目的:探讨女贞子多糖(LVFP)与布地奈德联用对哮喘幼鼠免疫调节、气道炎症及氧化应激的影响.方法:从女贞子中提取LVFP,并采用傅里叶变换红外光谱、高压离子色谱及高效凝胶过滤色谱技术对LVFP表征进行鉴定.40只BALB/c幼年小鼠随机分为对照组(Control)、哮喘组(OVA)、OVA+布地奈德组(OVA+budesonide)及OVA+LVFP+布地奈德组(OVA+LVFP+budesonide),每组10只,OVA致敏、激发哮喘症状构建哮喘幼鼠模型,激发周期内OVA+budesonide及OVA+LVFP+budesonide组分别给予布地奈德(3μg/d,吸入)或LVFP[(400 mg/(kg·d),灌胃]+布地奈德(3μg/d,吸入),第28天监测气道反应性,第29天处死幼鼠,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子表达,血细胞计数仪、Wright-Giemsa染色法进行炎症细胞计数,流式细胞术检测BALF中炎症细胞比例变化.Western blot测定肺组织氧化应激及线粒体融合、分裂相关蛋白表达.结果:与OVA组相比,OVA+LVFP+布地奈德组支气管高反应性显著降低(P<0.05),BALF中总炎症细胞数和嗜酸性粒细胞数显著减少(P<0.05),哮喘状态下树突状细胞比例显著降低(P<0.05),而抗炎自然杀伤细胞及调节性T细胞比例升高(P<0.05),炎症因子IL-4、IL-5、IL-9、IL-10、IL-13及TGF-β水平降低(P<0.05).LVFP与budesonide联用还可抑制氧化相关蛋白硝基络氨酸、超氧化物歧化酶2(SOD2)及线粒体融合和分裂相关蛋白OPA1、线粒体融合蛋白2、动力蛋白相关蛋白1及线粒体分裂蛋白1表达(P<0.05).结论:LVFP与布地奈德联用可降低支气管高反应性,调节免疫细胞数量,减轻肺部炎症反应,抑制氧化应激,有望用于哮喘治疗.

目的 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)下呼吸道感染肺炎病儿外周血血浆中微小RNA-145(mir-145)表达与外周血单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞亚群的关系.方法 选取2017年1月至2018年12月海南现代妇女儿童医院收治的RSV下呼吸道感染肺炎病儿126例作为RSV肺炎组,同期在本院进行体检的健康儿童130例作为健康对照组.RSV肺炎组根据病情严重程度分为轻度组(n=54)、重度组(n=72),并依据重度组是否给予机械通气分为非机械通气组(n=38)、机械通气组(n=34).利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外周血血浆中mir-145表达水平,使用流式细胞仪及配套试剂盒检测PBMC中T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平,并用MRFlow流式细胞分析软件自动行CD3+、CD4+、CD8+绝对计数,同时计算CD4+/CD8+值.结果 RSV肺炎组病儿血浆mir-145表达[(1.74±0.48)比(0.99±0.26)]及PBMC中CD8+水平[(30.75±8.39)％比(21.64±5.92)％]均显著高于健康对照组(P<0.05),PBMC中CD3+[(59.04±16.12)％比(68.77±18.35)％]、CD4+水平[(31.27±8.01)％比(46.90±12.84)％]及CD4+/CD8+值[(1.02±0.28)比(2.17±0.63)]均明显低于健康对照组(P<0.05).重度组病儿血浆mir-145表达[(1.87±0.55)比(1.52±0.40)]及PBMC中CD8+水平[(33.96±9.10)％比(25.34±7.02)％]均明显高于轻度组病儿(P<0.05),PBMC中CD3+[(57.05±15.83)％比(63.28±17.21)％]、CD4+水平[(23.78±6.62)％比(38.09±10.14)％]及CD4+/CD8+值[(0.70±0.21)比(1.50±0.39)]均显著低于轻度组病儿(P<0.05).重度RSV肺炎机械通气组病儿血浆mir-145表达[(1.95±0.58)比(1.68±0.45)]及PBMC中CD8+水平[(34.92±9.18)％比(28.17±7.49)％]均显著高于非机械通气组病儿(P<0.05),PBMC中CD3+[(54.72±13.53)％比(61.83±16.04)％]、CD4+水平[(20.45±5.79)％比(34.03±8.85)％]及CD4+/CD8+值[(0.59±0.17)比(1.21±0.36)]均明显低于非机械通气组病儿(P<0.05).RSV肺炎病儿血浆mir-145表达与PBMC中CD3+水平呈负相关(P<0.05),与PBMC中CD4+水平呈负相关(P<0.05),与PBMC中CD8+水平呈正相关(P<0.05),与CD4+/CD8+值呈负相关(P<0.05).结论RSV下呼吸道感染肺炎病儿外周血血浆中mir-145表达水平升高,其高表达可能与T淋巴细胞亚群异常有关.

目的 探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂钠联合亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血清炎症因子、神经损伤及神经行为的影响.方法 选取海南现代妇女儿童医院收治的84例新生儿HIE,随机分为对照组(单唾液酸四己糖神经节苷脂钠治疗)和联合组(单唾液酸四己糖神经节苷脂钠+全身亚低温治疗),两组各42例,比较两组治疗前后血清炎症因子、神经损伤标志物及神经行为测定评分的差异.结果 治疗后两组患儿血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量均低于治疗前(P<0.05),且治疗后联合组患儿血清IL-1β、IL-6及TNF-α的含量均低于对照组(t值分别为4.982、5.894、5.791,P<0.05);治疗后两组患儿血清S100β蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及髓磷脂碱性蛋白(MBP)的含量均降低(P<0.05),且治疗后联合组均低于对照组(t值分别为6.736、7.626、7.942,P<0.05);治疗后两组患儿神经行为测定评分均增高(P<0.05),且治疗后联合组的神经行为测定评分高于对照组(t=5.191,P<0.05);两组治疗期间均未发生药物及亚低温不耐受或其他不良反应.结论 在单唾液酸四己糖神经节苷脂钠静脉滴注治疗的同时,联合应用全身亚低温疗法可有效改善新生儿HIE血清促炎因子的水平,减轻神经损伤,改善神经行为.

目的:探讨传染性单核细胞增多症(IM)儿童中外周血中Toll受体9(TLR9)、γδ-TCR型双阴性T细胞(DNT)的表达.方法:90例IM患儿作为研究对象,其中急性期50例作为急性期组、恢复期40例作为稳定期组,30例同期健康体检儿童作为对照组;IM患儿于入院时、对照组儿童于体检当日抽取外周血,采用流式细胞检测淋巴细胞表型[CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+、CD4/CD8、CD3-CD(16+56)+、CD3-CD19+]及 γδ-TCR型DNT细胞表达,采用实时荧光定量PCR检测TLR9 mRNA表达水平.结果:外周血CD3+、CD3+CD8+及TLR9 mRNA水平比较,急性期组间>稳定期组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05),外周血CD3+CD4+、CD4/CD8、CD3-CD(16+56)+及CD3-CD19+水平比较,急性期组<稳定期组<对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组、稳定期组及急性期组儿童的外周血中均有DNT细胞表达,为(γ+δ)+TCR型,且急性期组>稳定期组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:IM患儿机体免疫机制失衡,这种免疫失衡在IM急性期更为显著,主要表现为TLR9表达上调及特异性(γ+δ)+TCR型DNT细胞表达升高.