小檗碱与芒柄花黄素分别是黄连、黄芪的主要活性成分,均具有抗肿瘤的作用,其机制主要包括抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞侵袭和转移、抑制肿瘤血管新生、调节机体免疫、诱导或抑制肿瘤细胞自噬死亡等.本文主要针对小檗碱与芒柄花黄素抗肿瘤作用机制的研究进展进行综述.

目的 筛选喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)预后相关免疫核心基因并构建预后风险评分模型.方法 利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中LSCC转录组测序信息,筛选差异表达基因,并与已知免疫相关基因取交集,筛选LSCC中预后相关免疫核心基因.利用单因素Cox回归构建风险评分模型并采用Kaplan-Meier法验证风险评分模型与LSCC患者预后的关系,同时绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线验证该模型准确度.结果 LSCC组织和癌旁组织中共有6800个差异表达基因,通过单因素Cox分析并与已知免疫相关基因取交集,从差异表达基因中筛选出34个预后枢纽基因.基于免疫核心基因构建风险评分模型,高危险组患者总生存期短于低危险组患者(P<0.01),风险评分模型预测LSCC患者预后的ROC曲线下面积为0.930.结合临床病理学参数分析发现,患者性别是LSCC预后的保护因素,N分期晚期和高风险评分为LSCC预后的危险因素(均P<0.05),而患者年龄和T分期与LSCC预后无关(均P>0.05).结论 LSCC中存在多个免疫核心基因异常表达,且与患者预后相关,基于其构建的风险评分模型可较好预测患者预后.

目的 探讨黄芩苷(baicalin)对鼻咽癌CNE2细胞增殖及TGF-β1/ERK1/2信号通路的作用.方法 采用CCK8法检测不同浓度黄芩苷(2.5、5、10、20、40、80μmol·L-1)、顺铂(4μg·mL-1)在24、36、48 h对CNE2细胞增殖的作用;细胞成像多功能检测系统(CytationTM 5)实时监测黄芩苷对CNE2增殖数量的变化;Western blot检测黄芩苷对CNE2细胞增殖相关蛋白PCNA、Survivin及TGF-β1/ERK1/2信号通路关键蛋白TGF-β1、p-ERK1/2的影响.结果 CCK8结果显示,黄芩苷可抑制CNE2增殖(P<0.05或P<0.01),且随着浓度升高,抑制作用增强;CytationTM 5监测结果显示,黄芩苷可抑制CNE2细胞数量增多(P<0.05或P<0.01);Western blot结果表明,黄芩苷下调了增殖相关蛋白PCNA(P<0.05)、Survivin(P<0.05)及TGF-β1/ERK1/2信号通路关键蛋白TGF-β1(P<0.05)、p-ERK1/2(P<0.05)的表达水平.加入TGF-β1(TGF-β1/ERK1/2信号通路激活剂)后,黄芩苷对TGF-β1、p-ERK1/2、PCNA、Survivin的抑制作用降低(P<0.05),同时降低了黄芩苷对CNE2细胞增殖的抑制作用.结论 黄芩苷能够抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖,并通过抑制TGF-β1/ERK1/2信号通路进一步降低下游蛋白PCNA、Survivin的表达发挥作用.

目的 通过网络药理学探讨黄连和黄芪治疗鼻咽癌的作用机制.方法 采用中药系统药理学分析平台(TCMSP)获取黄连和黄芪的活性成分和作用靶点.通过GeneCards数据库获取鼻咽癌相关靶点,应用R语言软件及Perl语言程序筛选出与黄连和黄芪的共同靶点.使用STRING数据库进行蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络分析.应用Cytoscape 3.6.0软件构建成黄连和黄芪活性成分-鼻咽癌-靶点交集网络.通过R语言软件对共同靶点进行基因本体(GO)和基因功能(KEGG)富集分析.采用MTT法对活性成分抗增殖效应进行体外验证.结果 共获得黄连和黄芪中19个活性成分,183个候选靶点,鼻咽癌相关靶点768个,两者匹配映射得到共同靶点95个,出现频次较高的有丝氨酸/苏氨酸激酶1 (AKT1)、原癌基因(JUN)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)1、RELA、白细胞介素(IL)-6等,主要涉及受体配体活性、细胞因子活性、蛋白激酶调节活性、DNA结合转录激活活性等生物过程,并主要富集在磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/AKT信号通路、MAPK信号通路、IL-17信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等调控通路.MTT实验表明小檗碱和芒柄花黄素均能抑制人鼻咽癌CNE细胞增殖.结论 黄连和黄芪中的槲皮黄素、山柰酚、芒柄花黄素、小檗碱等多成分可能通过PI3K-AKT、MAPK等多个信号通路作用于鼻咽癌.

To investigate whether the combination of berberine and formononetin can inhibit the proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells by regulating the MAPK/ERK signaling pathway and affecting cell autophagy. Methods: RTCA and Cytation TM 5 cell imaging systems were used to detect cell proliferation. MDC staining and transmission electron microscopy were used to detect cell autophagy. Western blot was used to detect the expression levels of autophagy and proliferation-related proteins and the expression levels of key proteins in the MAPK/ERK signaling pathway. Results: The combination of berberine and formononetin can inhibit the proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells ( P < 0.05) and induce autophagy ( P < 0.05) and. After berberine combined with formononetin for 24 h, the expression of LC3 II/I and Beclin1 increased, whereas the expression of P62 and PCNA decreased. The expression of key proteins p-c-Raf, p-MEK, and p-ERK1/2 in the MAPK/ERK signaling pathway was downregulated ( P < 0.05). Inhibiting autophagy or activating the MAPK/ERK signaling pathway significantly reduced the effect of berberine combined with formononetin on upregulating the expression of LC3 II/I and Beclin1 and downregulating the expression of P62 and PCNA. At the same time, it significantly reduced the effects of berberine combined with formononetin in inducing autophagy and inhibiting cell proliferation ( P < 0.05). Conclusion: Berberine combined with formononetin inhibits the proliferation of nasopharyngeal carcinoma cells by downregulating the activity of the MAPK/ERK signaling pathway and then upregulating LC3 II/I and Beclin1, and downregulating the expression of P62 and PCNA.

目的 运用网络药理学预测和实验验证茯苓抗鼻咽癌的物质基础及潜在机制.方法 借助中药系统药理学数据库及分析平台和BATMAN-TCM数据库平台检索茯苓的化学成分和作用靶点.通过UniProt数据库查询靶点对应的基因,使用STRING构建共同靶点互作网络(PPI);进而运用Cytoscape 3.7.2软件构建茯苓活性成分-鼻咽癌-靶点互作网络图,通过R软件编程进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,最后采用MTT和Western blot法进行验证.结果 茯苓活性成分-鼻咽癌-靶点网络包含8个活性成分,18个共同靶点,主要富集到4条通路.茯苓的主要抗鼻咽癌活性成分有茯苓酸、茯苓新酸B、常春藤皂甙等,出现频次较高的靶点有TP53、INS、ESR1、PTGS2等,这些靶点主要涉及细胞因子活性、免疫炎症系统和肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移等生物过程,且靶点主要富集在甲状腺激素信号通路、雌激素信号通路、PI3K/AKT等信号通路.MTT结果显示,与对照组比较,茯苓酸组(2.5、5.0、10μmol·L-1)对CNE2细胞增殖具有明显抑制作用(P<0.05或P<0.01).Western blot结果显示,药物处理24 h后,与对照组比,茯苓酸组(5.0μmol·L-1)降低了CNE2细胞PI3K/AKT信号通路关键蛋白PI3K、p-AKT的表达水平(P<0.05或P<0.01),对AKT的表达无明显差异性(P>0.05).结论 茯苓可通过多成分、多靶点和多通路影响鼻咽癌细胞的增殖.且经实验验证,茯苓抑制鼻咽癌细胞增殖的作用与抑制PI3K/AKT信号通路的活性相关.

目的 探讨益气解毒方中苯丙素类化合物异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸对人鼻咽癌CNE2细胞增殖效应的抑制作用及机制研究.方法 使用实时无标记细胞功能分析技术(RTCA)动态监测不同浓度的3种苯丙素类化合物对离体人鼻咽癌CNE2细胞生长曲线的影响;CytationTM 5高通量活细胞成像分析检测系统分别监测3种不同浓度苯丙素类化合物对人鼻咽癌CNE2细胞形态改变;Western blot法检测3种苯丙素类化合物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、X连锁的凋亡蛋白抑制剂(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)、Survivin表达的影响.结果 RTCA实时监测结果显示异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸均能不同程度地抑制CNE2细胞增殖,存在药物浓度越高抑制效应越明显的趋势.Cyta-tionTM 5检测结果显示,与对照组相比,3种苯丙素类化合物作用36 h后,大量CNE2细胞出现细胞漂浮死亡,细胞膜破溃、细胞结构模糊等形态变化.Western blot检测结果显示,与对照组相比,异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白PCNA、XIAP、Survivin的表达(P<0.05).结论 益气解毒方中主要苯丙素类化合物异欧前胡素、阿魏酸、绿原酸均可以不同程度抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖,其机制可能与下调增殖相关蛋白PCNA、XIAP、Survivin的表达有关.

目的:系统评价西药联合芪参益气滴丸治疗冠心痛的有效性及安全性.方法:计算机检索中国知网(CNKI)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、万方数据(Wanfang Data)、PubMed和Cochrane Library,搜集西药联合芪参益气滴丸治疗冠心痛的随机对照试验研究,按照Cochrane Handbook方法评价纳入文献质量和提取有效数据,采用RevMan 5.3进行Meta分析、异质性检验和敏感性分析.结果:符合纳入标准的研究共13个,患者1293例.Meta分析结果显示,西药联合芪参益气滴丸与西药常规治疗比较,可提高总体有效率[OR =3.85,95％ CI(2.70～5.50),P＜0.00001],改善心电图疗效[OR =2.87,95％ CI(1.58 ～5.20),P=0.0005],降低硝酸甘油停减率[OR=1.97,95％ CI(0.76 ～5.09),P=0.16],改善中医症状[OR=29.48,95％ CI(0.81～1075.20),P=0.07],提高心脏射血分数[WMD=0.98,95％ CI(0.58～1.38),P＜0.00001]及心输出量[WMD=1,13,95％CI(0.33～1.93),P=0.006].结论:西药联合芪参益气滴丸较单用西药常规治疗冠心病可进一步提高临床疗效,且药效安全,但上述结论尚需更多大样本高质量临床试验加以验证.