In order to investigate the infection status of canine Echinococcus granulosus prevalent in Sichuan Province,and to evaluate the effectiveness of prevention and control measures,from 2019 to 2022,dog feces were collected from 35 epidemic counties for detection of Echinococcus granulosus by antigen sandwich ELISA kit.The results revealed that the average annual infection rates were 3.06%(159/5 200),2.11%(123/5 826),1.33%(83/6 227)and 1.12%(67/5 968)respectively in the four consecutive years,with statistical significance(P＜0.05).The average annual infection rates were 1.30%(166/12 673),3.09%(205/6 627),1.48%(35/2 367)and 1.78%(26/1 464)respectively in Ganzi Prefecture,Aba Prefecture,Liangshan Prefecture and Ya'an City,especially higher in Aba Prefecture(P＜0.05).In conclusion,the infection of canine Echinococcus granulosus was generally weakening in the province,but still relatively severe in the grassland pastoral areas of western Sichuan Plateau,posing a great threat to local livestock and human.For the purpose of ensuring human health and safety as well as healthy development of livestock industry,it was recommended to further strengthen the control of such infection from its source through deworming for dogs and bio-safety treatment of dog feces.

为评估四川省内兽医系统实验室对布鲁氏菌病的检测能力,我们于2022年开展了全省市级兽医实验室比对工作,共20个市级兽医系统实验室参与比对.布鲁氏菌病抗体检测项目通过虎红平板凝集试验比对,11个市(州)使用A厂家试剂,9个市(州)使用B厂家试剂.结果得出:布鲁氏菌病抗体检测项目结果总体符合率为68.75％,A厂家符合率为81.82％,B厂家符合率为52.78％.本研究表明,四川省市级兽医系统实验室对动物布鲁氏菌病的检测能力有待提高,实验试剂对实验结果的影响很大.

为评价国产狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的性能,选择4种国产品牌ELISA抗体检测试剂盒,分别检测463份已用荧光抗体病毒中和试验(FAVN)测知狂犬病病毒抗体效价的犬血清,用Kappa检验和配对卡方检验评价ELISA试剂盒与FAVN检测结果的一致性和差异性,计算ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、符合率和重复性等,并比较4种试剂盒的使用范围、样品稀释倍数等参数.结果显示:经Kappa检验,4种试剂盒与FAVN一致性均为弱;经配对卡方检验,A、B试剂盒与FAVN检测结果的差异不显著(P＞0.05),而C、D试剂盒差异显著(P＜0.05).诊断敏感性,D试剂盒最高,B试剂盒最低;4种试剂盒诊断特异性均较低,为29.5％～57.7％;各试剂盒符合率相当,为71.3％～72.8％.综合敏感性、特异性、重复性等考量因素,得出C试剂盒更能满足免疫后抗体检测需求,A试剂盒也较好,两者可作为候选试剂盒.结果表明,4种国产狂犬病病毒ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、批间稳定性等性能需进一步提高,以满足基层免疫抗体监测需求.

为比较和评价不同剂量包虫病基因工程亚单位疫苗EG95免疫牦牛后的抗体差异,随机选择1岁左右的牦牛50头,平均分成A、B、C、D、E 5组,分别按照1、2、3、4、5头份剂量(每头份含EG9550μg)进行一免和二免(间隔28 d);免疫前及二免后15 d采血,应用间接ELISA法检测血清中的特异性抗体.结果显示:二免后A、B、C组的抗体阳性率分别为30％、40％、50％,与E组的90％存在显著性差异(P<0.05),D组阳性率为80％,与E组无显著性差异(P>0.05);A组和B组抗体合格率均为0,C、D、E组的抗体合格率分别为10％、40％、70％,E组抗体合格率明显高于其他组(P<0.05).试验结果表明,采用EG95基因工程亚单位疫苗按5头份剂量免疫,间隔28 d后二免,对牦牛的免疫效果较为理想.

为评价不同布鲁氏菌血清学方法检测牛羊血清的性能,采用试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、荧光偏振试验(FPA)3种常规血清学检测方法,对已知感染情况的牛羊血清进行布鲁氏菌抗体检测,比较这3种方法的一致性、敏感性与特异性.结果显示:SAT检测牛血清的Kappa值小于0.75,一致性一般;cELISA、FPA检测牛羊血清的Kappa值均大于0.75,一致性较好.SAT特异性较高,假阳性率均为0,但敏感性较低,假阴性率较高;cELISA敏感性和特异性较为理想,均在92％以上;FPA敏感性最好,为100％,特异性也较高,达97％以上.结果表明,SAT特异性高,但敏感性略低,cELISA和FPA敏感性、一致性和特异性均较好.结果提示,在实际诊断中,先用操作简便的SAT进行筛选,再用操作较为复杂、需要特定仪器、特异性高的cELISA和FPA进行复核较为理想.

布病实验室诊断方法中的血清学诊断方法操作简单、适用性广,包括虎红平板凝集试验、试管凝集试验、补体结合试验、乳牛全乳环状试验、酶联免疫吸附试验、荧光偏振测试、胶体金免疫层析法等.为检测对比各种试剂的有效性,确保布病检测结果准确,减少漏诊和误诊情况,本研究对3种布病血清学检测方法进行了比对试验.

布鲁氏菌病(简称布病)是一种由布鲁氏菌引起的人畜共患疾病,影响了畜牧业的健康发展,甚至威胁到了人类的健康安全,造成了较严重的经济社会损失.因此,对布鲁氏菌病的防控十分必要.本研究主要基于布鲁氏菌保守基因Omp2a,利用在线网站设计3对引物,并优化其反应条件与反应体系,建立了一种检测布鲁氏菌的可视化LAMP方法.同时,将建立好的LAMP方法与聚合酶链式反应(PCR)检测方法相比较,并交由陕西省疾病预防控制中心进行实际样本检测.结果表明,基于羟基萘酚蓝(HNB)指示剂,LAMP扩增的结果可凭肉眼观察.建立的LAMP检测方法能准确区分布鲁氏菌与非布鲁氏菌,检测限为2.56×10-4 ng/μL.在实际样品检测中,LAMP检测方法相对于常规分离鉴定方法的敏感性和特异性均为100％.因此,本研究建立的LAMP检测布鲁氏菌方法具有特异性强、灵敏度高等优点,扩增45 min即可肉眼观察到检测结果,适用于现场和基层检测.