采用网络药理学探讨甘露消毒丹(GXM)治疗猫传染性腹膜炎(FIP)的作用机制.从TCM-SP数据库中筛选出甘露消毒丹主要活性成分及作用靶点,在Uniprot数据库中标准化靶点蛋白,在CTD数据库中找到FIP的靶点,将两个数据库的共同靶点作为关键靶点,用Cytoscape软件构建靶1点相互作用图.在DAVID数据库进行靶点的GO和KEGG富集分析.通过数据筛选分析发现,GXM作用于FIP的主要活性化合物为槲皮素、山奈酚、木犀草素、汉黄芩素、黄芩素、牛蒡子苷、荷包牡丹碱和柚皮素,关键靶点16个;发现GO生物过程5个条目、细胞组成5个条目、分子功能3个条目、KEGG通路富集23个条目.说明甘露消毒丹通过各成分间的协同作用调控多靶点、多通路而发挥抗病毒、抗炎、调节免疫等作用来治疗猫传染性腹膜炎.
为掌握北京市猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)与国内外毒株基因型之间的差异性,无菌采集北京市宠物医院4例疑似患有猫传染性腹膜炎病例的腹水和组织等病料样本,将经RT-PCR诊断为猫冠状病毒(FCoV)阳性的病料样本接种于猫肾细胞(CRFK)进行连续传代培养,结果分离到1株毒株.对分离毒株进行形态学观察,RT-PCR检测,TCID50测定以及基因测序及遗传演化分析.结果显示:该毒株在CRFK上出现典型细胞病变效应(CPE),且经连续细胞接种,可以得到稳定增殖;RT-PCR扩增获得与预期目的基因片段大小一致的条带,证实为FCoV,将其命名为FCoV BEJ5-2021(B5).对该毒株S、3c、7ab蛋白编码基因片段进行测序发现:在S蛋白基因分型上,该分离毒株属FCoV I型,与意大利参考分离株VGCaFn@14同源性为99.8%;基于3c蛋白基因分析,该毒株与德国参考分离毒株FIPV16F同源性为98.9%;基于7ab蛋白基因分析,该毒株与美国参考分离毒株FIPV-UCD 15b-1同源性为99.1%.不同组织病料分离毒株TCID50测定显示,肠管、脾等组织病料中的病毒滴度相对较高,气管中的滴度最低.结果表明:FCoV分离毒株不同基因分型对应不同血清型和生物型,因而基因进化树同源性分析只能确定遗传进化关系;分离毒株对猫肠、脾组织等有较强嗜性.本研究丰富了我国FIPV分子流行病学资料,为该病防控提供了参考.
为了解近年来京津冀地区猫传染性腹膜炎(FIP)的发生发展及流行规律,丰富和更新FIP流行病学数据,2018—2020年从京津冀地区73家动物医院搜集725例疑似猫冠状病毒(FCoV)感染病例的临床检查信息,同时将病例对应的积液、粪便等样本进行分子生物学检测,结合临床信息和检测结果,对FIP流行情况进行三间分布描述和统计学分析.结果显示:京津冀地区疑似病例的FCoV阳性检出率较高,为75.0%(544/725),其中传染性腹膜炎型308例,占42.5%.308例FIP确诊病例中,298例(96.7%)出现了长期反复发烧、腹腔或胸腔积液等湿性临床症状;春、夏、秋、冬四季的FIP阳性检出率分别为37.4%、40.1%、52.8%和37.3%,差异有统计学意义(χ2=18.051,P<0.01);各品种猫均可发病,其中英国短毛猫(36.0%)、中华田园猫(15.9%)和美国短毛猫(26.0%)FIP阳性检出率较高;雌猫的FIP阳性检出率为36.8%,雄猫为45.3%,二者差异有统计学意义(χ2=4.840,P<0.05);未绝育猫(251例)高于绝育猫(57例),差异显著(P<0.05);各个年龄段猫均可感染FCoV甚至发展为FIP,阳性检出率差异具有统计学意义(P<0.05),其中以2月龄到1岁的阳性检出率最高(54.8%).结果表明:京津冀地区FCoV感染及FIP发生较普遍;FIP发生与年龄、性别、品种、绝育情况和季节相关性较高,多发于幼龄、青壮年以及纯种、未绝育的雄性猫,夏秋高温季多发,主要表现湿性临床症状.结果提示,应重视FIP预防,针对其流行特点制定相应措施,尽早诊断,尽早介入治疗.
[目的]建立一种简便有效的猪肺微血管内皮细胞原代培养方法.[方法]选取新生SPF长白仔猪,剪取肺边缘组织,在血清中剪碎至1mm3大小,最后将组织块在六孔板中贴壁培养.对培养出的原代细胞进行形态学观察及免疫学鉴定.[结果]组织块贴壁12h后血细胞大量游出,24h后内皮细胞开始从组织块边缘迁出,48h后内皮细胞呈多角形或梭形聚集在组织块边缘,60h后弃掉组织块.细胞汇合状态时呈典型的铺路石形态,免疫学鉴定CD31特异性抗原阳性.[结论]组织块贴壁法成功培养出原代猪肺微血管内皮细胞.
[目的]旨在研究贝那普利对心阳虚模型大鼠心电图ST段、心率、心肌酶以及心肌组织病理学的作用,为其在临床上对心阳虚证的治疗提供参考.[方法]以阿霉素联合冰水浴冷刺激法制作心阳虚大鼠模型,采用多道生理信号采集处理系统监测心电图、心率变化,并以生化分析仪检测心肌酶活性,常规方法制作心脏切片并观察其组织病理学变化.[结果]模型组大鼠出现虚寒症状,心电图ST段在第35、42天明显抬高(P<0.01),心率从14天开始明显降低(P<0.05/P <0.01),心肌酶LDH、CK、ALT、AST活性显著升高(P<0.05/P<0.01),心肌细胞出现空泡变性、心肌变性和轻度单个核细胞浸润.贝那普利组大鼠虚寒症状好转,心电图ST段在第7、14、35、42天明显回落(P<0.05/P<0.01),心率在第14、35天显著增加(P<0.01),心肌酶LDH、CK、ALT、AST活性显著降低(P<0.05/P<0.01),心脏仅见极轻度单个核细胞浸润.[结论]贝那普利通过降低心电图ST段异常升高、增加心率、降低心肌酶活性、改善心肌损伤程度减轻心阳虚模型大鼠虚寒症状,对其具有良好的预防和保护作用.
经络腧穴等基础理论的研究是提高兽医针灸技术的源泉,而古今兽医针灸著作中论述经络腧穴基础理论的内容很少,对经络循行的认识笼统,对一些腧穴的定位含糊,令人困惑.笔者陈述了兽医对动物经络腧穴的认识现状及自己对其发展的几点体会,在取法"天人一理"易学规律、《黄帝内经》等经典基础上,做出了动物经络循行、腧穴命名和定位应取法子人即"兽法人"的论断,以求抛砖引玉,促进祖国传统兽医学经络腧穴等基础理论研究和传承的百花齐放,更好地服务于兽医临床实践.
[目的]为了更加有效的防治犬齿病.[方法]采集北京地区动物医院就诊犬的牙菌斑样本64例,利用Illumina HiSep测序平台对微生物16S rRNA的V3~V4高度可变区扩增产物进行测序,分析牙菌斑微生物的群落结构.[结果]通过检测共得到1 567 731条可分析序列,每个样本的平均序列为24 495条,这些序列经过处理可划分为14个门,159个属.其中有5个高丰度菌门(96.93%),以及6个核心菌属(73.41%),分别为卟啉单胞菌属(Porph yromonas,19.96%)、放线菌属(Actinomyces,14.12%)、棒杆菌属(Cor ynebacterium,12.19%)、奈瑟菌属(Neisseria,13.24%)、梭杆菌属(Fusobacterium,9.17%)、密螺旋体属(Treponema,4.73%).[结论]卟啉单胞菌属、放线菌属、棒杆菌属、奈瑟菌属、梭杆菌属和密螺旋体属是宠物犬牙菌斑微生物群落结构的核心菌属.