目的 研究玉簪花提取物对RAW264.7巨噬细胞炎症模型和BALB/c小鼠支气管哮喘模型的影响.方法 建立脂多糖与人干扰素-γ诱导的RAW264.7细胞炎症模型,用玉簪花提取物预处理模型细胞,测定细胞上清液中一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平.将BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、阳性组、玉簪花提取物高、低剂量组.采用卵清蛋白致敏和激发哮喘,末次给药24 h后,分析小鼠全血中淋巴细胞、单核细胞、粒细胞的数量,吉姆萨染色观察嗜酸性粒细胞的数目;ELISA法检测小鼠血清中总免疫球蛋白E(IgE)的水平、NO的含量、支气管肺泡灌洗液中IL-6与TNF-α的水平以及肺组织细胞黏附因子-1(ICAM-1)的水平;HE染色观察小鼠肺组织炎症及病理变化.结果 玉簪花提取物可显著抑制炎症细胞因子的表达;显著降低卵清蛋白模小鼠炎症细胞和嗜酸粒的数量,减少NO生成,降低IgE的含量,显著降低肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α的水平以及肺组织中ICAM-1的表达.结论 玉簪花提取物对细胞炎症模型和哮喘气道炎症模型有较好的抑制作用,可为其治疗哮喘的研究提供参考.
目的 采用HPLC法快速测定沙棘叶中苯丙素类(没食子酸、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸等)和黄酮类(原儿茶酸、儿茶素、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷-7-O-鼠李糖苷等)化合物的含量.方法 采用KromasilC18色谱柱(250 mm x4.6 mm,5 μm),0.1％甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长为280 nm,进样量10 μL.结果 没食子酸、原儿茶酸、儿茶素、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷-7-O-鼠李糖苷的线性范围分别为0.012～0.870、0.696～3.913、0.203～4.174、0.203～3.043、0.035～2.609、0.023～3.478、0.565～8.478、0.522～7.826 µg(r2 ≥ 0.9992),平均回收率为93.58％～108.11％,RSD≤1.81％.采用该方法测定不同产地的沙棘叶中均含上述8种酚酸类化合物,但含量有差异.结论 所用方法分离效果好、操作简便、重复性和稳定性较好,可控制沙棘叶中酚酸类成分的质量.
目的 研究胡椒科胡椒属植物粗梗胡椒Piper macropodum C.DC.的化学成分.方法 采用多种柱色谱法结合HPLC法,分离纯化粗梗胡椒95％乙醇提取物,经理化性质和波谱数据解析,确定化合物的结构.结果 从95％乙醇提取物中分离鉴定了 9个单体化合物,分别为preussomerin BG1(Ⅰ)、palmarumycin BG1(Ⅱ)、植物醇(Ⅲ)、4-烯丙基儿茶酚(Ⅳ)、schisanuilsonene A(Ⅴ)、opposit-4(15)-ene-1β,7-diol(Ⅵ)、iasiodiploclin(Ⅶ)、isochroman-1-one(Ⅷ)、茴香醛(Ⅸ)等.结论 化合物Ⅰ～Ⅱ、Ⅴ～Ⅷ为首次从该属植物中分离得到,所有化合物均为首次从该种植物中得到.
由于药物自身性质与胃肠道吸收屏障,口服给药的生物利用度受到限制.纳米载体对药物口服生物利用度提高的效果有限,修饰可显著提高纳米载体穿越胃肠道屏障的能力.现综述不同分子修饰纳米载体穿越吸收屏障的机制及改善药物口服生物利用度的研究,为设计口服纳米载体提供了参考.
目的 运用网络药理学、分子对接技术及动物实验研究地榆抗皮肤光老化的活性成分及作用机制.方法 通过TCMSP数据库筛选地榆的活性成分及靶点;检索Drugbank、GeneCards、OMIM等数据库获取光老化疾病的靶点;采用STRING分析及Cytoscape软件构建蛋白相互作用(PPI)网络;对交集靶点进行GO功能注释和KEGG富集分析;选取核心靶点与对应的活性成分进行分子对接验证;最后,通过动物实验验证关键靶点.结果 筛选得到的地榆活性成分中,与光老化对应的潜在靶点158个,核心靶点11个,其中,包括MAPK、FOS靶点,GO、KEGG富集分析主要涉及PI3K/Akt通路、NF-κB通路,分子对接结果显示:槲皮素与MAKP1的结合最为稳定.动物实验表明:地榆提取物能显著改善小鼠皮肤光老化,并显著降低p-ERK1/2、p-p38、p-JNK、p-c-fos蛋白表达的水平.结论 地榆在治疗皮肤光老化方面具有多靶点和多通路的作用特点.
激酶作为极具潜力的抗肿瘤药物靶点被广泛研究,与激酶抑制剂靶向治疗相关的心脏不良反应使癌症患者面临更高的生存风险.现综述激酶抑制剂的分类、分子机制及不良反应(特别是心脏方面)的研究进展.
目的 检测不同种类中药(款冬花、地龙、前胡、枇杷叶、枳实)中苯并[a]蒽、䓛、苯并[b]荧蒽、苯并[a]芘等4种多环芳烃(PAH4)的残留量,并分析其摄入危害.方法 运用HPLC荧光法测定中药中PAH4的含量;采用暴露边界值(MOE)法分析其摄入危害.结果 在欧盟干草药PAH4限量标准(EU 2015/1933号法规)下,51批中药整体超标率为49.0％.苯并[a]芘的最高含量为59.75μg·kg-1,是最大限量值(10μg·kg-1)的6.0倍.PAH4的最高含量为965.65μg·kg-1,是最大限量值(50 μg·kg-1)的19.3倍.款冬花PAH4的MOE值外,其余均＞10 000.不同种类中药PAH4的平均值排序为花类＞动物类＞根类＞叶类＞果实类.结论 尝试分析中药中PAH4的摄入危害,为中药中开展PAH4的风险评估打开新的思路.经款冬花摄入的PAH4存在健康风险,应给予关注,建议分品种逐步制定中药中PAH4的限量标准.
目的 考察异丙醇中的苯、甲醇、乙醇、丙酮、仲丁醇、正丙醇、异丙醚等挥发性杂质,评估其作为外用消毒剂使用时带来的安全风险.方法 采用GC法,DB-624色谱柱(30 m ×0.53 mm,3.0 μm),检测器为FID检测器,检测器温度250℃,进样口温度250℃,以氮气为载气,流速2 mL·min-1,分流比5∶1,程序升温,进样量1 μL.结果 GC法能有效分离苯、甲醇、乙醇、内酮、仲丁醇、正丙醇、异丙醚等;0.008‰～0.2‰苯限度浓度与峰面积呈良好的线性关系;0.04％o～0.1％o甲醇、乙醇、丙酮、仲丁醇、正丙醇、异丙醚等限度浓度与峰面积均呈良好的线性关系;r均大于0.991,平均回收率均为85.9％～106.6％.检测结果反映:药用辅料级别异丙醇中挥发性杂质的控制情况良好,部分批次检出甲醇残留,但远低于《美国药典》异丙醇正文中的规定限度;分析纯异丙醇中挥发性杂质的控制情况较差,部分批次检出苯,但残留量均未超过0.002‰;乙醇的检出率为85％,但药用辅料级别异丙醇中的残留量均未超过0.05‰,安全风险较低.结论 GC法能准确定量异丙醇中苯、甲醇、乙醇、丙酮、仲丁醇、正丙醇、异丙醚等挥发性杂质的残留.
目的 研究黄精芡实改良方对小鼠消化酶和氧化应激指标的影响.方法 采用酒醋大黄法制备脾虚模型,以体重、体力性疲劳、血清消化酶、抗氧化酶、免疫器官指数等指标,观察改良黄精芡实方(高、中、低剂量分别为1、2、3 g·kg-1)对改善小鼠消化和抗氧化应激的作用.结果 黄精芡实改良方各剂量均可增加脾虚小鼠的体重,延长转棒及游泳的时间,增加血清消化酶和抗氧化酶的含量及免疫器官指数,黄精芡实改良方高、中剂量的作用效果显著.结论 黄精芡实改良方对脾虚小鼠的消化酶和氧化应激具有明显的改善效果.
目的 研究东革阿里改善高尿酸血症的物质基础及作用机制.方法 采用体外酶实验,考察东革阿里不同溶剂提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用;利用HPLC表征不同溶剂提取物中化学成分的区别;通过网络药理学和分子对接技术预测东革阿里改善高尿酸血症的可能作用机制.结果 东革阿里75％乙醇提取物较水提取物有更好的黄嘌呤氧化酶抑制作用;乙醇提取物中的化学成分以宽缨酮为主,含量为130.4μg·mL-1,而水提取物中宽缨酮含量8μg·mL-1;宽缨酮具有较好的黄嘌呤氧化酶抑制作用,分子对接能量为-5.57 kcal·mol-1;网络药理学发现:活化T细胞核因子5(NFAT5)和胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)是宽缨酮、高尿酸血症和炎症三者间的共同靶点,且宽缨酮与两者间对接良好,具有较低的对接能量(-2.88、-4.01 kcal·mol-1).结论 东革阿里改善高尿酸血症的物质基础与宽缨酮及其类似物有关,其作用机制可能与抑制黄嘌呤氧化酶的活性及与炎症通路的NFAT5和IGF1R两个靶点蛋白有关.
目的 采用GC-MS和网络药理学法研究西藏灌木亚菊Ajania fruticulosa(Ledeb.)Poljak.挥发油抗炎的有效成分和作用机制.方法 通过GC-MS技术和中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选灌木亚菊挥发油的活性成分及相关靶点;利用GeneCards、DisGeNET数据库检索炎症相关靶点,利用韦恩图获取共有靶点,并将信息导入Cyto-scape 3.9.1软件和STRING在线分子平台,通过网络拓扑学分析,构建挥发油有效成分-炎症-交集靶点;基于关键靶点利用DAVID数据库进行KEGG通路富集分析.结果 结合气质分析和数据库筛选,得到灌木亚菊挥发油的关键成分9个,药物靶点165个,疾病靶点2759个,交集靶点105个.经蛋白互作网络拓扑分析,获取核心靶点10个,分别为EGFR、MAPK8、JAK1、RXRA、JAK2、JAK3、CASR、MAPK14、ESR1、PRKCD 等;挥发油有效成分4 个,包括cis-橙花叔醇、τ-依兰油醇、τ-毕橙茄醇、α-红没药醇等.KEGG富集基因通路29条,TRP通路、神经活性配体-受体相互作用通路及PPAR信号通路可能是灌木亚菊挥发油发挥抗炎作用的主要通路.结论 初步探讨了西藏灌木亚菊挥发油治疗炎症的有效成分和作用机制,表明灌木亚菊挥发性成分具多成分、多靶点抗炎的特点,提示灌木亚菊有作为天然抗炎剂的潜力.
目的 从中药射干中分离制备野鸢尾苷单体,并初步研其体外抗炎活性及作用机制.方法 采用多溶剂萃取法制备野鸢尾苷;在野鸢尾苷溶液对小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7无细胞毒性的浓度范围内,采用脂多糖诱导并建立体外细胞炎症模型,给予不同浓度野鸢尾苷溶液干预,采用Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量、ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量;并结合野鸢尾苷对乙酰胆碱酯酶活性的影响,初步揭示野鸢尾苷的抗炎活性及作用机制.结果 多溶剂萃取法所得的野鸢尾苷单体,经HPLC峰面积归一化法计算其纯度大于98％;给药12.5-100 μg·mL-1野鸢尾苷对RAW 264.7无细胞毒性;与模型组比较,在给药12.5～100 μg·mL-1野鸢尾苷时,对抑制巨噬细胞中TNF-α、NO、IL-1β、IL-6的释放具有极显著性差异,且呈剂量关系;野鸢尾苷对乙酰胆碱酯酶的活性具有抑制作用,其数半抑制浓度(IC50)为4.09 mg·mL-1,且呈剂量关系.结论 多溶剂萃取法是一种简单、高效分离制备射干中野鸢尾苷的方法;野鸢尾苷的抗炎机制可能是通过胆碱能抗炎通路,调节巨噬细胞释放TNF-α、IL-1β、IL-6炎性介质,并结合调节NO抗炎途径,从而实现多途径的抗炎作用.
目的 研究哈巴苷和乙酰哈巴苷改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及机制.方法 WB法检测哈巴苷和乙酰哈巴苷对PC12损伤细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、核因子(NF)-κB、白细胞介素(IL)-1β蛋白含量的变化.将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、哈巴苷组(2 mg·kg-1)和乙酰哈巴苷组(2 mg·kg-1),每组6只.采用脑中动脉阻断法造模,评价神经功能评分、脑梗死体积、含水量,HE染色、Nissl染色、TUNEL染色、免疫荧光染色检测大鼠脑组织NLRP3、人半胱氨酸蛋白酶(caspase)-1、IL-1β、NF-κB蛋白表达的水平.结果 哈巴苷和乙酰哈巴苷极显著降低了 PC12损伤细胞中NLRP3、IL-1β、NF-κB蛋白的表达量.与模型组比较,两组给药后降低了神经功能评分、脑梗死体积及脑含水量,组织间隙减轻,尼氏体数目增加,神经元凋亡减少,NLRP3、caspese-1、IL-1β、NF-κB蛋白红色荧光减弱.结论 哈巴苷和乙酰哈巴苷可通过抑制NF-κB/NLRP3信号通路,改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡、减少脑梗死体积、抑制炎症反应、缓解脑缺血再灌注引起的脑损伤.
目的 改造非洲爪蟾分泌的抗菌肽PGLa-H的结构,增强其血清稳定性与生物活性.方法 以天然抗菌肽PGLa-H为模板,将该多肽序列中的L-丙氨酸以非天然的氨基异丁酸(Aib)进行部分取代.利用固相多肽合成技术合成多肽;评价多肽在血清中的稳定性;测定多肽对4种不同细菌菌株的抗菌活性,通过肉汤稀释法判断最小抑菌浓度;评价不同盐离子存在对多肽抗菌活性的影响;评价多肽的溶血活性与细胞毒性.结果 通过Aib取代,得到PGLa-H(Aib),减少了血清中蛋白酶对多肽的降解,并提高了多肽对4种不同细菌的抗菌活性,无明显的溶血活性与细胞毒性.结论 Aib取代能增强多肽的血清稳定性和生物活性,且具有良好的生物相容性.
目的 研究大麻二酚能否缓解经典阿片类药物芬太尼引起的不良反应.方法 通过肠道推进实验,评价sc给予芬太尼、ip给予大麻二酚后对小鼠胃肠道转运能力的影响;通过全身体积描记实验,评价sc给予芬太尼、ip给予大麻二酚后对小鼠呼吸频率的影响;通过慢性炎症痛急性耐受实验,评价重复3次sc给予芬太尼、ip给予大麻二酚后对小鼠左侧后肢机械痛阈值的影响.结果 5 mg·kg-1大麻二酚对芬太尼致便秘无缓解作用,但给予10、20、40 mg·kg-1大麻二酚后,小鼠胃肠道的转运能力明显提高,芬太尼致便秘得到缓解,且10 mg·kg-1大麻二酚能缓解0.25、0.375 mg·kg-1芬太尼引起的便秘;10 mg·kg-1大麻二酚能明显降低0.25 mg·kg-1芬太尼重复给药引起的耐受;10 mg·kg-1大麻二酚能恢复由0.375 mg·kg-1芬太尼致小鼠呼吸频率下降,芬太尼致呼吸抑制得到明显改善.结论 大麻二酚能明显缓解芬太尼致小鼠便秘、耐受及呼吸抑制等不良反应.
抗体偶联药物是由靶向肿瘤特异性抗原或肿瘤相关抗原的单克隆抗体与特定数目的小分子细胞毒素,通过连接子偶联而成,具有高特异性、高效性和低系统毒性的特点.现从抗体偶联药物的组成、研发历程、作用机制及相关的临床应用等方面系统总结其最新的研究进展.
目的 HPLC法测定母蒂尼阿丸水提取液中没食子酸、沉香四醇、羟基红花黄色素A的含量.方法 采用安捷伦C18色谱柱(250 mm x4.6 mm,5μm),没食子酸用流动相为0.05％磷酸溶液-乙腈(93:7),进样量2 μL;沉香四醇用流动相为0.1％乙酸溶液-乙腈(77:23～67:33),进样量2 μL;羟基红花黄色素A用流动相为0.7％磷酸溶液-乙腈-甲醇(80:4:16),进样量5μL.结果 没食子酸、沉香四醇、羟基红花黄色素A的线性范围分别为0.0856～4.0、0.0127～0.4060、3.5 ×10-3～0.227 mg·mL-1,r2 均为 0.9999;平均回收率分别为 83.9％、87.2％、85.7％,平均含量分别为1.590％、0.036％、0.0276％,RSD分别为3.90％、2.10％、3.40％.结论 所用方法简便、准确、可靠、重复性良好,可为母蒂尼阿丸的质量控制提供基础.
目的 研究熊果酸/PF127/TPGS-多柔比星(UPTD)纳米胶束的体外抗肿瘤作用及其在大鼠体内的药动学.方法 采用MTT法检测纳米胶束对耐药肿瘤细胞增殖的影响;采用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒,用流式细胞仪检测纳米胶束诱导耐药肿瘤细胞凋亡的作用;采用PI单染流式细胞术检测纳米胶束对细胞周期的阻滞.经大鼠尾静脉单次注射纳米胶束,采用HPLC法测定血药浓度,用DAS 2.0软件、SPSS 17.0软件对药动学参数进行处理及统计学分析.结果 各组药物均能抑制耐药肿瘤细胞的正常生长,凋亡率呈浓度依赖性,纳米胶束组的凋亡率高于游离组药物;PI单染流式细胞术检测到纳米胶束作用于HepG-2/ADR细胞48 h后,明显阻滞G0/G1期及G2/M期;在相同给药剂量下,熊果酸+多柔比星乳剂组和纳米胶束组的药动学参数均存在显著差异,且两药在纳米胶束组中的药时曲线下面积均显著增加,纳米胶束组比注射乳组的平均滞留时间显著延长,且纳米胶束组中熊果酸和多柔比星的体内清除率比注射乳组分别减小了约2.5、1.5倍.结论 熊果酸和多柔比星联用,并制成UPTD纳米胶束后,其抗肿瘤效果明显优于游离多柔比星和熊果酸,且也强于游离多柔比星+熊果酸,具有较好促进肿瘤细胞凋亡的作用.在制成纳米胶束后可降低熊果酸与多柔比星在体内的清除率,延长药物在体内的时间.
目的 研究琥珀酸普芦卡必利在酸、碱、氧化、光照等条件下强制破坏产生的降解杂质结构和来源.方法 在各条件下强制破坏琥珀酸普芦卡必利,得到降解产物;采用Kromasil C18色谱柱(150 mm×3 mm,5 μm),以磷酸盐缓冲液-乙腈-甲醇(90∶5∶5)为流动相A,甲醇-乙腈(1∶1)为流动相B,梯度洗脱,分离得到有关物质.利用MS研究主要降解杂质的结构,归属杂质来源,推测形成路径.结果 推测降解产物为4-氨基-5-氯-N-[1-(3-甲氧基丙基)-4-哌啶基]-7-苯并呋喃甲酰胺、4-氨基-5-氯-2,3-二氢-N-[1-氧-1-(3-甲氧基丙基)-4-哌啶基]-7-苯并呋喃甲酰胺、2-羟基-4-氨基-5-氯-2,3-二氢-N-[1-(3-甲氧基丙基)-4-哌啶基]-7-苯并呋喃甲酰胺、4-氨基-2,3-二氢-N-[1-(3-甲氧基丙基)-4-哌啶基]-7-苯并呋喃甲酰胺.结论 成功推测了琥珀酸普芦卡必利强制碱、氧化、光降解产物的结构,并阐明其产生途径,可为琥珀酸普芦卡必利的稳定性研究及质量控制提供依据.
