目的 通过研究天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织B细胞白血病-淋巴瘤-2基因(B-cell leukemia-iymphoma-2,Bcl-2),B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和y-氨基丁酸转运体1(GAT-1)基因和蛋白的表达影响对神经保护作用机制进行初步探讨,并对三种加工方式的天麻药效差异性药效进行对比研究.方法 以SD大鼠为研究对象,建立戊四唑癫痫模型.随机分为12组,正常组,模型组,丙戊酸钠组,天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)分别对应的低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g·kg-1)连续灌胃10d.用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测三种加工方式的天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1基因表达的情况;用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3和GAT-1蛋白表达情况.结果 模型组癫痫发作强度均为Ⅵ级,表明造模成功.与模型组比较,丙戊酸钠组及天麻普通粉、破壁粉、冻干粉各剂量组癫痫潜伏时间显著延长(P＜0.05),癫痫持续时间显著缩短(P＜0.05).与丙戊酸钠组比较,天麻普通粉高剂量组、天麻破壁粉高剂量组癫痫潜伏时间无显著差异(P＜0.05),而天麻冻干粉高剂量组癫痫潜伏时间显著延长(P＜0.05),且持续时间与之无显著性差异(P＜0.05).与正常组比较,模型组Bax、Caspase3和GAT-1 mRNA及蛋白相对表达量显著升高(P＜0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量显著下降(P＜0.05);与模型组比较,丙戊酸钠组和天麻各组可显著降低Bax、Caspase3和GAT-1 mRNA及蛋白相对表达量(P＜0.05),显著升高Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量(P＜0.05).结论 天麻冻干粉高剂量组效果最佳,天麻破壁粉高剂量组次之,最后天麻普通粉高剂量组.天麻对神经的保护具有剂量依赖性,并与天麻不同加工方式相关,其作用机制与调节Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1mRNA及蛋白表达水平有关.

目的 探讨天麻不同加工方法(普通粉、破壁粉、冻干粉)对戊四唑诱导的惊厥大鼠海马组织的神经保护作用并对普通粉、破壁粉、冻干粉的效应进行对比.方法 建立戊四唑(PTZ)惊厥模型,SD大鼠随机分为正常组、模型组、天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)分别对应的低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0g/kg),阳性组.用苏木素伊红(HE)染色观察不同天麻加工方法对戊四唑诱导的惊厥大鼠的海马CA1病理形态学改变情况,用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)法检测不同天麻加工方法对戊四唑诱导的惊厥海马组织GABA mRNA表达影响情况;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同天麻加工方法对戊四唑诱导的惊厥海马组织GABA蛋白表达情况.结果 模型组有大量的神经细胞变性坏死,与模型组比,阳性组与天麻冻干粉高剂量组未见明显病变、治疗效果较好,天麻普通粉低、中剂量组和天麻破壁粉低剂量组的组织病变较重,显示治病疗效果欠佳,其余各组治疗效果介于之间.与正常组比较,模型组海马组织GABA mRNA和蛋白相对表达量显著下降(P＜0.05);与模型组比较,阳性组和天麻不同加工方法组均可显著升高海马组织GABAmRNA和蛋白相对表达量(P＜0.05),且天麻冻干粉及破壁粉不同程度的优于普通粉.结论 天麻破壁粉、冻干粉均可以保护大鼠海马CA1组织学结构,其神经保护作用与天麻不同加工的方法及剂量相关,三种的天麻同等剂量对大鼠神经保护作用基本上呈:冻干粉＞破壁粉＞普通粉.三种不同加工方法的天麻对大鼠的神经保护作用机制与调节大鼠海马组织GABA mRNA及蛋白表达水平有关.

目的:研究天麻普通粉、 破壁粉、 冻干粉对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织γ-氨基丁酸转氨酶(7-Ami-nobutyrate transaminase,GABA-T)mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨天麻破壁粉、 冻干粉对神经细胞的保护作用机制,并对3种不同加工工艺的天麻的效应差异性进行对比,为合理使用不同加工工艺的天麻提供实验参考.方法:利用戊四唑惊厥模型,将SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,天麻(普通粉、 破壁粉、 冻干粉)低、 中、 高剂量组(0.5、1.0、2.0 g/kg).用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测不同工艺的天麻对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织GABA-T mRNA表达的情况;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同工艺的天麻对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织GABA-T蛋白表达情况.结果:RT-PCR和WB检测显示,模型组大鼠海马组织GABA-T mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和天麻各组均可显著降低大鼠海马组织GABA-T mRNA和蛋白相对表达量(P<0.05),天麻冻干粉和破壁粉抗惊厥效果不同程度优于天麻普通粉,其中冻干粉的效果优于破壁粉,破壁粉的效果优于普通粉,且在一定范围内呈量效关系.结论:天麻冻干粉和破壁粉对戊四唑诱导惊厥大鼠的神经保护作用效果强于普通粉,与加工方式有关,且呈量效关系,其作用机制可能与大鼠海马组织GABA-T mRNA及蛋白表达水平有关.

目的:对贵州天麻的主要化学成分进行薄层鉴别,测定其水分、浸出物、二氧化硫残留物,为进一步开发利用贵州天麻资源和评价药材质量提供理论依据.方法:采用TLC法、水分测定法、浸出物测定法、二氧化硫测定法对收集的贵州天麻进行多方面综合质量评价研究.结果:15批样品中,TLC斑点清晰,天麻水分平均值为7.8897％,二氧化硫残留量平均值为0.000％,浸出物平均值为55.5511％,测定结果均符合药典标准.结论:贵州天麻质量较好,在市场上有一定的竞争优势.

目的:比较不同剂量的天麻破壁粉、冻干粉对小鼠的急性肝肾毒性.方法:将清洁级昆明种小鼠100只随机分为10组,分别为丙戊酸钠低、中、高剂量组(0.3 g/kg、0.6 g/kg、0.9 g/kg),天麻(破壁饮片、冻干粉)低、中、高剂量组(15 g/kg、30 g/kg、45 g/kg),正常组(给予等量生理盐水),每天灌胃3次,连续给药14天.14天后断头采集小鼠血液,取小鼠完整肝脏及肾脏,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量,HE染色观察大鼠肝肾组织病理变化.结果:与正常组比较,天麻破壁粉和冻干粉低、中、高剂量组体重、一般情况和血清ALT、AST、AKP、UA、BUN、Cr均未见显著变化(P>0.05),天麻破壁粉和冻干粉高剂量组MCP-1水平显著升高(P<0.05);光镜下显示,天麻破壁粉低剂量组和冻干粉低、中剂量组肝肾病理损伤与正常组无明显差异(P>0.05).结论:给予小鼠10倍临床等效剂量的天麻破壁粉及20倍临床等效剂量的天麻冻干粉均未引发小鼠机体肝肾组织的明显毒性反应.