To further explore the gene function and construct the dominant epitope vaccine, sequences identification, bioinformatics and transcription analysis of ubiquitin-conjugating enzyme gene family of Echinococcus granulosus sensu lato (EgE2s) were conducted. Based on the genomic data of Echinococcus granulosus published before, the EgE2s gene family was cloned and analyzed by bioinformatics. In addition, the transcriptional levels of EgE2s in protoscolex (PSCs) and 28-day strobilated worms were detected by qRT-PCR. The results showed that, nineteen EgE2s genes were cloned and sequenced successfully. Among them, two CDS sequences were submitted to NCBI with accession number (EgE2L3: MZ277618; EgE2J1: MZ277619). The prediction of tertiary structures and conservative motifs indicate that EgE2s are highly conserved. qRT-PCR showed that the transcriptional levels of EgE2s in PSCs differed from 28-day strobilated worms, EgE2A (P<0.001) and EgE2J1 (P<0.01) were highly expressed in PSCs. The prediction of B cell epitopes showed that the 139-157 region of EgE2N was located outside the conserved motifs of EgE2s. Meanwhile, the T cell epitopes prediction showed that EgE2N has strong binding sites with human and canine MHC I molecules, including a common epitope region 104-113. In conclusion, EgE2A and EgE2J1 may play important roles in the growth and development of PSCs. The 139-157 and 104-113 regions of EgE2N may be the target sequences for the development of drugs and vaccines.
In order to investigate the infection status of canine Echinococcus granulosus prevalent in Sichuan Province,and to evaluate the effectiveness of prevention and control measures,from 2019 to 2022,dog feces were collected from 35 epidemic counties for detection of Echinococcus granulosus by antigen sandwich ELISA kit.The results revealed that the average annual infection rates were 3.06%(159/5 200),2.11%(123/5 826),1.33%(83/6 227)and 1.12%(67/5 968)respectively in the four consecutive years,with statistical significance(P<0.05).The average annual infection rates were 1.30%(166/12 673),3.09%(205/6 627),1.48%(35/2 367)and 1.78%(26/1 464)respectively in Ganzi Prefecture,Aba Prefecture,Liangshan Prefecture and Ya'an City,especially higher in Aba Prefecture(P<0.05).In conclusion,the infection of canine Echinococcus granulosus was generally weakening in the province,but still relatively severe in the grassland pastoral areas of western Sichuan Plateau,posing a great threat to local livestock and human.For the purpose of ensuring human health and safety as well as healthy development of livestock industry,it was recommended to further strengthen the control of such infection from its source through deworming for dogs and bio-safety treatment of dog feces.
为评估四川省内兽医系统实验室对布鲁氏菌病的检测能力,我们于2022年开展了全省市级兽医实验室比对工作,共20个市级兽医系统实验室参与比对.布鲁氏菌病抗体检测项目通过虎红平板凝集试验比对,11个市(州)使用A厂家试剂,9个市(州)使用B厂家试剂.结果得出:布鲁氏菌病抗体检测项目结果总体符合率为68.75%,A厂家符合率为81.82%,B厂家符合率为52.78%.本研究表明,四川省市级兽医系统实验室对动物布鲁氏菌病的检测能力有待提高,实验试剂对实验结果的影响很大.
为评价国产狂犬病病毒ELISA抗体检测试剂盒的性能,选择4种国产品牌ELISA抗体检测试剂盒,分别检测463份已用荧光抗体病毒中和试验(FAVN)测知狂犬病病毒抗体效价的犬血清,用Kappa检验和配对卡方检验评价ELISA试剂盒与FAVN检测结果的一致性和差异性,计算ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、符合率和重复性等,并比较4种试剂盒的使用范围、样品稀释倍数等参数.结果显示:经Kappa检验,4种试剂盒与FAVN一致性均为弱;经配对卡方检验,A、B试剂盒与FAVN检测结果的差异不显著(P>0.05),而C、D试剂盒差异显著(P<0.05).诊断敏感性,D试剂盒最高,B试剂盒最低;4种试剂盒诊断特异性均较低,为29.5%~57.7%;各试剂盒符合率相当,为71.3%~72.8%.综合敏感性、特异性、重复性等考量因素,得出C试剂盒更能满足免疫后抗体检测需求,A试剂盒也较好,两者可作为候选试剂盒.结果表明,4种国产狂犬病病毒ELISA试剂盒的诊断敏感性、诊断特异性、批间稳定性等性能需进一步提高,以满足基层免疫抗体监测需求.
巨结肠症是原发或继发因素导致的粪便积留和结肠扩张而引发的持续性便秘病症,是猫的常见肠道疾病.成年猫患该病机率较高,发病平均年龄为五岁左右.该病常发于短毛家猫,公猫发病率高于母猫,肥胖猫巨结肠症患病率更高. 结肠机械性或机能性的阻塞均可引发该病,如骨盆或骶骨段脊神经病变、家族性自主神经机能异常、骨盆腔狭窄,饮食中有骨头、石块、毛团等都可引起发病.巨结肠症如不及时治疗,可导致患猫死亡.
为比较和评价不同剂量包虫病基因工程亚单位疫苗EG95免疫牦牛后的抗体差异,随机选择1岁左右的牦牛50头,平均分成A、B、C、D、E 5组,分别按照1、2、3、4、5头份剂量(每头份含EG9550μg)进行一免和二免(间隔28 d);免疫前及二免后15 d采血,应用间接ELISA法检测血清中的特异性抗体.结果显示:二免后A、B、C组的抗体阳性率分别为30%、40%、50%,与E组的90%存在显著性差异(P<0.05),D组阳性率为80%,与E组无显著性差异(P>0.05);A组和B组抗体合格率均为0,C、D、E组的抗体合格率分别为10%、40%、70%,E组抗体合格率明显高于其他组(P<0.05).试验结果表明,采用EG95基因工程亚单位疫苗按5头份剂量免疫,间隔28 d后二免,对牦牛的免疫效果较为理想.
犬巴贝斯虫病是通过蜱虫叮咬传播的血液原虫病,寄生于犬体的巴贝斯虫主要是犬巴贝斯虫和吉氏巴贝斯虫,在我国以吉氏巴贝斯虫感染为主. 该病呈地方性流行和季节性流行,主要在春夏秋三季发病,流行的地区和蜱虫的分布有关.除蜱虫叮咬传播外,健康犬伤口与病犬血液接触或输入含有巴贝斯虫的犬血也会导致感染.近年还发现,吉氏巴贝斯虫可经胎盘传播.
为评价不同布鲁氏菌血清学方法检测牛羊血清的性能,采用试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、荧光偏振试验(FPA)3种常规血清学检测方法,对已知感染情况的牛羊血清进行布鲁氏菌抗体检测,比较这3种方法的一致性、敏感性与特异性.结果显示:SAT检测牛血清的Kappa值小于0.75,一致性一般;cELISA、FPA检测牛羊血清的Kappa值均大于0.75,一致性较好.SAT特异性较高,假阳性率均为0,但敏感性较低,假阴性率较高;cELISA敏感性和特异性较为理想,均在92%以上;FPA敏感性最好,为100%,特异性也较高,达97%以上.结果表明,SAT特异性高,但敏感性略低,cELISA和FPA敏感性、一致性和特异性均较好.结果提示,在实际诊断中,先用操作简便的SAT进行筛选,再用操作较为复杂、需要特定仪器、特异性高的cELISA和FPA进行复核较为理想.
牛结节性皮肤病(LSD)是由牛结节性皮肤病病毒(LSDV)引起的一种牛急性、亚急性病毒性传染病.该病于2019年8月首次传入我国新疆伊犁州,对我国奶牛和肉牛养殖造成了一定的不良影响.本文综述了牛结节性皮肤病的历史、流行现状与特点、临床症状及病理变化、诊断、防控措施等方面进行了较全面的阐述,以期为养牛业有效防控该病提供参考.
为了解四川布病高危从业人群布病防控行为,为开展有针对性、实用性和有效性的健康教育及行为干预方法提供可靠依据.本研究对四川省牛羊为主导产业且具有代表性的8个县(区)从业人员布病高危行为情况调查摸底,设计自身前后对照试验,采取随机抽样方式,收集健康宣传教育干预前后填写调查问卷,比较布病相关从业人员高危行为改变情况.结果显示养殖人员对布病疑似症状隔离、定期对场地消毒等7项饲养管理行为改善明显,差异均具有统计学意义(P<0.05),接触动物洗手消毒和未食用生牛羊乳2项日常生活行为比例上升,差异均具有统计学意义(P<0.05);兽医工作人员工作中不存在打手机及抽烟、吃零食等其他行为、不徒手接触动物流产物等6项工作行为比例上升,差异均具有统计学意义(P<0.05),接触动物洗手消毒和不食用未煮熟牛羊肉2项日常生活行为比例上升,差异均具有统计学意义(P<0.05).综上所述,两类高危从业人员正确布病防控行为均得到进一步提高,达到了预期效果.
布鲁氏菌病是一种传染性人畜共患病,不但制约畜牧业发展,而且严重威胁到公众的身体健康.为持续性掌握四川省牛羊布鲁氏菌病的动态流行现状,本研究对全省部分地区2020年牛羊布病的流行情况进行调查,对158个牛、羊养殖场(户)同时开展布病血清学监测(采用虎红平板凝集试验初筛,试管凝集试验复核)和养殖场基本情况问卷调查.调查结果显示,牛的个体阳性率为0.43%,群体阳性率为6.25%;羊的个体阳性率为1.11%,群体阳性率为10.26%.可见养殖场(户)的饲养管理和生物安全防护措施仍有待提高.
为了解四川省石渠县羊蜱蝇巴尔通体和斑点热群立克次体感染情况,采集藏绵羊体表羊蜱蝇,经形态学鉴定后,提取羊蜱蝇总DNA,PCR扩增巴尔通体gltA和rpoB基因、斑点热群立克次体OmpA和OmpB基因,对阳性产物测序、比对及构建进化树,从而确定羊蜱蝇感染巴尔通体和斑点热群立克次体的种类及感染率.在石渠县的4个乡镇总计采集到407只羊蜱蝇成虫,4个乡镇均检出了Bartonella melophagi,总感染率为14.0%(57/407).在阿日扎镇、呷衣乡和长沙贡马乡检出了Rickettsia raoultii,总感染率为11.1%(45/407),且长沙贡马乡感染率显著高于阿日扎镇和呷衣乡(P<0.05);在新荣乡检出了Rickettsia sp.,感染率为6.6% (8/121).本次试验中,未发现混合感染.石渠县藏绵羊源羊蜱蝇携带巴尔通体和立克次体,首次在石渠县藏绵羊源羊蜱蝇中检出了B.melophagi、R.raoultii和Rickettsia sp..
布病实验室诊断方法中的血清学诊断方法操作简单、适用性广,包括虎红平板凝集试验、试管凝集试验、补体结合试验、乳牛全乳环状试验、酶联免疫吸附试验、荧光偏振测试、胶体金免疫层析法等.为检测对比各种试剂的有效性,确保布病检测结果准确,减少漏诊和误诊情况,本研究对3种布病血清学检测方法进行了比对试验.
布鲁氏菌病(简称布病)是一种由布鲁氏菌引起的人畜共患疾病,影响了畜牧业的健康发展,甚至威胁到了人类的健康安全,造成了较严重的经济社会损失.因此,对布鲁氏菌病的防控十分必要.本研究主要基于布鲁氏菌保守基因Omp2a,利用在线网站设计3对引物,并优化其反应条件与反应体系,建立了一种检测布鲁氏菌的可视化LAMP方法.同时,将建立好的LAMP方法与聚合酶链式反应(PCR)检测方法相比较,并交由陕西省疾病预防控制中心进行实际样本检测.结果表明,基于羟基萘酚蓝(HNB)指示剂,LAMP扩增的结果可凭肉眼观察.建立的LAMP检测方法能准确区分布鲁氏菌与非布鲁氏菌,检测限为2.56×10-4 ng/μL.在实际样品检测中,LAMP检测方法相对于常规分离鉴定方法的敏感性和特异性均为100%.因此,本研究建立的LAMP检测布鲁氏菌方法具有特异性强、灵敏度高等优点,扩增45 min即可肉眼观察到检测结果,适用于现场和基层检测.
布鲁氏菌病、结核病统称"两病",是国家重点防控的人畜共患病,可引起奶牛生产性能下降,给养殖场带来巨大的经济损失,还严重威胁人类的健康.本文对奶牛"两病"的综合防控和净化工作进行了综述.
高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza,HPA[)是由部分H5或H7亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起多种禽类急性感染和死亡的一种烈性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告动物疫病,在我国被列为一类动物疫病,是26种人畜共患传染病之一,是引发公共卫生事件最常见的一类传染病.在国务院发布的《国家中长期动物疫病防治规划(2012~2020年)》中,将其列为优先防治和重点防范5种一类动物疫病之一,不仅给养禽行业带来了严重的经济损失,而且也对人类健康,甚至生命安全带来了严重威胁.为有效防控禽流感,本文对近年我国禽类高致病性禽流感的流行现状进行总结和分析,并提出防控建议.
发酵工艺在饲料行业中的应用日益成熟,研究发现,通过发酵处理能有效改善非常规饲料原料中的营养成分,降低或消除非常规原料中抗营养因子的含量.这将有利于缓解部分常规饲料原料短缺或价格昂贵的现状,提高畜牧生产效益.本文就发酵工艺对饲料营养成分及饲料中抗营养因子的影响进行介绍,旨在为发酵工艺在饲料工业上的应用提供参考.
为了追踪近年来川东北地区布病防控现状,研判畜间布病流行趋势,笔者历时两年,对四川广元、巴中、达州3个市进行了畜间布病防控情况调查. 13市布病防控基本情况 1.1 畜间布病监测情况 3个市牛平均阳性率为0.002%、羊平均阳性率为0.25%.对比两年牛羊监测情况,除巴中羊的阳性率有上升外,其余均呈下降趋势.
川西高原藏区是全国包虫病流行最严重的地区之一,党和国家高度重视包虫病的防治.四川省于2015年10月启动石渠县包虫病综合防治试点工作,并在"十三五"期间向全省大力推广畜间包虫病防治"238"石渠模式.石渠县及全省35个疫区县犬只平均感染率分别由初期的35.0%和25.4%下降到目前的0.9%和4.1%,牛羊等家畜患病率分别由初期的45.0%和4.8%下降到目前的8.5%和3.5%;畜间包虫病防治专业人员技能合格率分别由初期的45.3%和52.6%上升到目前的93.3%和90.1%,群众包虫病防治知识知晓率分别由初期的31.2%和35.8%上升到目前的88.9%和86.7%.全省所有疫区县均达到部省下达的防治目标要求.
[目的]分析日本血吸虫可溶性虫卵抗原的特异组分,为建立牛血吸虫病免疫学诊断方法提供数据支持.[方法]用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、免疫印迹法(Western-blot)、葡聚糖凝胶层析和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA),对日本血吸虫可溶性虫卵抗原进行了分离、鉴定.[结果]SDS-PAGE分离出10条蛋白条带,依次为100、80、60、55、45、28、27、17、15和13 KDa的小分子量蛋白;采用阳性病牛血清进行Western-blot,共鉴定出有3条特异带,分子量分别为50、28、17 KDa,28和17KDa条带较为明显,而50KDa条带较弱;葡聚糖凝胶层析分离出2个蛋白质高峰,即大分子量蛋白组分峰(I峰)和小分子量蛋白组分峰(Ⅱ峰);再经Dot-ELISA鉴定表明,Ⅱ峰中高速离心后的上清蛋白是可用于牛血吸虫病诊断的特异性抗原.[结论]葡聚糖凝胶层析分离出的Ⅱ峰蛋白再经过高速离心后,其上清蛋白是能够用于牛日本血吸虫病诊断的特异性天然蛋白.