目的 构建野生型及突变型人Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)3'非编码区(3'UTR)基因重组质粒,并进行鉴定.方法 提取293T细胞基因组DNA,以其为模板进行PCR扩增,获得TLR2的3'UTR基因片段,连接至载体pmiR-RB-REPORT?,转化感受态E.coli DH5α,于LB(Amp+)固体培养基中培养过夜,菌落PCR筛选阳性克隆,并测序.根据TLR2 3'UTR与miR-122的预测结合靶点,设计突变型TLR2 3'UTR扩增引物,以构建的野生型TLR2 3'UTR重组质粒为模板,PCR扩增突变序列,相同方法进行载体连接及转化,挑取菌落,测序.结果 野生型TLR2 3'UTR重组菌经菌落PCR鉴定,可见1 000 bp的目的基因片段,大小与预期相符;测序结果表明,插入序列与TLR2 3'UTR序列完全一致.突变型TLR2 3'UTR重组质粒测序鉴定结果表明,靶序列CACTCC已更改为GTGAGG.结论 成功构建了野生型及突变型人TLR2 3'UTR重组质粒,本实验为TLR2功能的深入研究提供了实验依据.

为提高人体寄生虫学的教学水平,本文对人体寄生虫教学中存在的问题进行了分析,并针对存在的问题展开讨论,使教学符合学生的思维和学科的教学特点,提出了融入PBL教学法教学方式、重视多媒体教学,充分发挥多媒体教学的优势、教学课程设置合理,与时俱进、重编实验教学大纲、培养学生的动手能力等对策,使教学改革符合当前我国医学教育改革的总趋势.

目的 探讨蒙药肉桂对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导血管内皮细胞凋亡的保护性作用及其机制.方法 采用人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)为研究对象,采用CCK-8细胞活力检测法筛选LPS体外诱导细胞凋亡浓度及肉桂给药浓度.将HUVECs分为对照组(无血清培养基)、LPS组(1μg/mL)和LPS(1 μg/mL)+肉桂(2 mg/mL)组,利用CCK-8法检测细胞存活率;ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α含量;实时荧光定量PCR法检测细胞中PARP(116 kD)和UCP2基因mRNA水平;Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白PARP(89 kD)和p-mTOR蛋白表达水平.结果 与对照组相比,LPS组细胞存活率显著降低(P＜0.05),TNF-α分泌量显著升高(P＜0.01),PARP(116 kD)和UCP2基因mRNA水平显著降低(P＜0.05),PARP(89 kD)和p-mTOR蛋白表达水平显著升高(P＜0.01);与LPS组相比,LPS+肉桂组细胞存活率显著升高(P＜0.05),TNF-α分泌量显著减低(P＜0.01),PARP(116 kD)和UCP2基因mRNA水平显著升高(P＜0.05),PARP(89 kD)和p-mTOR蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论 蒙药肉桂对LPS诱导的HUVECs凋亡具有一定的保护性作用,且可能通过线粒体途径发挥作用.

本研究拟通过低剂量联合措施对高心率病人进行双低CT冠状动脉造影,评价新技术可行性.本研究入组病人39例,随机分为A、B两组.A组20例采用前门控低剂量联合措施,B组19例采用前门控常规模式扫描.比较辐射剂量与碘负荷;比较主观图像质量与客观图像质量;评价A、B两组管腔测量可重复性.结果 显示A组病人有效剂量为(0.92±0.27) mSv,B组病人有效剂量为(1.95±0.78) mSv,t=-5.567,p＜0.01.A组病人对比剂容积为(42.00±6.16) mL,B组病人对比剂容积(54.32±6.16) mL,t=-6.245,p＜0.01.冠状动脉节段A组(n=231)评分(3.48±0.66)分,B组(n=244)评分(3.59±0.57)分,t=-1.848,p=0.065,差异无统计学意义.A组CNR为(18.84±4.62),B组为(21.21±2.53),t=-1.974,p=0.056,差异无统计学意义.A组组间差值为(0.04±0.33) mm,B组组间差值为(-0.18±0.43) mm,t=1.857,p=0.071,差异无统计学意义.通过低剂量联合措施优化可以使得前瞻性心电门控序列CTCA扫描最大限度降低辐射剂量与对比剂用量,而图像质量无变化.

目的 探讨分析不同pH值条件对肠致病性大肠埃希菌生物膜形成能力及对致病岛基因的影响.方法 选择肠致病性大肠埃希菌(EPEC)菌株(E11435)作为本次实验的研究对象,将此菌株接种在PH值为7、9、11的培养基中.对培养一段时间后三个PH值下的菌株进行检查,检查的内容有菌株的生物膜形成能力以及致病岛基因(Es-pA)的表达情况.结果 在生物膜形成能力中,PH值为7和9的菌株生物膜形成能力差别不大(P>0.05),PH为11的菌株生物膜形成能力更高(P<0.05).在致病岛基因(EspA)的表达情况中,PH值为7和9时差别不大(P>0.05),在PH值为11时EspA基因的表达能力更高(P<0.05).结论 高PH值的环境会提高肠致病性大肠埃希菌生物膜形成能力及致病岛基因的表达能力.

为了提高教学水平,拓宽教学思路,提高学生的动手能力和逻辑思维能力,将LBL与PBL相结合的教学模式尝试应用于医学微生物学实验教学,各取其优势,取得了良好的教学效果.在学生掌握基本的实验技能和方法的基础上,既调动了学生学习积极性,注重培养学生自主学习能力、知识整合构建能力和团结协作能力,又结合LBL教学法系统、完整地传授了知识,增强学生对理论知识的理解与记忆,为以后的临床工作打下坚实的基础.

医学微生物学是一门具有很强实践性和应用性的学科.实验课能很好地诠释在理论课上难以理解的概念并帮助学生掌握必要的实验技术.为了规范实验操作,激发学生自主学习的兴趣,扩展学生的知识面,尝试将微课教学模式与医学微生物学实验教学相结合,取得良好的教学效果.文章结合对微课的应用实践,探讨了微课在实验教学中对学生自主实验操作及提高教师教学能力等方面的作用.

目的 评价喷鼻三价流感裂解疫苗在小鼠体内产生的免疫原性及免疫保护性.方法 选用H1N1、H3N2、B型3种裂解抗原联合后,与佐剂壳聚糖季铵盐(HTCC)水凝胶等体积混合,制备三价流感裂解疫苗.经喷鼻免疫BALB/c小鼠,免疫剂量为每种单价抗原2μg/只,第0及14天各免疫1次,于末次免疫后第14天制备小鼠血清及鼻、肺、阴道灌洗液.血凝抑制法检测小鼠血清的血凝抑制抗体(HI)效价;ELISA法检测小鼠血清中IgG及其亚型抗体效价和小鼠鼻、肺、阴道灌洗液中sIgA效价;末次免疫14d,用H1N1流感病毒进行攻毒,观察小鼠体重变化及死亡率.结果 经喷鼻免疫三价流感裂解疫苗的小鼠血清可产生较高效价的HI抗体,IgG抗体亚型以IgG1与IgG2a为主,小鼠鼻、肺、阴道灌洗液中均可检测到特异性sIgA.攻毒后小鼠体重变化较小,14d后全部存活.结论 经喷鼻免疫三价流感裂解疫苗可激发小鼠产生体液、细胞及黏膜免疫反应,具有良好的免疫保护性.

With the reform of the credit system for the schools,this paper expounds the biochemistry experimental course in our university under credit system reform of experiment teaching to optimize allocation of resources,including laboratory update of contents of experimental teaching,the hierarchical experimental teaching system,improving experiment teaching methods,reforming experiment examining ways.

阐述了高校实验室的几个安全问题及其防范措施。并通过具体分析高校实验室存在的几个主要安全问题,认为应从加强实验人员安全教育为基本要求,并明确规定各自岗位所承担的安全职责,以保证实验室的人身和财产安全。

医学院校生物化学实验室是实验教学和科研的重要基地。本文分析了医学院校生物化学实验室存在的安全问题,并针对这些安全问题提出了具体防范的措施,且从如何培养安全意识、制定安全管理制度等方面探讨了如何杜绝实验室安全隐患,保证实验教学过程的顺利进行。

生物化学与分子生物学实验教学需要用到大量生物试剂、癌细胞和细菌,在实验过程中,如果使用不当,将会危害人体健康并污染环境。本文针对实验室存在的安全隐患,提出相应的对策,同时进一步加强实验室安全管理工作,强调实验室安全对学生、学校乃至全社会稳定的重要性,完善实验室的各项管理制度以及排除安全隐患,杜绝安全事故的发生,为师生营造一个安全和谐的实验教学环境。

To study the effect of 1,25-dihydroxy vitamin D3 [1,25(OH)2D3]in the proliferation of human ovarian cancer cells,HO8910 human ovarian cancer cell line were cultured in vitro and treaed with different concentrations of 1,25(OH) 2D3 for 1,2 and 3 days.Cell proliferation was evaluated by MTT assay.Cell cycle and apoptosis were determined by flow cytometry(FCM).It is resulted that different concentrations of 1,25(OH) 2D3 could inhibited the growth of HO8910 cells and in a time and dose-dependent manner(P 0.05).1,25(OH) 2D3 could change cell cycle of HO8910 cells,increased the rates of G1,decrease therates of S and G2/M(P0.01),and so decreased cells proliferation index(PI﹡)(P 0.01).They could induced apoptosis(P0.05),then inhibit proliferation of ovarian cancer cells.It is conclused that 1,25(OH)2D3could inhibit the proliferation of human ovarian cancer cell line H08910,change the cell cycle and induced G1 phase arrest,induce apoptosis,then inhibit proliferation of HO8910 cells.

The agar diffusion technique was adopted to compare the bacteriostatic ability of Allium mongolium Regel Polysaccharides(SCSP),fresh juice of Allium mongolicum Regel and Astragalus polyose(HQSP) in vitro to E.coli,S.dysenterriae,Staphylococcus aureus,Staphylococcus albus,Pseudomonas aeruginosa,Proteus.The results show that the 20 mg/mL and 40 mg/mL of SCSP have a definite inhibitory effect on all 6 tested bacteria above,especially to E.coli and Staphylococcus aureus with diameters of the biggest inhibition zone 13.3 mm and 9.8 mm respectively,and the effects of the two different contents have no significant difference(P>0.05).The HQSP has no bacteriostatic effect.Fresh juice of Allium mongolicum Regel has the most remarkable bacteriostatic effect,the diameters of the inhibition zones are all ≥8 mm.Its inhibitory effect on intestinal flora Shigella dysenteriae is especially remarkable,the diameter of the biggest inhibition zone reached 21.2 mm.