为构建16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌并测定其稳定性,应用分子克隆技术构建16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌,采用菌落PCR、双酶切、药敏试验及序列分析等方法鉴定重组质粒,测定重组菌的生长曲线及传代后的最低抑菌浓度(MICs)以确定重组菌的稳定性.结果表明,构建了16S rRNA甲基化酶RmtB重组菌pRmtB1、pRmtB2、pRmtB4.重组菌对阿米卡星、庆大霉素高度耐药.在没有抗生素选择压力下传代3次后,3株重组菌的生长曲线基本相似,但只有pRmtB1维持了对庆大霉素和阿米卡星的高度耐药性.由此可知,重组菌pRmtB1较稳定,可作为16S rRNA甲基化酶耐药抑制剂筛选模型.

为分析中药与庆大霉素联合对16S rRNA甲基化酶RmB耐药重组菌的作用,采用棋盘稀释法测定庆大霉素与黄连、五倍子、连翘、黄芩、乌梅的联合抑菌指数(frictional inhibitory concentration index,FICI).试验结果表明,黄连、五倍子、连翘、黄芩、乌梅与庆大霉素的联合抑菌指数(FICI)分别为0.75、0.25、1.50、2.00、0.75.提示中药五倍子与庆大霉素联合有协同作用,黄连、乌梅与庆大霉素联合有相加作用,连翘、黄芩与庆大霉素联合呈现无关作用.

畜牧生产中,养猪业是促进养殖户增收,确保日常肉品供给最重要的产业.而影响养殖效益的诸多因素中,猪病的危害最大.本文介绍的猪蓝耳病,是危害养殖业最大的传染性疾病之一.有效防治猪蓝耳病,确保养猪业健康可持续发展,对提升养殖效益大有裨益.就此,在查阅相关文献资料的基础上,结合作者一线工作实践经验,本文详细阐述了蓝耳病的流行、症状、综合防治措施等等,为降低猪蓝耳病的发病率提供理论和技术指导.