目的:观察瓜子金皂苷己(Polygalasaponin F,PGSF)是否影响氧糖剥夺/复氧(Oxygen and glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)处理的BV-2小胶质细胞炎性细胞因子及细胞因子信号抑制因子3(Suppressors of cytokine signaling3,SOCS3)表达,初步探讨PGSF对抗OGD/R炎症反应的机制.方法:构建BV-2小胶质细胞OGD/R体外模型,分为正常对照组、模型组、PGSF低剂量组、PGSF中剂量组及PGSF高剂量组.BV-2细胞氧糖剥夺2 h、复糖复氧6 h后提取总RNA,通过实时荧光定量多聚酶链式反应检测BV-2细胞炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及SOCS3的基因表达.结果:I/R后BV-2细胞中炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及SOCS3的mRNA表达明显增加;给予PGSF处理可以逆转上述观察指标的改变.结论:PGSF在体外实验中具有抑制神经炎症的作用,SOCS3信号通路可能参与介导了PGSF的抗炎作用.

黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone lymphoma of mucos-associated lymphoid tissue B cell lymphoma,简称MALT,是一种惰性的非霍奇金B细胞淋巴瘤,好发于胃肠、眼附属器、甲状腺、腮腺及肺脏等部位[1,2],在唇部比较少见,近期,我院收治1例唇部MALT患者,将病例报告如下.

目的 探讨乳腺癌中SIRT5的表达及其与PKM2及HK2相关性及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测130例乳腺癌组织及癌旁正常组织中SIRT5、PKM2及HK2的表达,应用RT-PCR法检测60例乳腺癌组织及癌旁正常组织SIRT5、PKM2及HK2的基因表达,分析SIRT5表达与乳腺癌临床病理特征的关系.结果 乳腺癌组织中SIRT5、PKM2及HK2的平均光密度值均显著高于癌旁正常组织(5824.4±163.1 vs 2629.9±132.3、5980.3±232.2 vs 2164.9±121.3、6005.1±197.5 vs 2196.7±155.4,P<0.01),乳腺癌组织SIRT5、PKM2及HK2 mRNA的表达均高于癌旁正常组织(P<0.01).乳腺癌组织中SIRT5与PKM2、HK2蛋白间呈正相关(r=0.647、r=0.600,P<0.01).SIRT5阳性率与患者年龄、淋巴结转移、TNM分期、ER及PR表达差异无统计学意义(P=0.859,P=0.248,P=0.986,P=0.489,P=0.882);与肿瘤大小、组织学分级及HER-2表达差异有统计学意义(P=0.003,P=0.001,P=0.037).结论 SIRT5的过表达对判断乳腺癌的发生、发展及预后具有一定价值,并为SIRT5可能通过有氧糖酵解影响乳腺癌的发生、发展奠定基础.

大学阶段教育不同于基础教育,大学生具有学习能力强、专业性强、个别性强、实践性强等特点,因此有必要在大学教学过程中充分发挥学生上述特点,调动学生学习的主动性,提高学生自主学习的能力,包括发现问题、提出问题、分析问题、解决问题等能力,以利于创新性人才的培养.课程整合有利于提高学生的知识综合应用能力,PBL教学模式可以促进学生自主学习能力的培养,本研究根据目前医学生病理学学习现状,从自主学习的时代性与重要性出发,利用现有资源,进行病理学与组织学整合、PBL微课模式实验教学平台资源准备及构建,面向我校临床医学专业学生实施应用,在教学过程中促进学生自主学习能力的培养,提高课堂教学效果.

目的 探讨Sirtuin5(SIRT5)对高糖环境下Lovo细胞增殖、凋亡及迁移的影响及可能机制.方法 高糖培养基(葡萄糖含量4500 mg/L)及普通培养基(葡萄糖含量2000 mg/L)培养SIRT5高表达的人结肠癌Lovo细胞,进行慢病毒转染实验,高糖培养基及普通培养基各分为空白对照组(MOCK组,无干预)、阴性对照组(NC组,对照RNAi慢病毒转染)和SIRT5-RNAi组(KD组,SIRT5-RNAi慢病毒转染),用MTT法检测各组细胞1～5 d增殖能力变化,AnnexinⅤ检测各组细胞凋亡率,划痕实验法检测各组细胞迁移率;应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞SIRT5、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)及己糖激酶-2(HK2)mRNA的表达变化,Western blot检测各组上述指标的蛋白表达水平.结果 高糖培养基中,KD组与NC组、MOCK组比较,3～5 d时增殖水平降低,凋亡率增加,而24 h迁移率降低(P<0.05),且SIRT5、mTOR、HIF-1α、PKM2及HK2 mRNA及蛋白的相对表达水平均明显降低(P<0.05).普通培养基中,KD组与NC及MOCK组比较,1～4 d时增殖水平差异无统计学意义,5 d时增殖水平降低(P<0.05),24 h凋亡率差异无统计学意义.结论 高糖环境下,SIRT5可能通过影响糖代谢关键酶HK2及mTOR/HIF-1α/PKM2信号通路调控糖酵解,从而促进结肠癌的发生、发展.

目的 探讨RHBDD1和EGFR在三阴型乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)发生、转移中的作用及其临床意义.方法 选取30例TNBC(ER、PR、HER2均阴性)和30例非三阴型乳腺癌(non triple negative breast cancer,NTNBC)(ER、PR、HER2至少一项阳性)患者作为研究对象,采用免疫组化、酶联免疫法和qRT-PCR技术检测组织和血清中RHBDD1和EGFRmRNA含量及蛋白表达.结果 TNBC组织中RHBDD1和EGFR蛋白阳性率(83％、80％)高于NTNBC组织(67％、37％),差异均有统计学意义(P＜0.05);TNBC患者血清中RHBDD1和EGFR的浓度含量亦明显高于NTNBC患者,差异均有统计学意义(P ＜0.05);TNBC组织中的RHBDD1 mRNA和EGFR mRNA含量分别是癌旁组织的3.68倍和4.56倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).RHBDD1和EGFR的表达与TNBC患者年龄无关,与临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移以及远处转移呈正相关.TNBC中RHBDD1和EGFR的表达呈正相关(r-3.723).结论 RHBDD1和EGFR在TNBC中高表达,尤其是淋巴结转移和远处转移组中显著高表达,提示其在TNBC发生和转移中扮演重要的作用,可作为TNBC的分子靶点,为临床治疗提供理论依据.

利用基础医学虚拟仿真实验教学平台,建立以能力培养为主线的模块化、层次化实验课程体系,推进实验内容和实验模式改革,实行多元化评价考核机制,形成理论学习-虚拟实验-实体操作为一体的新型教学模式,推进了现代教育技术与课堂教学的深度融合,提高了基础医学实验课程教学质量和人才培养质量.

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/髓样分化蛋白88(MyD88)与早期自然流产的相关性.方法:选择30例正常妊娠妇女作为对照组,采用免疫组织化学显色对30例早期自然流产患者(流产组)母-胎界面的蜕膜和绒毛组织中TLR4、MyD88蛋白表达进行定位观察,采用RT-PCR技术对其TLR4和MyD88 mRNA表达进行半定量分析.结果:TLR4和MyD88蛋白在流产组和对照组的绒毛及蜕膜组织中均有表达,定位表达于绒毛滋养层细胞、蜕膜细胞的细胞质内,阳性反应强弱不等.RT-PCR半定量分析结果显示,在绒毛组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组;在蜕膜组织中,流产组TLR4 mRNA、MyD88 mRNA的表达显著高于对照组.流产组绒毛和蜕膜组织中TLR4与MyD88的表达均呈正相关.结论:TLR4和MyD88可能参与早期自然流产的病理过程,且TLR4可能通过MyD88信号途径参与早期自然流产的发生.

目的:观察Toll样受体(TLR4)在着床前胚泡和子宫内膜的表达,进一步探讨TLR4对滋养层细胞生物学行为的影响.方法:采用免疫组织化学染色法对TLR4蛋白在着床前小鼠胚泡和子宫内膜的表达进行定位分析;利用小鼠胚泡与人蜕膜细胞共培养着床模型,观察抗TLR4抗体对胚泡滋养层细胞粘附和铺展的影响.结果:TLR4蛋白在小鼠胚泡的内细胞群和滋养层细胞的细胞质内呈阳性表达;不同浓度TLR4抗体组的粘附率与对照组相比,无统计学意义(P＞0.05);100ng/ml、200ng/ml和400ng/ml组的铺展率分别为(64.3士4.0)％、(51.3±4.1)％、(46.2±4.2)％,均低于对照组的(83.5±3.3)％(P＜0.05);扩展面积分别为(63.5±5.0)×103、(60.2±5.2)×103、(58.5±4.8)×103 μm,均明显低于对照组(194.12±8.24)×103μm(P＜0.01),并且其扩展面积以剂量依赖的方式受到抑制.结论:TLR4不影响胚泡滋养层细胞的粘附,可能与胚泡的侵入和滋养层细胞的进一步生长有关.

目的:用心脏原位垫线结扎法制备大鼠心肌缺血再灌注模型,简化实验操作,提高造模成功率.方法:健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血组和缺血再灌注共3组,从心电图、心肌梗死面积、死亡率等方面对该模型进行评估.结果:用心脏原位垫线结扎法制备的心肌缺血再灌注模型较心肌缺血组可明显缩小心肌梗死面积,降低大鼠死亡率.结论:该建模方法较为简单易行,可靠性和成功率均有保障.

Objective To define that heat shock protein 70 (HSP70)overpression might contributed to the persistent infection of Hantaviruses (HTNV).Methods The expression of HSP70 in cortical astrocytes was examined by Western blotting and RT-PCR during Hantavirnses persistent infection.The following apoptosis was detected by immunofluorescence microscopy,AnnexinV assays and RT-PCR assay.Results Compared to control group,the expression of HSP70 protein in astrocytes infected with HTNV 76-118 or SEOV L99 increased,peak expression of HSP70 at day 3 following HTNV 76-118 infection or at day 2 following SEOV infection (n =15,P ＜0.01,P ＜0.05),and the expression of HSP70 gene in astrocytes infected with HTNV 76-118 or SEOV L99 up-regulated,peak expression of HSP70 at day 2-5 post HTNV76-118 infection and at day 2-4 post SEOV L99 infection (n =15,P ＜ 0.01,P ＜ 0.05).In the course of HTNV76-118 or SEOV L99 infection,any cytopathic effect was not shown in astrocytes and cell apoptosis was not induced by viral replication.Conclusion HSP70 induced by Hantaviruses infection might inhibit apoptosis and contribute to the viral persistent infection.

目的:检测结肠癌中SIRT5、M2型丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PKM2)及己糖激酶-2(hexokinase2,HK2)的表达情况并探讨其表达相关性.方法:采用免疫组织化学染色方法检测130例结肠癌患者癌组织中SIRT5、PKM2及HK2的表达情况,分析其表达相关性及其与结肠癌发生的关系.结果:结肠癌组织中SIRT5、PKM2及HK2的平均光密度值均高于癌旁组织(P＜0.05);结肠癌组织中SIRT5与PKM2、HK2蛋白间呈正相关(P＜0.05).结论:SIRT5、PKM2、HK2的过表达对判断结肠癌的发生发展及预后具有一定价值,且SIRT5可能通过调控有氧糖酵解影响结肠癌的发生发展.

目的 研究黄芪多糖是否对心肌缺血再灌注损伤大鼠具有保护作用.方法 SD大鼠随机分为假手术组,心肌缺血再灌注组、黄芪多糖低、中、高剂量预处理组(n=10).不同剂量药物干预10d后,利用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型,之后采集大鼠血清测定其中乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、天门冬氨酸氨基转移酶和α-羟丁酸脱氢酶的含量.并对大鼠左心室组织进行HE染色.以上述5项心肌酶含量及分析心肌细胞形态学的方法评价黄芪多糖的效果.结果 黄芪多糖预处理组与假手术组相比并可使心肌酶指标有所降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).从形态学分析,黄芪多糖预处理组还能改善因缺血再灌注损伤的心肌组织.结论 黄芪多糖能在一定程度上逆转心肌缺血再灌注大鼠被损伤的心肌.

Objective The primary focus of this research was to use astrocytes from newborn Sprague-Dawley rats less than 24 h infected with Hantaan 76-118 (HTNV) or Seoul virus (SEOV) strain L99 as an infection model in vitro to examine astrocyte susceptibility to hantavirus infection.Methods Astrocytes susceptibility to hantavirus infection was examined by immunofluorescence microscopy,Western blotting and genereverse transcription PCR (RT-PCR).The expression of GFAP gene was detected by RT-PCR assay.Results HTNV or SEOV infection rapidly induced viral nucleocapsid protein (NP) and glial fibrillary acidic portein (GFAP) expressions in astrocytes.GFAP and NP in infected astrocytes were co-localized.Upregulation of S segment RNA and GFAP gene was confirmed.Conclusion Our findings indicate that HTNV or SEOV availably infects and activates astrocytes,and GFAP may be actively involved in regulating structural and functional integrity of the BBB,viral NP synthesis and replication.

目的:为克服目前病理学实验教学大体标本观察中存在的问题,将常见病的大体标本拍成数码照片,制作出一套数字化的大体标本,动静结合,使学生更快、更有效地掌握病理变化,同时增加学生的学习兴趣,充分发挥学生学习的主动性、满足学生自主学习的需要.方法:将现有与教学相关的大体标本根据病变部位和病变特点,从不同角度拍成数码照片,利用图片处理技术,修整图片,将一个标本不同侧面、不同放大倍数所拍摄的照片整合到一起,并在典型病变处加入标示和文字,制成静态电子图片库;应用Flash软件将静态图片制成影片式的动态标本,应用于教学.结果:建立了病理学实验教学的大体标本图片数据库、整合的静态图片库和动态标本数据库,应用于实验教学,效果良好.结论:大体标本静态、动态数据库的建立,将克服传统实验课授课过程中存在的弊端,有利于提高病理学实验教学效率、培养学生的自学能力.

Objective: To investigate the effect of silencing CD105 and Ki67 gene expression on OVCAR3 cell line in ovarian cancer. Methods: According to cell transfection results, OVCAR3 cells were divided into CD105-siRNA, Ki67-siRNA, CD105-siRNA + Ki67-siRNA, negative control (NC1 and NC2) and control (non-transfection) groups. The effect of silencing CD105, Ki67 and their combined gene on proliferation, migration, invasion and apoptosis of human ovarian cancer cells can be studied and analyzed with MTT assay, wound-healing assay, Transwell chamber and flow cytometry. Results: Compared with their respective negative control and liposome control groups, proliferation, migration and invasion abilities of OVCAR3 cells were decreased obviously in CD105-siRNA, Ki67-siRNA and CD105-siRNA + Ki67-siRNA groups after gene silencing. Whereas, the most significant change was detected in CD105-siRNA + Ki67-siRNA group along with obviously increased apoptosis rate of cancer cells, and the differences were of statistical significance ( p < .01, p < .05). Conclusions: Expression vectors of CD105-siRNA and Ki67-siRNA can inhibit the proliferation of OVCAR3 cells, reduce their abilities of migration and invasion, and induce apoptosis of tumor cells. The effect of combined gene silence will be more significant.

目的:已证实汉坦病毒(hantanvirus,HTV)可持续性感染大鼠乳鼠大脑皮层星形胶质细胞,进一步研究HTV感染致星形胶质细胞IFN-γ、TNF-α及COX2表达变化及意义.方法:汉坦病毒属汉滩病毒(HTNV)76-118和汉城病毒(SEOV)L99分别感染体外培养的大鼠乳鼠大脑皮层星形胶质细胞,用western-blot和RT-PCR检测IFN-γ、TNF-α及COX2表达变化,探究上述因子在HTV持续性感染星形胶质细胞中的意义.结果:通过western-blot和RT-PCR证实HTNV 76-118和SEOV L99株感染离体培养的大鼠乳鼠大脑皮层星形胶质细胞,和未感染病毒组比较,星形胶质细胞IFN-γ和TNF-α表达呈增加趋势(P<0.05),COX2表达无明显变化(P>0.05).结论:IFN-γ可能参与了HTV所致脑炎的发生或抗病毒作用;TNF-α的表达变化可能与HTV持续性感染大鼠乳鼠大脑皮层星形胶质细胞有关.

将病理学组织切片利用数字化扫描显微镜制成动态切片,同时在不同放大倍数下拍成静态图片,给予标注,制成电子图片库,实现组织切片数字化;将大体标本通过数码相机拍摄、图片技术处理,制成电子图片和动态影像,实现大体标本数字化;搜集资料、图片,编写教案,制作实验课件,按照章节和系统建立完备的数字化影像资料库,实现实验课件的数字化;利用数字化切片和标本,建立数字化的练习题和测试题.将上述数字化教学资源置于形态学实验平台,初步建立病理学实验自主学习数字化平台,满足大学生自主学习的需求,在一定程度上培养学生自主学习的能力,提高课堂教学效果.

Objective:To study expression of CXCR1 in mouse endometrium luminal epithelium during early pregnant. Meth-ods:The immunohistochemical staining and image analysis were used to locate and semiquantitatively analyze the expression of CXCR1 in the endometrium of the mice at 1d, 4d, 6d and 5d of pregnancy. Results:CXCR1 was mainly localized in the free surface of the u-terine endometrial epithelial cells, and its expression showed a certain regularity, that was, the strongest expression appeared at 4d of pregnancy, and the level of 6d decreased to that of 1d during pregnancy. Conclusions:CXCR1 may be related to the mice endometrial receptivity when embryo implantation occurred.

目的:研究母体罹患甲亢与仔鼠肝损伤的关系.方法:首先建立妊娠合并甲亢模型,取新生5、10 d和15d仔鼠肝组织.分别进行解剖学及组织病理学检查,采用实时定量PCR法检测甲状腺激素受体TRα1、TRα2、TR β1在肝组织中mRNA水平表达量的变化.结果:甲亢仔鼠肝细胞内出现细胞水肿、脂肪变;甲亢组TRα1、TRα2的表达量与对照组比较差异无统计学意义,TRβ1在甲亢组中表达量降低.结论:母体罹患甲亢会对仔鼠肝产生影响,会引起甲状腺激素受体TRβ1的差异表达.