Ovarian cancer is a malignant tumour that develops in the ovaries. Treatment options include surgery and chemotherapy, but these methods can have serious side effects. Reports suggest that Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg (TH), a traditional Chinese medicine, has an inhibitory effect on malignant tumour cell proliferation. Tetrastigma hemleyanum polysaccharide (THP), extracted from the roots, stems and fruits of Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg, exhibits potential anticancer activity. This study found that THP significantly reduced the viability of human ovarian cancer SKOV3 cells in a dose and time-dependent manner, and markedly inhibited their migratory and invasive capacities. THP downregulated the S-phase related proteins Cyclin A2 and CDK2 while upregulating p21, thereby inducing S-phase arrest. Furthermore, THP upregulated the apoptosis-related genes and proteins Bax and Caspase-3, downregulated Bcl-2 and survivin, thereby promoting apoptosis in SKOV3 cells. Therefore, this study suggests that THP has anticancer potential against ovarian cancer in vitro.

Euonymusfortunei polysaccharides (EFPs) have not been extensively investigated yet in terms of their extraction and biological activity. The orthogonal experimental design was employed in this study to evaluate the optimum yield of EFPs. A maximum yield of 2.63 ± 0.23% was attained using material-liquid ratios of 60 mL/g, extraction temperature of 80°C, ultrasonic power of 144 W, and extraction time of 75 mins. The polysaccharide content reached 53.47 ± 0.31% when deproteinized thrice. An analysis of monosaccharide composition revealed that these polysaccharides consist of Gal, Glc, Man, Fuc, and Rha with a molar ratio of 7.14 ∶ 23.99 ∶ 6.29 ∶ 6.55 ∶ 1.00, respectively, in EFPs. Subsequently, the in vitro scavenging capacities of 2,2-diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) and ·OH and superoxide anion radicals, along with the reducing power of EFPs, were studied. Results revealed that EFPs have higher antioxidant activity, particularly ·OH scavenging, as well as reducing power, as compared to Astragalus polysaccharides (ASPs) and Lycium barbarum polysaccharides (LBPs). The Cell Counting Kit-8 (CCK-8) method was used to evaluate the effects of different concentrations of polysaccharides on SKOV3 cell proliferation, and the results revealed their inhibition at concentrations in the range of 200–800 μg/mL. In addition, findings from flow cytometry further confirmed that EFPs blocked the cell cycle at G0/G1 and S phases and induced SKOV3 cell apoptosis. In a word, EFPs could be exploited and used further based on the experimental results from this study.

为了提高课堂教学质量,作者教学团队在2018级109名临床本科生的"医学生物化学与分子生物学"教学中开展对分课堂.将每一知识单元的教学分为3个环节:首先教师讲授主体框架和重点难点;随后学生进行当堂自主学习;最后为课堂讨论阶段,学生进行分组讨论,教师给予及时反馈和总结.进行教学评价时,对分课堂模式教学得到绝大部分学生认可,提高了学生的学习主动性,能够培养团队合作精神和交流沟通技巧.

随着信息时代的到来,计算机技术、互联网技术的高速发展为线上线下相结合的混合式教学模式提供了无限可能.混合式教学指线上授课、自主学习与线下面授教学的混合,强调借助丰富的媒体化资源,鼓励自主、合作与碎片化学习,是对传统教学的内涵式提升和外延式发展.据调查,在新冠疫情发生后有76.5％的高校教师愿意采用"线上+线下"的混合式教学,有过在线教学经历的教师大多数对在线教学持积极的接受态度,不愿意继续采用混合式教学的教师比例只有9.8％[1],说明教师通过自身的教学实践逐渐认识到了在线教学的优势.

目的:建立702糖浆中何首乌、鸡血藤、钩藤的薄层色谱鉴别及何首乌中有效成分2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)的含量测定方法,为702糖浆的质量控制提供依据.方法:采用薄层色谱法(TLC)定性鉴别702糖浆中的何首乌、鸡血藤、钩藤等成分,采用高效液相色谱法(HPLC)测定二苯乙烯苷的含量.结果:何首乌、鸡血藤、钩藤等的TLC斑点清晰、阴性对照无干扰,具有较强的特异性;二苯乙烯苷在1.014 6～25.019 0 μg/mL范围内与峰面积呈现良好线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为99.6％,RSD为1.58％;各批样本间二苯乙烯苷含量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:该方法可以定性鉴别702糖浆并测定其有效成分的含量,且操作简便,重复性好,稳定性高,可用于702糖浆的质量控制.

课程质量是人才培养质量的核心.人体代谢与疾病是广西医科大学一门重要的教学改革课程,它将物质代谢的基础知识与临床应用有机融合.文章结合多年的教学实践,对PBL+LBL教学模式引入课程的重要性、教学目标设定、教学实施方案、考核方式及反馈、存在问题及改进措施进行了深入探讨,为高等医学院校基础课程建设及教学改革提供了有益的经验.

多糖是一种结构、分子量等具有多样性的高分子化合物,也是具有生物活性、构成生命活动的四大基本物质之一.多糖的药理作用较为广泛,不但参与调节机体的代谢、免疫功能,还具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血糖等作用.近年来,抗肿瘤药物的研究面临巨大挑战,多糖因其显著的抗肿瘤活性,以及其高效、毒副作用小、来源广泛、价格低廉等优点,得到了科研工作者的广泛关注与研究.本文就多糖抗肿瘤的作用及其作用机制研究概况进行综述,旨在为其后续的制剂开发、临床研究与应用提供理论基础及文献依据.

通过探索建设具有我校生物化学与分子生物学学科特色的"金课",全面梳理课程教学内容,拓展课程深度,将线上和线下教学的优势结合,弥补传统线下教学的缺点,解决医学相关专业学生在生化学习过程中难度过大问题,培养学生综合基础医学思维能力,有助于提高医学相关专业学生在实际工作中独立地发现问题、解决问题的能力.

目的 探索扶芳藤总三萜对D-半乳糖诱导的小鼠衰老模型抗氧化作用.方法 取健康清洁级雄性昆明小鼠75只,以皮下注射D-半乳糖(D-galactose)方法建立衰老小鼠模型;并将小鼠以单纯随机抽样法分为阳性药物组、模型组、扶芳藤总三萜高、低剂量组及正常对照组,每组15只,各组每天按预设方案给药连续21 d后,检测小鼠血清、心脏、肝脏及骨骼肌组织总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)三项抗氧化指标.结果 与对照组比较,高、低剂量组小鼠的血清T-AOC及GSH-Px水平均升高,其中低剂量组的T-AOC水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但其他各组的T-AOC及GSH-Px水平升高不明显,差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高、低剂量组小鼠心脏组织的T-AOC、CAT、GSH-Px水平均升高,其中高、低剂量组的T-AOC水平明显高于对照组,高剂量组CAT水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但其他各组的T-AOC、CAT、GSH-Px水平升高不明显,差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高、低剂量组小鼠肝脏组织的T-AOC、CAT、GSH-Px水平均升高,其中高剂量组的CAT水平明显高于对照组,高剂量组的GSH-Px水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但其他各组的T-AOC、CAT、GSH-Px水平升高不明显,差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高、低剂量组小鼠骨骼肌组织的T-AOC、CAT、GSH-Px水平均升高,其中高、低剂量组的T-AOC水平明显高于对照组,高剂量组的CAT水平明显高于对照组,高剂量组的GSH-Px水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但低剂量组的CAT水平和GSH-Px水平升高均不明显,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 扶芳藤总三萜可提高衰老小鼠抗氧化能力,具有抗衰老功效.

目的 探讨肿节风SCAR分子标记克隆与验证.方法 从随机引物库中挑选出45条10碱基的随机引物,采用RAPD方法对4种不同产地肿节风基因组DNA进行扩增,从中筛选出S41号引物扩增的RAPD分子标记,克隆测序后,经比对确定其同源序列获得SCAR分子标记,设计引物,对9种不同产地的肿节风和3种同科混淆品鸡爪兰、及己与金粟兰进行特异PCR扩增,验证引物特异性.结果 RAPD扩增获得中药肿节风的SCAR分子鉴定标记,据此设计出鉴定肿节风的特异引物,PCR扩增显示肿节风在500 bp左右处均出现有条带,与预期扩增长度基本相符,而3种同科植物均未出现条带.结论 本研究获得肿节风SCAR分子标记,并设计出特异引物,可用于鉴别该药材与其混淆品.

以三叶青为试材,采用水提法提取可溶性多糖,并在单因素试验基础上做L9(34)正交实验,优化提取工艺参数,通过测定三叶青多糖的总抗氧化能力、还原力,以及清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的能力,研究其抗氧化作用.结果表明:在料液比1 : 35 g ? mL-1、提取次数1次、提取时间1. 5 h、提取温度90 ℃时,三叶青多糖的提取率最高为7.34％.总抗氧化活力为88.96 U ? mL-1,且具有一定的还原力;对DPPH、羟基、超氧阴离子自由基的清除率分别为36. 8％,65. 1％、36.8％.综上所述,料液比1 : 35g.mL-1、提取次数1次、时间1.5 h、温度90 ℃为三叶青多糖提取的最佳工艺参数.在该参数下,三叶青中提取的多糖含量最高,且具有一定的抗氧化作用.

目的 采用18 S rRNA基因、ITS2序列、SCAR标记等3种DNA分子标记法鉴别草珊瑚,为其分子鉴定提供依据.方法 通过PCR扩增、克隆测序后获得草珊瑚18 S rRNA基因序列,并进行Blast比对;通过PCR扩增、测序并注释后获得草珊瑚ITS2序列,从GenBank上收集混伪品和其他植物的ITS2序列,使用MEGA 5.5软件,计算种内种间遗传距离,构建系统聚类树;通过RAPD法获得草珊瑚SCAR分子标记,克隆测序后,设计特异性引物扩增草珊瑚及其混伪品.结果 获得的草珊瑚18 S rRNA基因长度为1 820bp,Blast比对显示草珊瑚与金粟兰科同源性最高,同源性为99％,证明其为草珊瑚的18 S rRNA基因.获得的草珊瑚ITS2序列长度为500 bp,草珊瑚与其混伪品之间的遗传距离为0.190～0.219,混伪品之间的遗传距离为0～0.074,聚类分析显示草珊瑚聚为一支,混伪品聚为一支,与其他植物距离较远.获得草珊瑚的SCAR分子标记,用特异性引物扩增出现草珊瑚特异性产物,混伪品未出现特异性产物.结论 3种分子标记法联合可更有效地鉴别草珊瑚及其混伪品,从而建立一套新的鉴别草珊瑚与混伪品的方法,为其鉴别提供新的思路.

Triterpenoid saponins are secondary metabolites synthesized through isoprenoid pathways in plants. Cucurbitaceae represent an important plant family in which many species contain cucurbitacins as secondary metabolites synthesized through isoprenoid and triterpenoid pathways. Squalene synthase (SQS) is required for the biosynthesis of isoprenoids, but the forces driving the evolution of SQS remain undetermined. In this study, 10 SQS cDNA sequences cloned from 10 species of Cucurbitaceae and 49 sequences of SQS downloaded from GenBank and UniProt databases were analyzed in a phylogenetic framework to identify the evolutionary forces for functional divergence. Through phylogenetic construction and positive selection analysis, we found that SQS sequences are under positive selection. The sites of positive selection map to functional and transmembrane domains. 180L, 189S, 194S, 196S, 265I, 289P, 389P, 390T, 407S, 408A, 410R, and 414N were identified as sites of positive selection that are important during terpenoid synthesis and map to transmembrane domains. 196S and 407S are phosphorylated and influence SQS catalysis and triterpenoid accumulation. These results reveal that positive selection is an important evolutionary force for SQS in plants. This provides new information into the molecular evolution of SQS within the Cucurbitaceae family.

目的:探索黑素瘤相关抗原D4 (MAGE-D4)基因工程菌原核诱导表达的最佳条件,以提高目的蛋白产量.方法:设置不同宿主菌(DH5α、TB1、Rosetta)、诱导时机(重组菌分别培养0.5～3 h后进行诱导)、诱导剂IPTG浓度(0.1～0.9 mmol/L)和诱导时间(1～8 h)等条件,诱导MAGE-D4重组质粒表达,通过SDS-PAGE电泳和Image J软件扫描电泳图谱的方法,对目的蛋白的表达量和可溶性进行分析.通过间接酶联免疫吸附试验(ELISA)法对35例肝癌患者血清MAGE-D4抗体进行检测,分析MAGE-D4融合蛋白的免疫活性.结果:将重组质粒转化至Rosetta(DE3)大肠杆菌,菌液OD600达到0.8时加入IPTG至终浓度0.9 mmol/L,37℃诱导培养7h,可有效提高目的蛋白的表达量.可溶性MAGE-D4融合蛋白表达量约占菌体总蛋白的25.5％.肝癌患者血清中MAGE-D4抗体的阳性率为28.57％(10/35),其MAGE-D4抗体平均效价明显高于正常人(P＜0.05).结论:本研究优化了MAGE-D4融合蛋白的原核表达条件,获得了可溶性、具有免疫活性的重组蛋白.

目的 筛选扶芳藤总黄酮的最适提取条件,观察扶芳藤总黄酮提取物对衰老小鼠血清及心肌组织中抗氧化指标过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响.方法 通过正交试验L9(33)法确定扶芳藤总黄酮提取的最适温度、最适料液比以及最适提取时间.取50只健康雄性昆明小鼠,随机分为正常组、模型组及扶芳藤总黄酮低、中、高剂量组各10只.模型组及扶芳藤总黄酮组给予D-半乳糖0.2 mL/d颈背部皮下注射诱导衰老,正常组注射等量生理盐水,连续1周.从第3周开始,扶芳藤总黄酮低、中、高剂量组分别给予0.2、0.4、0.8 g/mL扶芳藤总黄酮提取液灌胃,正常对照组给予等量蒸馏水灌胃,连续4周.最后一次给药后,取小鼠眼球血和心脏,检测血清、心肌组织中的CAT、T-AOC、GSH-Px活性.结果 当提取条件为温度60℃、料液比1:50、时间30 min时,总黄酮提取率为3.57％,高于其他条件下的总黄酮提取率(P均<0.01).与正常组比较,模型组血清及心肌组织中CAT、T-AOC、GSH-Px活性下降(P均<0.05);与模型组比较,扶芳藤高、中、低剂量组血清及心肌组织中CAT、T-AOC、GSH-Px活性均升高(P均<0.05),其中高剂量组各指标高于中、低剂量组(P均<0.05).结论 扶芳藤总黄酮提取的最适条件是:温度60℃、料液比1:50、时间30 min;扶芳藤总黄酮提取物可以提高衰老小鼠血清和心肌组织中CAT、T-AOC、GSH-Px的活性,其可能通过提高抗氧化能力而发挥抗衰老作用.

目的 观察扶芳藤15％乙醇提取部位的抗HIV-1作用,为寻找新的有效治疗艾滋病药物提供依据.方法 以TZM-b1-HIV-1 ⅢB系统和MT2-HIV-1ⅢB系统为实验模型,使用荧光素酶活性检测试剂检测病毒复制水平,ATP法检测不同浓度扶芳藤提取物作用下细胞的相对活力;通过酶标仪检测化学发光信号,计算相对病毒水平和相对细胞活力.结果 扶芳藤提取物在TZM-b1-HIV-1 ⅢB系统和MT2-HIV-1ⅢB系统中,可在较大浓度范围对病毒感染产生抑制作用,而不对细胞造成较大毒性,因此该提取物为扶芳藤抗HIV-1中药有效部位.结论 扶芳藤15％乙醇提取部位,抗HIV-1效果明显,为今后深入研究其药用价值和临床意义提供了更为有力的理论基础.

目的:研究复方白花蛇舌草胶囊的抗肿瘤作用.方法:制备复方白花蛇舌草胶囊含药血清,观察其对体外培养的HepG2、BEL-7402肿瘤细胞克隆、增殖能力的影响,及对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响.建立H22和S180荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤实验,小鼠随机分为荷瘤对照组、氟尿嘧啶组及复方白花蛇舌草胶囊高、中、低剂量组,连续灌胃给药7d后,观察复方白花蛇舌草胶囊对荷瘤小鼠的抑瘤作用.结果:复方白花蛇舌草胶囊高剂量含药血清可有效抑制HepG2、BEL-7402细胞的克隆形成能力,提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,与空白对照组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).复方白花蛇舌草胶囊高、中剂量组对H22荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用(P＜0.05).结论:复方白花蛇舌草胶囊具有一定的抗肿瘤作用.

扶芳藤 Euonymus fortunei(Turcz.)Hand.-Mazz.为卫矛科常绿藤本灌木,又名卫生草、岩青藤、万年青、岩青杠等,在治疗跌打损伤、腰肌劳损、关节酸痛和咯血等方面有较好功效.《本草拾遗》记载:"扶芳藤,无毒,味苦,小温,主一切气,一切血,一切冷,去百病……久服延年[1]."近年来,有关扶芳藤的研究日渐增多并取得了一定进展,本文对扶芳藤的物种资源、化学成分、质量控制、成分提取、药用价值综述如下,为其鉴定、临床应用及产品开发提供依据.

生物化学是医学院校中一门重要的基础课程.随着我国教育改革的发展,对该课程的教学提出了新的要求,针对这些要求,文章从教学对象、教学目标、教学内容、教学方法等方面进行了总结与反思,以此提高教学能力,改善教学效果来适应当前教育教学改革的发展.

[目的]探讨橄榄中甘油三酯的含量测定方法.[方法]以索氏提取法提取橄榄油,采用紫外-可见光谱法对甘油三酯的含量进行测定.[结果]甘油三油酸酯标准液浓度在0.202～1.010 mg/ml范围内与吸光值呈现较好的线性关系(r2=0.9948),橄榄中甘油三酯含量可达88.58％.[结论]紫外-可见光谱法可作为测定橄榄中甘油三酯含量的快速方法,且该方法简便、重现好、结果准确.