文章旨在探讨如何在"三位一体"的混合式教学模式,即"线上教学+课堂讲授+实践教学"的模式下针对学生就业需求开展差异化教学,以此来深度提高教学质量,进一步提升药学类专业学生岗位胜任力.
为研究核基质结合区对逆转录病毒载体表达外源基因的调控作用,将CAT基因插入到载体pLXSN中构建出中间载体,构建出在5′端和3′端含人β?珠蛋白核基质结合区的载体.逆转录载体转染PA317细胞后G418筛选,提取PA317阳性细胞病毒上清液转染Bel?7404,经G418筛选出阳性细胞.测定3组CAT报告基因表达量.结果显示,与中间载体相比,3′端含核基质结合区的载体可以显著提高CAT报告基因的表达量(P<0.05),而5′端含MAR序列的载体不能显著提高基因表达水平(P>0.05).以上结果表明MAR介导逆转录表达载体能提高外源报告基因CAT的表达水平,且MAR对转基因表达调控作用与其在载体上插入位置有关.
以蛹虫草为材料,研究了不同浓度乙烯利和乙烯受体抑制剂1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)对蛹虫草子实体后期成熟产生虫草素的影响.根据不同处理方法将栽培蛹虫草分为乙烯组,1-MCP组和对照组.通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)测定各组蛹虫草子实体中腺苷酸琥珀酸合成酶(Adss)、腺苷酸琥珀酸裂解酶(Adsl)、腺苷酸激酶(AK)、嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)等虫草素合成基因的表达量;高效液相色谱法测量子实体中虫草素含量.结果表明,当乙烯利质量浓度为100 mg/L可以显著提高PNP、Adss、AK、Adsl基因的表达量,乙烯组虫草素的质量浓度为(25.37±0.22)μg/mL而对照组为(10.04±0.17)μg/mL;1.0 mg/L的1-MCP则对子实体的虫草素含量以及PNP、Adss、AK、Adsl基因表达有明显的抑制作用,1-MCP组虫草素的质量浓度为(0.52±0.12)μg/mL.由此可知,添加一定浓度的外源乙烯能够促进虫草素代谢相关基因表达量上调,后期成熟子实体中虫草素的含量也显著提高.而乙烯受体抑制剂可以显著降低子实体中虫草素合成相关基因的表达量及其含量.
以3,4-二甲氧基苯酚为起始原料,经取代、环合、酯还原、脱保护等反应得到新型的钙调蛋白抑制剂3-{2-[4-(3-氯-2-甲基苯)-1-哌嗪基]乙基}-5,6-二甲氧基-1-(4-咪唑甲基)-1H-吲唑二盐酸化合物,其结构经核磁共振氢谱(1 H NMR)、核磁共振碳谱(13C NMR)、电喷雾离子化质谱(ESI-MS)和高分辨质谱(HRMS)的确证和表征.
探明b型流感嗜血杆菌荚膜多糖发酵的最适培养基及接种量,为降低其疫苗荚膜多糖制备成本提供理论依据,设计6种培养基进行摇瓶培养,检测发酵上清液中的茵体量,筛选最适培养基,并在此基础上优化接种浓度及氯化血红素、辅酶Ⅰ添加量进行发酵罐培养,测定荚膜多糖含量,评估培养效果.结果表明:接种后OD600值为0.1的接种量较为适宜b型流感嗜血杆菌生长;3号改良培养基(选择性大豆蛋胨、酵母浸粉、酸水解酪蛋白、K2 HPO4、氯化钠、葡萄糖、氯化血红素、辅酶Ⅰ分别为1%、1%、0.50%、0.25%、0.50%、0.70%、25 mg/L和20 mg/L)对b型流感嗜血杆菌液体进行发酵罐发酵可获得大量菌体且稳定,荚膜多糖含量为(105.6±13.2)mg/L.