目的:探讨lncRNA LINC01419对小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法:取2017年1月至2019年12月本院21例小儿类风湿关节炎患者的滑膜组织及21例因骨折式创伤截肢者的膝关节正常滑膜组织;分离培养小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs),将其分为si-NC组、si-LINC01419组、pcDNA组、pcDNA-LINC01419组、miR-NC组、miR-320a组、si-LINC01419+anti-miR-NC组、si-LINC01419+anti-miR-320a组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC01419和miR-320a的表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(p21)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达;荧光素酶报告实验检测LINC01419和miR-320a的靶向关系.结果:与正常滑膜组织相比,小儿类风湿关节炎患者滑膜组织中LINC01419表达水平升高,miR-320a表达水平降低(P<0.05).抑制LINC01419表达或过表达miR-320a,细胞活性降低,迁移和侵袭细胞数降低,CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达水平降低,p21表达水平升高(P<0.05).LINC01419靶向调控miR-320a的表达,干扰miR-320a表达逆转了抑制LINC01419表达对小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用.结论:抑制LINC01419表达可能通过靶向上调miR-320a抑制小儿类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭.

目的:探讨高胆红素血症(NHB)新生儿血清miR-122表达与肝功能各项指标和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏的相关性.方法:将2020年3月至5月于我院新生儿科足月分娩的新生儿217例,根据临床症状和血清总胆红素(TBil)检测结果分为NHB组(n=144)和非NHB组(n=73),比较两组新生儿肝功能各项指标[谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、TBil、白蛋白(Alb)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)]以及红细胞G-6-PD酶活性.采用实时荧光定量PCR法检测患儿血清miR-122相对表达量,并分析其与各指标之间的关系.结果:与非NHB组相比,NHB组新生儿血清ALT、AST、GGT、Alb、TBil、CRP水平(Z=-11.858～-2.126,均P<0.05)以及血清miR-122相对表达量(t=4.721,P<0.05)显著升高.根据血清TBil水平,将NHB患儿分为轻度、中度、重度3个亚组;与轻度亚组和中度亚组相比,重度亚组NHB新生儿血清ALT、AST、GGT、TBil、CRP、PCT水平以及血清miR-122相对表达量均升高(H=6.045～63.896,均P<0.05).NHB患儿血清miR-122相对表达量与ALT、AST、GGT、TBil、PCT水平呈正相关性(r=0.173～0.550,均P<0.05).22例新生儿G-6-PD缺乏,其血清miR-122相对表达量显著高于G-6-PD正常新生儿(Z=36.831,P<0.05).结论:在NHB新生儿中,血清miR-122相对表达量普遍升高,这与AST、ALT、AST、GGT、TBil、PCT水平升高、G-6-PD酶缺乏有关,因此加强血清miR-122水平检测有助于更准确地评估NHB患儿肝损伤情况.

目的 探讨电针对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马神经元自噬及胰岛素样生长因子1(IGF-1)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的影响.方法 将108只新生大鼠随机分为假手术组、模型组、IGF-1组(0.2 mg/kg)、电针组、电针联合LY294002组(电针+PI3K抑制剂0.3 mg/kg),每组18只.采用左颈总动脉结扎和低氧处理2 h的方法构建新生大鼠HIBD模型(造模成功率为80％).各组大鼠在手术清醒后和电针治疗结束后进行神经功能缺陷评分;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脑组织IGF-1的含量;苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理学变化;透射电镜观察细胞自噬情况;免疫荧光双标法检测自噬标志物与神经元特异性核蛋白(NeuN)的共定位表达;Western blot法检测海马组织PI3K/Akt通路、自噬相关蛋白的表达[PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化p-Akt(p-Akt)、Beclin-1、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3-Ⅰ)].结果 与假手术组相比,HIBD模型组大鼠海马中神经元损伤加重,神经功能缺损评分、海马组织Beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达增加,脑组织IGF-1的含量以及海马组织p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的表达降低;与模型组相比,IGF-1组、电针组神经元损伤减轻,神经功能缺损评分、Beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、自噬小体数量、LC3/NeuN共表达的神经元减少或降低,脑组织IGF-1的含量、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的表达升高;上述差异均有统计学意义(P＜0.05).LY294002能显著降低IGF-1的水平,减弱电针对海马组织IGF-1/PI3K/Akt通路的激活和海马神经元自噬的抑制作用.结论 电针可能通过激活IGF-1/PI3K/Akt通路,抑制海马神经元过度自噬,减轻新生大鼠HIBD.

目的 研究哌拉西林钠他唑巴坦钠联合阿奇霉素对小儿呼吸道细菌感染的疗效及对血清降钙素原(PCT)、白三烯B4(LTB4)的影响.方法 选取480例呼吸道细菌感染患者作为研究对象,按照患者入院诊疗顺序编号,用信封法将其分为观察组和对照组,每组240例,所有患者均采取哌拉西林钠他唑巴坦钠治疗,观察组患者在此基础上联合阿奇霉素进行治疗,2组均治疗7 d.比较2组患者的治疗效果、临床指标、PCT、LTB4水平、炎性指标以及不良反应.结果 观察组患者的治疗效果(95.83％)显著优于对照组(82.50％)(x2=22.081,P=0.000);观察组患者的细菌消失率(90.83％)显著高于对照组(77.08％)(x2=21.041,P=0.000);观察组患者达到进步的平均时间(t=21.019,P=0.000)、达到有效的平均时间(t=5.094,P=0.000)、平均住院时间(t=9.537,P=0.000)均显著短于对照组;治疗后,2组患者的血清PCT、LTB4水平均显著下降,且观察组患者的血清PCT(t=45.160,P=0.000)、LTB4(t=29.583,P=0.000)水平显著低于对照组;2组患者的白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及白细胞介素-6(IL-6)均显著下降,且观察组患者的IL-1β(t=32.963,P=0.000)、TNF-α(t=7.293,P=0.001)及IL-6(t=4.950,P=0.021)水平均显著低于对照组;2组患者腹痛、静脉炎以及皮疹比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 小儿呼吸道细菌感染采用哌拉西林钠他唑巴坦钠联合阿奇霉素治疗效果优于单独治疗.

目的 探讨电刺激对新生缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠脑组织胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)表达和神经轴索超微结构的影响.方法 选择SPF级新生SD大鼠64只,随机分为对照组、模型组、氯胺酮组、电刺激组,每组16只.模型组、氯胺酮组、电刺激组构建HIBD模型,模型组建模后立即予生理盐水灌胃,氯胺酮组建模后立即予氯胺酮灌胃,电刺激组建模后立即予低频电刺激耳后部小脑顶核,对照组不予干预.连续干预4周后,参照Zea-Longa的分级标准评估各组神经功能缺损程度,通过水迷宫实验检测各组学习记忆能力(包括逃避潜伏期、经过原平台位置次数、原平台象限停留时间),显微镜下观察各组脑组织病理变化,采用TUNEL法检测各组神经细胞凋亡率,电镜下观察各组神经轴索超微结构,采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组脑组织IGF-1、IGF-1R mRNA与蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组、氯胺酮组和电刺激组神经功能缺损评分、逃避潜伏期、神经细胞凋亡率明显升高,而经过原平台位置次数、原平台象限停留时间明显降低(P均<0.05);与模型组比较,氯胺酮组和电刺激组神经功能缺损评分、逃避潜伏期、神经细胞凋亡率明显降低,而经过原平台位置次数、原平台象限停留时间明显升高(P均<0.05);而氯胺酮组与电刺激组上述指标比较差异无统计学意义(P均>0.05).对照组海马组织及神经轴索超微结构正常;模型组海马组织可见较多红细胞,炎症细胞浸润明显,神经轴索突触减少,间隙融合,线粒体数量减少;氯胺酮组和电刺激组海马组织红细胞数量较模型组明显减少,炎症细胞浸润亦明显减轻,神经轴索超微结构趋于正常.与对照组比较,模型组、氯胺酮组和电刺激组脑组织IGF-1、IGF-1R mRNA与蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,氯胺酮组和电刺激组脑组织IGF-1、IGF-1R mRNA与蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);而氯胺酮组和电刺激组脑组织IGF-1、IGF-1R mRNA与蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05).结论 电刺激对新生HIBD大鼠脑神经具有明显保护作用,对神经轴索恢复具有促进作用,其机制可能与促进新生HIBD大鼠脑组织IGF-1、IGF-1R表达,进而激活IGF-1/IGF-1R信号通路有关.

目的 探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂钠联合亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血清炎症因子、神经损伤及神经行为的影响.方法 选取海南现代妇女儿童医院收治的84例新生儿HIE,随机分为对照组(单唾液酸四己糖神经节苷脂钠治疗)和联合组(单唾液酸四己糖神经节苷脂钠+全身亚低温治疗),两组各42例,比较两组治疗前后血清炎症因子、神经损伤标志物及神经行为测定评分的差异.结果 治疗后两组患儿血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量均低于治疗前(P<0.05),且治疗后联合组患儿血清IL-1β、IL-6及TNF-α的含量均低于对照组(t值分别为4.982、5.894、5.791,P<0.05);治疗后两组患儿血清S100β蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及髓磷脂碱性蛋白(MBP)的含量均降低(P<0.05),且治疗后联合组均低于对照组(t值分别为6.736、7.626、7.942,P<0.05);治疗后两组患儿神经行为测定评分均增高(P<0.05),且治疗后联合组的神经行为测定评分高于对照组(t=5.191,P<0.05);两组治疗期间均未发生药物及亚低温不耐受或其他不良反应.结论 在单唾液酸四己糖神经节苷脂钠静脉滴注治疗的同时,联合应用全身亚低温疗法可有效改善新生儿HIE血清促炎因子的水平,减轻神经损伤,改善神经行为.