目的 探讨健脾益肾化浊方治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的可能作用机制.方法 70只SD雌性大鼠随机分为空白组和模型组各15只,二甲双胍组,健脾益肾化浊方低、中、高剂量组各10只.除空白组外,其余各组均采用来曲唑灌胃联合高脂饲料喂养21天构建PCOS模型.造模成功后,空白组和模型组用10ml/(kg·d)生理盐水灌胃;二甲双胍组用盐酸二甲双胍片100 mg/(kg·d)灌胃;健脾益肾化浊方低、中、高剂量组分别用健脾益肾化浊方药物混悬液1.275、2.55、5.10 g/(kg·d)灌胃,干预30天.将卵巢称重并计算卵巢指数;ELISA法测定大鼠血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、抗苗勒管激素(AMH)和雌二醇(E2)水平;HE染色观察卵巢组织形态改变;免疫组织化学染色法检测大鼠卵巢组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸酶9(Caspase-9)和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋(mTOR)蛋白阳性表达;Western blot法检测大鼠卵巢组织促凋亡蛋白(BAX)、抗凋亡蛋白(Bcl-2)、Caspase-9、细胞色素 C(Cytochrome-C)和 PI3K、AKT、mTOR 蛋白相对表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠卵巢组织以囊性扩张卵泡为主,颗粒细胞层减少,间质增生明显;卵巢指数、血清 T、LH、AMH、卵巢组织 Caspase-3、Caspase-9 平均光密度和 BAX/Bcl-2值、Cytochrome-C、Caspase-9蛋白相对表达量明显升高,血清E2、FSH及卵巢组织PI3K、AKT、mTOR平均光密度和蛋白表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,健脾益肾化浊方各剂量组和二甲双胍组卵巢组织多囊样改变得到改善,可见各级卵泡和黄体,颗粒细胞层增厚,卵巢指数、血清LH、AMH、卵巢组织Caspase-9平均光密度和蛋白相对表达明显降低,血清E2、FSH,卵巢组织PI3K和AKT平均光密度,PI3K、AKT和mTOR蛋白相对表达显著升高(P＜0.05或P＜0.01);二甲双胍组和健脾益肾化浊方中、高剂量组血清T水平和Caspase-3平均光密度显著下降,健脾益肾化浊方低、高剂量组和二甲双胍组mTOR平均光密度显著增加、BAX/Bcl-2值明显降低,二甲双胍组和健脾益肾化浊方高剂量组卵巢组织Cytochrome-C蛋白表达显著降低(P＜0.05或P＜0.01).与二甲双胍组相比,健脾益肾化浊方低剂量组血清T水平明显升高,健脾益肾化浊方中剂量组BAX/Bcl-2值显著升高(P＜0.05);与健脾益肾化浊方中剂量组相比,健脾益肾化浊方高剂量组Cytochrome-C蛋白表达显著降低(P＜0.05).结论 健脾益肾化浊方可抑制PCOS大鼠卵巢颗粒细胞凋亡蛋白表达,从而维持内分泌平衡以改善卵巢生殖功能,其机制可能与激活PI3K/AKT/mTOR信号通路有关.

This study aims to observe the effect and explore the mechanism of Qirong Tablets in the treatment of premature ovarian insufficiency(POI) in mice via the phosphatidylinositol 3-kinase(PI3K)/protein kinase B(Akt)/hypoxia inducible factor 1(HIF-1) signaling pathway. Sixty SPF female BALB/c mice were randomly divided into normal group, model group, positive control group, Qirong Tablets low-, medium-and high-dose group. The normal group was intraperitoneally injected with the same amount of normal saline, and the other groups were intraperitoneally injected with cyclophosphamide 120 mg·kg~(-1)·d~(-1) once to establish a POI animal model. After the model was successfully established, the low-, medium-and high-dose groups of Qirong Tablets were administered orally with 0.6, 1.2, 2.4 mg·kg~(-1)·d~(-1) respectively. The positive control group was given 0.22 mg·kg~(-1)·d~(-1) Clementine Tablets by intragastric administration, and the normal group and model group were given intragastric administration with the same amount of normal saline, and the treatment was 28 d as a course of treatment. After drug intervention, enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) was employed to measure the levels of estradiol(E_2), follicle-stimulating hormone(FSH), luteinizing hormone(LH), and anti-mullerian hormone(AMH) in peripheral blood, and hematoxylin-eosin(HE) staining to observe the ovarian tissue. Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling(TUNEL) assay was used to detect the apoptosis of granulosa cells, and Western blot to determine the expression levels of B-cell lymphoma-2(Bcl-2), Bcl-2-associated X protein(Bax), caspase-3, PI3K, Akt, and HIF-1. Compared with the normal group, the modeling of POI caused loose or destroyed ovarian tissue with vacuolar structures, edema and fibrosis in the ovarian interstitium, disordered or loose arrangement of granulosa cells, and reduced normal follicles. Compared with the model group, drug interventions restored the ovarian tissue and follicles at all the development stages and reduced atretic follicles. Compared with the normal group, the modeling of POI lowered the serum level of E_2 and AMH(P<0.01), and elevated the level of FSH and LH(P<0.01). Compared with the model group, high-dose Qirong Tablets elevated the levels of E_2 and AMH(P<0.05), and lowered the levels of FSH and LH(P<0.05). Compared with the normal group, the modeling of POI up-regulated the protein levels of PI3K, Akt, HIF-1, Bax, and caspase-3 and down-regulated the protein level of Bcl-2 in the ovarian tissue(P<0.01). Compared with the model group, low-, medium-, and high-dose Qirong Tablets down-regulated the protein levels of PI3K, Akt, HIF-1, Bax, and caspase-3 proteins and up-regulated the protein level of Bcl-2 in the ovarian tissue(P<0.05). In conclusion, Qirong Tablets can up-regulate the expression Bcl-2, down-regulate the expression of Bax and caspase-3 in POI mice. Qirong Tablets may inhibit the apoptosis of follicular granulosa cells in mice, thereby delaying ovarian aging, improving reproductive axis function, and strengthening ovarian reserve capacity, which may be associated with the inhibition of PI3K/Akt/HIF-1 pathway.

继发性闭经是妇科常见病、多发病之一,临床辨证多为肾虚、肝郁、血瘀等,治疗多从补肾、疏肝、活血入手.脾胃为后天之本,所生后天之精充养先天之精,充盈血海;脾胃为气机升降之枢纽,协肝调畅气机,助冲任通利;又脾胃为气血生化之源,化生精微物质,濡养全身,可见此病的发生与脾胃功能失常密切相关.文章通过从脾胃与继发性闭经之间的关系阐述继发性闭经的发生机制,结合古今医家对从脾胃论治继发性闭经的认识和思考,探索脾胃与继发性闭经的发生发展关系,为从脾胃论治继发性闭经提供理论依据及临床用药指导.

闭经属妇人三十六病中的痼疾,痼者难愈,且病程长、疗效差.不论青春期,还是育龄期,皆可发生,其病因病机较为复杂,究其缘由,西医认为下丘脑-垂体-卵巢-子宫轴任一环节出现障碍,分泌激素失常引起闭经;中医认为引起闭经的病因不外乎先天不足与后天失养,其发生的主要病机则为先天精血不足,血海亏虚,无血可下,或后天气机失常,瘀阻胞宫络脉,经血不得下行.故作者从先、后天着手探讨闭经的病因病机,为临床辨证治疗提供依据.

多囊卵巢综合征是育龄期妇女常见的内分泌紊乱性疾病,其发病率高,异质性强,是导致女性不孕症的主要原因之一.现代医学认为本病病因复杂,病机尚不明确,病情多变,临床单纯采用激素治疗难以取得满意疗效.杜小利教授认为本病以肝脾肾脏腑功能紊乱为本,痰瘀互结为标,采用中西医结合治疗本病,强调辨病与辨证相结合,用药多重视补肾健脾、化痰祛瘀、调理冲任,以达调经、助孕、安胎之效,其临床收效颇丰,为多囊卵巢综合征辨证治疗提供了宝贵经验.

原发性痛经是妇科常见病之一,多发于青春期.近年来,随着社会压力增大,妇女痛经现象逐渐增多,这类患者经受疾病的困扰,影响日常生活和工作.中医和西医对原发性痛经的治疗各有侧重,中医多采用脏腑辨证论治、针灸及其他辅助疗法为主;西医多采用对症治疗,以药物治疗为主.笔者现就本病的治疗进行综述,并提出研究方向.

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)病机为脾胃虚弱或饮食不节伤及脾胃,导致脾阳不振,运化失司,水谷精微不能遍布全身,反化为饮,聚而成痰,阻滞脉络,气血运行不畅,冲任二脉不利,导致经水难下,阻塞瘀闭,继而闭而不行或难以受精成孕.土虚木乘,气机受阻不畅,进一步形成血瘀.治以健脾运脾为主,佐以补肾疏肝、化痰祛湿.方用苍附导痰丸加减,配伍黄芪扶正利水,莪术、益母草、桃仁、红花、怀牛膝活血化瘀,当归、丹参、三棱、莪术、桃仁、红花、牛膝活血调经,枸杞子、熟地黄、蛇床子、淫羊藿益冲任,胆南星、白芥子兼顾痰湿,调理冲任;排卵期加益母草、穿山甲等促卵子排出,菟丝子、杜仲、桑寄生、川续断等补益肝肾助孕.

原发性痛经是女性的常见病、多发病之一,杜小利教授治疗该病具有显著疗效.导师认为本病多以本虚标实为主,其本为阳虚内寒,标为寒湿凝滞,治疗当以温经散寒、养血祛瘀为主,另辅以疏肝健脾之药,临床多以温经汤、艾附暖宫丸加减化裁治疗,能明显缓解痛经患者的诸多不适,疗效显著.现将杜教授治疗本病的经验进行整理归纳,并附验案一则,加以解释.

杜小利教授认为,产后乳汁不下,多责之脾胃,常从脾胃论治产后缺乳,重视调理脾胃、通络下乳,常用四君子汤加减.若脾虚甚,加黄芪、陈皮;痰湿甚,加半夏、茯苓、苍术;若肝郁,加白芍、柴胡;若血瘀,酌情加当归、川芎以活血养血;产后缺乳属本虚标实之证,加木通、王不留行、路路通以通络下乳;又恐补气之品碍胃,多加木香、砂仁等芳香醒脾、行气导滞,寓行于补,使得补而不滞.杜教授认为,脾胃为五脏之中州,故治疗时遵从脾宜运、宜升、宜燥,痰湿宜利、气滞宜行、瘀血宜化的原则,时时固护脾胃,以达补中气、利痰湿、行气滞、化瘀血,使脾气得运,实邪得消,乳汁自生且乳络自通而乳汁得以下.

痛经是妇科常见疾病、多发疾病之一,其临床辨证多从肾虚、脾虚、肝郁、血瘀为着眼点.脾胃同居中焦,为气血生化之源、后天之本,二者水谷纳运相得、气机升降相因、阴阳燥湿相济,则脾胃功能正常,气血化生有源,血海定时充盈,阴阳消长有序,气血平和则经调痛不发.依据从脾胃立论的病机基础,痛经之变化在冲任气血,气血之化生又源于脾胃,故脾胃损伤则气血失和、冲任劳损,出现痛经.因此脾胃功能失调在痛经的发病中处于核心地位,故调理脾胃治疗本病就有重要意义.现论述脾胃与胞宫、痛经的生理、病理联系,痛经的辨证要点,探究古今医家关于从脾胃论治痛经的认识及临证用药思路.

病理性继发性闭经是妇科常见病,多发病之一,中医药对该病的研究已经有千百年的历史,其治疗疗效显著,独具特色.作者试图通过古代及近现代对该病的认识研究,探求总结古今医家治疗继发性闭经的经验,以翼为该病中医药治疗提供思路及方法.

不孕症是妇科常见病、疑难病之一,近年来发病呈逐年上升趋势,严重影响女性身心健康及家庭和睦.中医认为,脾胃为气血生化之源,且为人体气机升降之枢纽,主中焦之运化,其功能失常与不孕症的发生密切相关.因此导师认为,脾胃功能失常处于不孕症发病中的核心地位,故调养脾胃可使气血平和、气机通畅而胞宫充养、冲任带通调,治疗重点在于调补脾胃.治以补益脾胃、疏肝理脾、健脾化湿、健脾生津等.另外,无论补益、理气通络或是化湿、生津,皆应辅以顾护脾胃、健运脾胃之品,既助补益之功效,亦防止因补益太过滋腻碍胃,可指导不孕症的治疗.故从脾胃着手论治不孕症具有一定的临床意义.

继发性闭经在临床上多以肾虚、血瘀论治,投之补益肾精、活血化瘀之品.而杜小利教授认为继发性闭经以脾胃功能失调为主,肾气亏损及肝失疏泄为辅,治疗以调补脾肾,疏肝行气,养血调经为基础,同时注重处理兼夹因素.文章总结了杜小利教授治疗继发性闭经的临证经验,临床疗效显著,为临床治疗继发性闭经提供了重要思路.

围绝经期综合征是绝经前后妇女的常见疾病,王淑斌主任治疗该病具有独到的疗效.她认为该病的主要病因病机在于肾阴亏虚,虚火上扰,心肾不交,治疗当以滋阴补肾,宁心安神为主,另佐以疏肝健脾为法,临床多以青蒿鳖甲汤合定志汤化裁治疗,能明显缓解围绝经期综合征患者的诸多不适症状,效果良好.现将王老师治疗该病的经验总结整理,并附验案一则,加以说明.

卵巢早衰是妇科常见病、疑难病之一,近年来发病呈逐年上升且年轻化趋势.临床辨证施治多以肾虚、肝郁、痰湿、血瘀为出发点.笔者认为脾胃同居中焦,为水谷纳运之所,气血生化之源,后天之根本,脏腑气机升降枢纽,胞宫赖气血濡养,因此脾胃功能失常与卵巢早衰的发生息息相关.现通过从脾胃与胞宫、卵巢早衰的生理、病理联系,论证从脾胃论治卵巢早衰的理论基础,并阐述其辨证要点,以及古今医家关于从脾胃论治卵巢早衰的认识及临床用药思路论证二者之间的关系.

杜小利教授为全国第四批名老中医药专家学术经验继承人.现任宁夏医科大学附属回医中医医院院长,中国民族医药学会妇科专业委员会常务理事,中华中医药学会中医妇科分会常务委员,世界中医药学联合会盆底医学专业委员会理事.长期从事中西医结合妇产科临床及教学研究工作,采用中西医结合思路,根据月经周期生理特性,灵活辨证,按照阴阳消长规律对卵巢储备功能下降所致不孕症实施治疗,取得了较好的临床效果.现举例介绍如下.

带下病是临床常见的妇科疾病之一,临床辨证多为湿热下注、阴虚夹湿、湿毒蕴结等[],故治疗多以祛湿为主.作者认为,脾胃为后天之本,气血生化之源,而脾主运化水谷精微,胃主收纳腐熟水谷,二者升降相因,燥湿相济,为人体气机调畅之枢.此外,湿源于水,而水从湿化,故脾胃功能失常,中焦气机不畅,则水湿运行、输布、代谢发生异常,水湿之邪蕴结下焦,则女子多见带下病,从而影响女性正常工作和生活,可见带下病的发生与脾胃功能失常关系密切.作者通过从脾胃与冲、任、督、带脉之间的关系来论述带下病的发生机制,结合古今医家对从脾胃论治带下病的认识和思考,探索脾胃与带下病发生发展的关系,为从脾胃论治带下病提供理论依据及临床用药特点.

崩漏是妇科常见病、疑难病之一,临床辨证施治多以脾虚、肾虚、血热、血瘀为出发点.脾与胃同居中焦,二者水谷纳运相得、气机升降相因、阴阳燥湿相济,其发生与脾胃功能失调息息相关.现探讨脾胃与胞宫、崩漏的生理、病理联系,探究古代及当代医家关于脾胃论治崩漏的认识及临床用药思路论证二者之间的关系.

围绝经期综合征是绝经前后妇女常见病、多发病.近年来,随着社会压力及生活环境的改变,部分中年女性逐渐出现早更现象,这类患者经受疾病的困扰,影响其日常生活、工作,常处于焦虑状态.中医和西医对围绝经期综合征的治疗各有侧重,现就本病的治疗进行综述,并提出研究方向.

产后身痛是妇女产褥期常见病、多发病之一,立足于妇女产后多虚多瘀特点,临床辨证施治多以血虚、风寒、血瘀为出发点.中医学认为妇女产后亡血伤津致虚,余血浊液或胞衣残留或感染邪毒致瘀,此皆致为该病.治疗上杜师强调扶正祛邪为大法,辨证与辨病结合,通补并用,同时辅以畅情志、运脾胃.用药上导师善用藤类、虫类药物疏经通络止痛,此有百脉通则病自除之意.作者从“虚”“瘀”着手,探讨产后身痛的病因病机及临床用药思路以指导临床应用.