);与模型组比较,两治疗组Bax mRNA、LC3B mRNA相对表达量明显降低(P＜0.01),Bcl-2 mRNA相对表达量均有不同程度的升高(PTGP组＜0.05,P中药组＜0.01);与TGP组比较,中药组Bcl-2 mRNA相对表达量明显升高(P＜0.01);空白组呈现正常的自噬过程,模型组表现为大量的自噬溶酶体和自噬体聚集物,两治疗组表现为相对较少的自噬体和的自噬溶酶体聚集物,且中药组自噬程度更低.结论 活血解毒方可以通过调节内源性途径延缓细胞凋亡及自噬的发生.

目的 通过观察卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve,DOR)小鼠促排卵情况及卵巢储备功能,探讨乌萸汤对DOR小鼠的治疗作用.方法 以动情周期异常为DOR造模成功标准,将12只造模成功的24周龄C57BL/6J雌性小鼠随机分为高龄组和治疗组,6周龄C57BL/6J雌性小鼠为青年组.治疗组予乌萸汤灌胃8周,青年组和高龄组予等量蒸馏水灌胃.用药第56天起,小鼠腹腔序贯注射妊马雌酮及绒促性素,取卵进行体外受精实验观察其卵母细胞数、成熟卵数及受精卵数,血清抗苗勒管激素检测,卵巢HE染色观察卵巢内各级卵母细胞数量和质量、免疫荧光染色检测α-tubulin及Ki67表达.结果(1)治疗组小鼠血清抗苗勒管激素较高龄组有明显好转(P<0.05),且与青年组相比无统计学差异(P>0.05);(2)促排后,高龄组卵母细胞数、成熟率、受精率较青年组明显减少(P<0.05),治疗组与高龄组相比均有所升高(P<0.05);(3)高龄组卵巢略萎缩、髓质组织多,其内各级卵母细胞数量减少形态不佳,闭锁卵泡较多;治疗组髓质有所减少,生长卵泡细胞完整,形态有所好转;(4)治疗组小鼠卵巢α-tubulin及Ki67表达阳性率较高龄组有所升高(P<0.05).结论 乌萸汤能够改善DOR小鼠卵巢储备功能及卵巢低反应状态,从而提高生殖能力,具有一定的治疗作用.

目的 通过卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)技术,探讨乌萸汤对体外培养的高龄小鼠卵母细胞能量代谢相关影响.方法 6周龄C57BL/6J雌性小鼠促排后取卵母细胞培养于M2培养基为青年组,24周龄C57BL/6J雌性小鼠卵母细胞为实验组,将实验组卵母细胞分别培养于基础培养基、乌萸汤含药血清培养基、山茱萸环烯醚萜苷类提取物培养基中,并称其为高龄组、乌萸汤组、山茱萸提取物组.各组培养24小时后分别检测各组卵母细胞的第一极体排出率、ATP含量、线粒体数量及膜电位变化、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPKα)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPKα)、线粒体增生有关的过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(peroxisome proliferators-activated receptor gamma coactivator-1α,PCG-1α)蛋白的表达.结果(1)与青年组相比,高龄组第一极体排出率、ATP含量、线粒体数量及膜电位变化、SOD酶活性均有所降低,ROS含量升高,AMPKα、p-AMPKα、PGC-1α 蛋白的表达降低(P<0.05).(2)与高龄组相比,乌萸汤组第一极体排出率、ATP含量、线粒体数量、SOD酶活性均有所升高,AMPKα、PGC-1α蛋白表达量有所增多(P<0.05),但线粒体膜电位变化、ROS及p-AMPKα含量均无明显差异(P>0.05).(3)与高龄组相比,山茱萸提取物组第一极体排出率、ATP含量、线粒体数量、SOD酶活性、p-AMPKα蛋白含量有明显升高(P<0.05),线粒体膜电位变化、ROS、AMPKα、PGC-1α蛋白表达量无明显差异(P>0.05).结论 乌萸汤能够通过影响高龄小鼠卵母细胞的线粒体功能,从而改善其能量代谢和氧化应激状态,促进卵母细胞培养.

干燥综合征作为一种难治的结缔组织病,可归属于中医学"燥痹"范畴.中医治疗该病疗效确切,正在逐步成为新的研究热点.在玄府理论的指导下,根据玄府与干燥综合征的相关性,笔者认为燥痹的发病机制可大致分为燥邪郁肺、气津失布,燥毒痰瘀、变证丛生及元气虚损、精困神阻3个阶段,并由此提出了开通玄府法治疗燥痹:辛药为主的直接开通玄府法和以通为主的间接开通玄府法,以此剖析玄府理论在燥痹发病过程中的重要性,希望能进一步指导临床治疗.

目的:基于AMPK信号通路蛋白及基因表达,进一步探讨乌萸汤改善初老小鼠卵巢功能的作用机制.方法:将24周龄C57BL/6J雌性小鼠随机分为初老组、治疗组和治疗+Compound C组,以6周龄C57BL/6J雌性小鼠为对照组.治疗组、治疗+Compound C组小鼠给予乌萸汤灌胃,对照组、初老组均用等量蒸馏水灌胃;治疗+Compound C组除每日中药灌胃外,每周腹腔注射一次Compound C 0.2mg·kg-1.灌胃8周后,促排卵并脱颈椎处死,取卵巢处理卵丘复合物,比较各组卵母细胞数、卵母细胞成熟率及卵母细胞ATP和线粒体含量,并用Western blot及PCR法检测卵巢内AMPK/PCG-1α通路蛋白及基因表达.结果:与对照组相比,初老组卵母细胞数目、成熟率及卵母细胞内ATP含量及线粒体荧光强度明显下降(P＜0.05),且AMPK/PCG-1α通路蛋白及基因表达相关分子均明显降低(P＜0.05);与初老组相比,治疗组卵母细胞数目、成熟率及卵母细胞内ATP含量及线粒体荧光强度明显升高(P＜0.05),且AMPK/PCG-1α通路蛋白及基因表达相关分子均明显升高(P＜0.05);与治疗组相比,治疗+Compound C组卵母细胞数目、卵母细胞内ATP含量及AMPK/PCG-1 α通路蛋白明显下降(P＜0.05),线粒体荧光强度及AMPK/PCG-1α通路基因表达相关分子均稍有降低(P＞0.05).结论:鸟萸沥可能主要通过调控AMPK通路的蛋白表达,促进卵母细胞内线粒体能量代谢,进一步改善初老小鼠的卵巢功能.

目的 初步探讨多囊卵巢综合征(PCOS)中医证候要素评判标准,为PCOS的中医辨证标准的建立提供一定的循证依据.方法 采集518例PCOS患者临床资料;采用隐变量分析法构建模型.并进行一致性检验.结果 模型拟合优度指数及校正拟合优度指数均接近1,模型拟合较好.近似误差均方根为0.0637,≤0.08,模型可以接受.一致性检验结果显示:肾、肝、脾3个病位类证候要素,具备一个模型中的症状(腰骶酸痛、夜尿多、耳鸣;心情抑郁、急躁易怒、善太息;食少纳呆、食后腹胀、泄泻)即可诊断,与医生辨证相同的概率分别为71.6％、88％及77％.气虚、气滞、痰湿3个病性类证候要素,具备两个模型中的症状(神疲、乏力、自汗;胸闷、胸胁胀痛、乳房胀痛;嗜睡、头蒙如裹、咯痰)即可诊断,与医生辨证一致的概率分别为86.3％、83.2％、80.5％.结论 初步制定PCOS证候要素评判标准:在满足PCOS诊断标准的基础上,肾、肝、脾,具备一个模型中的症状即可诊断,气虚、气滞、痰湿,具备两个模型中的症状即可诊断.

子宫内膜厚度是反映子宫内膜容受性的一个重要指标,薄型子宫内膜是生殖内分泌的疑难疾病,临床上常因此反复取消体外受精(IVF)周期或移植失败.迄今对其发病机制尚未明确,现代医学对该病的治疗方法有限,中医药的治疗得到了广大患者和西医同道的认可.目前中医缺少相关理论和辨证论治的思路和方案.根据国家名老中医金哲教授多年的临床经验,分别从病因、发病机制及治疗等方面对薄型子宫内膜的临证辨证思路进行总结.

子宫内膜容受性的优劣,决定了胚胎着床的顺利与否.子宫内膜容受性下降,作为辅助生殖技术失败的主要原因,一直困扰着医生与患者.文章通过对金哲教授“水到渠成”思想的探讨,将中医利肾水、祛水湿、纳水谷、行经水与西医改善细胞凋亡、纠正内膜形态、调节雌孕激素、改善内膜血流相融合,为中医药改善子宫内膜容受性,提供了新的思路.

Vulvar carcinoma is a rare tumor occurring in female patients. Though more than 40% of vulva cancers are due to the infection of human papillomavirus (HPV), understanding of HPV and vulvar carcinoma is insufficient. HPV expression is regulated by cellular and viral transcription factors that bind to specific elements within the ligase chain reaction. These proteins bind with different affinity to host cell proteins and disrupt normal epithelial differentiation and apoptosis. Immunotherapy does not target tumors, but instead targets the host immune system. Active immunotherapy is tumor-targeting or immune-targeting monoclonal antibodies and vaccines. Nonspecific active immunotherapy is mainly cytokine therapy. In the treatment and prevention of HPV, the most popular research projects were regarding peptide, recombinant protein and DNA-based vaccines, recombinant virus and other targets in HPV infection. Since the cervix and vulva are both susceptible areas, these studies may be able to help reduce prevalence of vulvar precancerous lesions and prevent all cancers caused by HPV.