风邪为六淫之首,百病之长,是中医病因病机学说的重要内容.《黄帝内经》一书中多处论及外风致病,《伤寒杂病论》中也有许多与外风相关的论述.唐宋之后医家又发"内风"致病之说.近年来,在肾脏病临床上有关"伏风"的论述受到诸家重视,从而使风邪致病理论日趋完善.在肾脏病的发生、发展、预后和转归中,风邪发挥着极其重要的作用,从风论治已成为中医治疗肾脏病的重要方法.所以本期肾海探骊论坛特邀国内肾病领域的中医、中西医结合专家周静威、孙万森、郭立中、陈洪宇、刘伟敬和刘玉宁教授就风邪的概念、致病特点、在肾脏病临床上所表现的特点和治疗方法进行探讨.本次论坛由刘玉宁教授主持.

目的:探讨积雪草苷对阿霉素诱导的足细胞中α-actinin-4、synaptopodin蛋白及ERK/JNK通路的影响.方法:1)MTT法检测积雪草苷对足细胞及阿霉素诱导的足细胞活力的影响.2)选用1μmol/L阿霉素制造足细胞损伤模型,蛋白印迹法(Western blotting)检测足细胞α-actinin-4、synaptopodin蛋白表达.3)免疫荧光检测足细胞骨架及Western blotting检测ERK/JNK信号通路的磷酸化水平.结果:1)低浓度积雪草苷(10～80μg/mL)对足细胞活力无明显影响,而高浓度积雪草苷(>80μg/mL)可降低足细胞活力;2)阿霉素体外可损伤足细胞,降低足细胞活力;积雪草苷浓度依赖性地减轻阿霉素对足细胞的损伤,增加足细胞活力;阿霉素体外可增加足细胞骨架蛋白α-actinin-4的表达,减少足细胞骨架蛋白synaptopodin的表达,而积雪草苷可下调阿霉素诱导的足细胞α-actinin-4蛋白表达,上调阿霉素抑制的足细胞synaptopodin的表达;3)阿霉素(1μmol/L)能升高ERK、JNK的磷酸化水平,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);积雪草苷预处理细胞后,能够有效遏制阿霉素诱导的ERK活化,与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),但却不能抑制阿霉素诱导的JNK信号通路中JNK的活化.结论:积雪草苷预处理细胞后可能通过遏制阿霉素诱导的ERK信号通路的活化,减少阿霉素对足细胞骨架的损伤作用,从而改变了α-actinin-4、synaptopodin蛋白表达.

目的:观察祛风通络方对单侧输尿管梗阻大鼠肺肾组织水通道蛋白(aquaporin-4,AQP4)表达的影响,探讨机体水液代谢功能的分子基础.方法:建立单侧输尿管梗阻大鼠模型,给予大、小剂量祛风通络方干预20天,采用免疫组织化学法、RT-PCR及Western blot方法检测AQP4在肺、肾组织的分布及表达情况.结果:模型组大鼠AQP4表达降低,祛风通络方干预组AQP4表达均升高,大剂量组升高较明显.结论:AQP4是肺、肾参与水液代谢的分子基础之一,祛风通络方有上调AQP4的作用.

Anticancer drug like Cisplatin are associated with serious problem like nephrotoxicity. The effect of Kaempferol is a plant-derived flavonoid compound. The present work evaluated the effect of Kaempferol in mouse model of Cisplatin mediated nephrotoxicity also the involved mechanism. Oxidative stress, kidney function, histology, inflammation, apoptosis, level of proteins, Nrf2 translocation and its effect on cascades such as NF-κB and ERK were studied. It was observed that the pre-treatment of KPF reduced the Cisplatin mediated oxidative stress, inflammation, apoptosis and ameliorated renal injury and its functioning. Kaempferol suppressed the Cisplatin induced infiltration of mononuclear cells, levels of TNF-α, iNOS, IL-12, activation of NF-κB, phosphorylation of IκBα and nuclear translocation of p65 in renal tissues. Also KPF attenuated Cisplatin mediated phosphorylation of p38, ERK1/2 and JNK in renal tissues. KPF also corrected the levels of renal antioxidants and elevated the nuclear levels of HO-1 and Nrf2 in renal tissues. KPF attenuated the Cisplatin mediated apoptosis via down-regulating the levels of TP53, Bax/Bcl2 imbalance, activating caspase-3/9 and PARP. The outcomes conclude that KPF ameliorates Cisplatin-mediated nephrotoxicity by modulating oxidative stress, inflammation and apoptosis via ERK and NF-κB pathway.

作为指导中药临床应用的核心,四性理论在中药的临床应用和医疗实践中发挥了巨大的作用.四性主要指中药的寒、热、温和凉四种属性,温与热、寒与凉是本质相同、程度有别的同一药性属性,寒热二性可作为中药的首要药性.中药在治疗疾病的时候其“寒热”二性是否也参与药效的发挥?机体是否存在有感受药性“寒热”之基因或蛋白群?结合近现代对于中药药性理论及温度相关性瞬时受体电位的研究,发现中药寒热药性与温度相关性瞬时受体电位密切相关,温度相关性瞬时受体电位有可能成为中药药性理论研究的突破口.

目的:通过观察祛风通络方及寒热加味方对UUO模型大鼠肾组织TRPV4表达及功能状态的影响,探索不同药性祛风通络方对TRPV4的调节作用及其对肾间质纤维化的防治机理.方法:挑选SD雄性成年大鼠80只,随机分为空白对照组和模型组,单侧输尿管结扎法建立UUO模型,分为模型对照组、温热大剂量组、温热小剂量组、寒凉大剂量组、寒凉小剂量组、祛风大剂量组、祛风小剂量组,进行药物干预.术后第21天将大鼠全部处死,取术侧肾脏组织,一半用作病理学染色,一半用于分子生物学检测.RT-PCR和Western法检测肾脏组织TRPV4、α-SMA、vimentin mRNA含量变化及蛋白表达情况.结果:(1)造模成功后21 d,模型组及干预组大鼠术侧肾脏体积较对侧增大,剖面肾实质不同程度萎缩,肾盂扩张呈囊状,模型组最为明显.(2)干预各组病理情况均不同程度改善,其中温热小剂量组改善最为明显.(3)温热大剂量组TRPV4 mRNA含量明显增加(P<0.01),其余各组均表现不同程度下降.(4)治疗各组α-SMA mRNA含量均表现不同程度下降(P<0.05),以温热小剂量组下降最为显著(P<0.01),各组Vimentin的表达表现出与α-SMA同样的变化趋势.结论:(1)TRPV4可能通过基因或蛋白水平的上调(下调)感受药性之寒热.(2)祛风通络方及加味方可能延缓肾间质纤维化的进展,且温热小剂量治疗效果最好.

中药通过对机体物质代谢的调节以纠正人体的阴阳盛衰、寒热变化.能量代谢是人体物质代谢的最基本形式.机体的一切生命活动依赖于能量.因此,机体能量代谢变化规律与药物研究密切相关,中药通过影响能量代谢的某些环节,实现对机体异常能量代谢的调节.本文通过对前期研究成果的总结与分析,重点阐述了中药对机体能量代谢过程中线粒体酶、线粒体膜电位及游离钙离子浓度的影响、生物体中能量代谢物质含量变化等几个方面,并且提出了一些思考,以寻求更好的传统中药研究途径.

目的:观察不同剂量祛风通络方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠胃、肾组织水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)表达的影响.方法:单侧输尿管结扎建立肾病大鼠模型,实验大鼠分空白对照组、UUO模型组、祛风通络方大、中、小剂量组和缬沙坦组.采用Masson三色染色法,观察UUO大鼠肾间质纤维化的程度,免疫组织化学法、免疫荧光技术及RT-PCR法检测AQP4在UUO大鼠胃、肾组织的分布及表达情况.结果:与空白组相比,模型组AQP4表达明显降低(P＜0.01);与模型组相比,祛风通络方组与缬沙坦组AQP4表达均有显著升高(P＜0.01),且祛风通络方大剂量组升高最为明显(P＜0.05).结论:祛风通络方可以通过上调胃、肾组织AQP4的表达,调节水液代谢,从而达到防治慢性肾脏病的目的.

目的:观察祛风通络方对单侧输尿管结扎术(unilateral urethral occlusion,UUO)大鼠肾间质纤维化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、波形蛋白(vimentin)的影响.方法:50只雄性成年SD大鼠随机分为假手术组10只和UUO组40只,其中UUO组根据干预方法不同随机平均分为模型组、阳性对照组、祛风通络方高剂量组、祛风通络方低剂量组.术后第1天开始灌胃相应药物,术后第21天将大鼠全部处死,取术侧肾脏组织,Masson染色观察肾间质纤维化程度,RT-PCR和Western blotting检测肾脏组织α-SMA、vimentin mRNA水平及蛋白表达.结果:①UUO后21d,模型组及治疗各组大鼠梗阻侧肾体积较对侧增大,剖面肾实质不同程度萎缩,肾盂扩张呈囊状,模型组最为明显.②模型组大鼠近端肾小管上皮细胞萎缩,集合管和远曲小管管腔明显扩张,周围大量炎性细胞浸润伴间质胶原成分显著增加、纤维组织增生,肾小球有硬化或数目减少,各干预组上述病理情况均不同程度改善,其中祛风通络方高剂量组改善最为明显.③与假手术组比较,各组大鼠肾组织α-SMA、vimentin mRNA及蛋白表达均明显升高(P＜0.05),以模型组升高最为显著(P＜0.01);与模型组比较,各治疗组α-SMA、vimentin mRNA及蛋白表达均不同程度下降(P＜0.05),以祛风通络方高剂量组下降最为显著(P＜0.01),且祛风通络方高剂量组与祛风通络方低剂量组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论:大剂量祛风通络方可显著改善肾纤维化病理、下调肾纤维化相关蛋白α-SMA、vimentin的表达.

目的:研究祛风通络方对阿霉素肾病(AN)大鼠肾小球超微结构变化及肾小球足细胞上相关蛋白CD2 associated protein(CD2AP)和整合素α3β1表达的影响,探讨祛风通络方治疗肾小球病的作用及机理.方法:60只雄性清洁级SD健康大鼠随机分为空白对照组和模型组,采用一次性尾静脉注射阿霉素的方法,建立大鼠AN模型,造模成功后再将模型动物随机分为模型组、 祛风通络组和激素组,分别给予祛风通络方和强的松干预.透射电镜观察足细胞超微结构,免疫组化染色检测大鼠肾脏CD2AP和整合素α3β1蛋白表达,并分析CD2AP和整合素α3β1与足细胞超微结构关系.结果:造模成功时较空白对照组,模型组大鼠超微结构显示:增宽、 收缩、 甚至消失.干预结束时与模型组相比较:⑴各干预组超微结构病变均有不同程度改善,足突结构较模型组清晰;⑵祛风通络组和激素组CD2AP和整合素α3β1蛋白表达明显上调(P<0.01),两者之间未见明显差异.结论:⑴AN大鼠肾小球足细胞结构与功能均发生了改变,表现为足突融合甚至消失,肾小球足细胞相关蛋白CD2AP和整合素α3β1蛋白表达下降.⑵祛风通络方通过修复足细胞超微结构,有效改善足细胞上CD2AP和整合素α3β1蛋白表达,从而达到保护肾小球足细胞分子屏障及治疗肾小球病的作用.

目的 分析血府逐瘀汤辅治气滞血瘀型心绞痛的疗效.方法 选取2015年3月—2017年3月间在我院治疗的气滞血瘀型心绞痛患者120例,常规给予硝酸酯类、血管紧张素转化酶抑制剂、β受体阻滞剂等西药,在此基础上给予血府逐瘀汤治疗,连续治疗8周观察临床疗效.结果 120例患者显效39例,好转67例,无效14例,总有效率为88.3％,用药治疗后心绞痛发作频率、持续时间均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01).用药期间患者均未见明显毒副反应.结论 血府逐瘀汤辅治气滞血瘀型心绞痛临床效果确切,安全可靠.

AIM To evaluate anti-gastric cancer effects and benefits of the combination therapy of celastrol and curcumin in vitro and in vivo.METHODS Curcumin,celastrol and curcumin + celastrol applied to BGC823 gastric cancer cells had their impact on the cells growth and apoptosis in vitro checked by CCK-8 assay and flow cytometry of AnnexinV-FITC/PI;and their in vivo anti-tumor effect,systemic toxicity,and influence to the survival time evaluated by using BGC823-bearing gastric tumor mouse models induced by subcutaneous implantation.RESULTS IC50 of curcumin,celastrol and curcumin + celastrol on BGC823 cell were found to be at (57.47 ± 5.22),(2.11 ±0.07) and (0.22 ±0.01) μmol/L,respectively.Curcumin + celastrol achieved a most optimal BGC823 cell apoptosis rate of (73.07 ±3.82)％ at concentrations of (10 mol/L +2 mol/L);and they left a positive impact on the BGC823 gastric tumor-bearing mice,given a (64.87 ±4.16)％ inhibitory rate,and a 50.5-day median survival time.Additionally,the combination therapy demonstrated its less side effects in terms of the body weight,spleen and liver of the nude mice,and significantly improved serum concentrations of TNF-α and IL-6.CONCLUSION Combination of curcumin and celastrol shows significantly synergistic anti-gastric cancer effects in vitro and in vivo.

西医院校中的中医教学本来就存在很多难点,内容庞杂、不易记忆、教学课时少等问题.并且西医院校中对中医学习考察方法陈旧,标准模糊,后续教育落后.本文对西医院校的中医学习现状进行分析,探讨中医课程考察的新模式及方法,以期为提高西医院校的中医诊断教学质量提供一些方法.

以太阳寒水之气本寒标热之特点,分析《伤寒论》“少腹证”诸条文.少腹证有寒热之分,少腹证寒者乃由太阳寒水之气本寒所致;少腹证热者乃由太阳寒水之气标热所致.少腹证有太阳本寒与水结,太阳标热与水结、与血结、与虚结之分.少腹满伴小便不利为寒水之结,少腹硬、少腹硬满、少腹急结伴小便利为血热之结,少腹里急为虚热之结.寒水之结用温阳散寒之法治疗;血热之结用逐瘀清热之法治疗.少腹诸证可见“如狂”等精神不安症状.少腹诸症多与足太阳膀胱经、足厥阴肝经有关,涉及疾病男为前列腺、睾丸诸疾患,女则为盆腔、会阴诸疾患.男女下焦诸疾患伴小便不利则为寒,治宜温经散寒或通阳化气;伴小便利甚或有多语等等如狂之表现,治可用逐瘀清热之剂.

Objective To explore the effects of Fuzi and Huanglian on podocyte proliferation and the expression of TRPV4 and TRPC6 proteins in vitro.Methods ①MTT method was used to detect the podocyte proliferation.The experiment was divided into blank control group,Fuzi group and Huanglian group.Different concentrations of Fuzi and Huanglian were used to treat the podocytes.The absorbance value(A) was measured,and the inhibition rate of cells was calculated.②The experiment was divided into blank control group,Fuzi(200 μg/ml) group and Huanglian(800 μg/ml) group.The podocytes were given liquid medicine,and then cultured with RPMI 1640 medium for 24 h to detect the expression of TRPV4 and TRPC6 protein by Western blot.Results MTT results showed that 50,100,200,400 and 800 μg/ml Huanglian inhibited the growth and proliferation of podocyte in a concentration-dependent manner.The relatively low concentration of Fuzi (＜200 μg/ml) promoted the growth and proliferation of podocytes,while the relatively high concentration(＞ 200 μg/ml) inhibited the growth and proliferation of podocytes.The results showed that the expression of TRPV4 protein in Fuzi group and Huanglian group were significantly increased compared with blank control group (P ＜ 0.05),while the expression of TRPC6 protein in Fuzi and Huanglian group were decreased (P ＜ 0.05).Conclusion The traditional Chinese medicine Fuzi and Huanglian all have the influence on the expression of TRPV4 and TRPC6 in kidney disease.

西医院校中的中医教学本来就存在很多难点,而其中中医诊断学教学尤为突出.中医诊断学是中医课程中承上启下的部分,它既可以帮助学生们更好的理解中医基础知识,又为后期学习的辨证、中药、方剂打下了基础.但存在内容庞杂、不易记忆、教学课时少等问题.现从中医诊断学的教学内容现状、教学手段以及教学方法等方面提出了改进措施,以期为提高西医院校的中医诊断教学质量提供一些方法.

近年来研究认为,慢性肾功能衰竭病机之一为脾肾阳虚、浊毒瘀阻,临床运用温阳泄浊法治疗该病取得了良好效果.且内服中药与灌肠法相结合,对临床治疗效果的提高具有重要价值.现代药理学研究表明温阳泄浊法代表药物附子、大黄具有降低肌酐及尿素氮作用,能够抑制肾小球系膜细胞及肾小管上皮细胞增生,具有纠正脂质代谢等作用.温阳泄浊法对于临床治疗慢性肾衰竭具有重要价值.

在西医院校中，绝大部分的教学内容是西医课程，中医课程对于学生来说既不重视，也常常因为课程短暂，没有引起足够的学习兴趣，最终不能很好地通过学习掌握中医基本的思想理论及诊疗思路。本文通过对中医教学方法改进的探讨，希望寻找一条合适的、有效的教学方法，以增加西医院校中中医课程对学生的吸引力，培养学生的兴趣。

目的 研究祛风通络方对阿霉素模型大鼠肾小球内皮细胞VEGF及其受体FLK-1表达的影响.方法 130只SD大鼠抽出30只作为空白对照组(A组),余下大鼠采用阿霉素给予尾静脉一次性注射构建大鼠肾病模型,造模成功后,随机分为模型组(B组,n=18)、祛风通络方组(C组,n=18),祛激组(祛风通络方和激素共用组,D组,n=18),激素组(E组,n=18),苯那普利组(F组,n=18),构建肾小球内皮细胞阿霉素模型,给予相应大鼠血清治疗,邻苯三酚红/钼酸盐法检测24h尿蛋白定量;全自动生化分析仪检测血清白蛋白(ALB)、血脂(TG)、肾功能BUN、Cr;Western Bloting及RT-PCR检测肾小球内皮细胞VEGF及其受体FLK-1的表达.结果 C、E组能升高大鼠血清ALB的含量,降低血清TCH的含量,与B组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);肾小球内皮细胞经阿霉素损伤后,B组较A组VEGF、FLK-1蛋白及mRNA的表达均升高,差异有统计学意义(P＜0.01),各组加入相应血清冻干粉后,C、E组VEGF、FLK-1蛋白表达均下调,与B组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 祛风通络方能够下调肾小球内皮细胞VEGF及其受体FLK-1的表达,改善阿霉素大鼠肾病模型的肾功能.