研究高能量饮食对幼龄动物生长发育的影响.选取清洁级SD大鼠20只,雌雄各半,按照大鼠体重随机分为2组.正常采食组饲喂生长期鼠粮;自由采食组饲喂生长期鼠粮和高能量食物.饲养3个月,到期处死取脏器制作病理切片,镜下观察组织形态变化.结果表明:自由采食组(n=10)病变主要发生在肾脏、肝脏、心脏、大肠、小肠、肺及胰腺;正常采食组(n=10)病变主要集中在肾脏、肝脏、心脏、大肠、小肠及肺.根据实验动物组织病变半定量分析的非线性分级方案,自由采食组组织病变种类和程度更严重.

建立合理的脊髓损伤SCI动物模型,能够有效地进行SCI分子病理机制及新品种药物的研发.采取合理的术后护理措施可以有效降低模型死亡率,提高造模的成功率.本文概述了多种SCI建模方法及护理要点,旨在为SCI模型研究者和使用者提供技术参考.

将60只昆明小鼠采用分层分组法分为空白对照组(CON)、免疫功能低下组(环磷酰胺)、左旋咪唑(levamisole)阳性对照组,以及苦参碱(matrine)高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组10只.免疫功能低下组(环磷酰胺)及matrine高、中、低剂量组4组进行免疫力低下小鼠模型的制备,之后将matrine高、中、低剂量组腹腔注射matrine,高剂量组160 mg/kg、中剂量组80 mg/kg、低剂量组40 mg/kg.连续给药7 d,测定脾/胸腺指数、耳肿胀度、T细胞增殖、血清溶血素含量、碳廓清试验和腹腔巨噬细胞增殖试验.Matrine能提高免疫低下小鼠的脾/胸腺指数,显著增加免疫低下小鼠的耳肿胀度、胸腺增殖指数,并增强免疫低下小鼠的碳廓清能力.Matrine能增强免疫低下小鼠的细胞免疫和非特异性免疫功能,但对体液免疫功能无影响.

探讨山慈菇酯提物(ethyl acetate extract of Cremaara appendiculata,Cr Ap)作用于4T1乳腺癌癌组织中差异蛋白的表达变化,筛选Cr Ap抗4T1乳腺癌的靶点.采用定量蛋白质组学串联质量标签(TMT)标记技术对Cr Ap作用的4T1乳腺癌癌组织进行检测,并筛选4T1组织中发生显著变化的差异蛋白.利用多重数据库对Cr Ap/CON差异蛋白进一步进行生物信息学分析,QPCR检测癌组织中Ly6G、S100a8、Sl00a9、TmsMx和GADPH的mRNA表达量.蛋白质组学共获得15个上调蛋白,1个下调蛋白,其中有4个上调差异蛋白与免疫调节功能密切相关.胸腺素β-4下调,而Toll4受体结合蛋白、Toll样受体结合蛋白、肥大细胞表达膜蛋白1上调,基因本体论注释分析和功能聚类分析显示这些差异蛋白可能与Cr Ap产生抗乳腺癌作用相关;S100-a8、S100-a9蛋白上调可能与Cr Ap产生促凋亡作用和免疫调节过程相关.此外,KEGG富集通路多与免疫调控过程相关,其中癌症的转录失调通路、IL-17信号通路可能与Cr Ap抗4T1作用和免疫调节机制密切相关.QPCR结果显示Cr Ap能显著提高乳腺癌组织中Ly6G、S100a8、S100a9的表达,而降低Tmsb4x.TMT定量蛋白质组学能有效筛选Cr Ap抗4T1的差异蛋白,其中Cr Ap抗4T1乳腺癌机制和相关的免疫调控作用有望成为新的研究方向.

目的 瞿麦是传统的蒙医常用药,但药典中缺乏其相关毒性作用的记载,因此本研究旨在探讨蒙药瞿麦对小鼠的毒性作用.方法 采用血清生化检测肝、肾功能;应用肝、肾、脾、肺脏器系数及苏木精-伊红(HE)染色法检测组织损伤程度;应用实时荧光定量法检测肾组织有机阴离子转运蛋白(OAT)1和OAT3 mRNA的表达.结果 瞿麦高剂量组升高了小鼠尿肌酐和血尿素氮的含量;瞿麦低剂量组升高乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶的含量.瞿麦高、中剂量可显著增加小鼠肾脏及肺脏指数;瞿麦低剂量能显著增加小鼠脾脏指数.组织病理分析结果显示,随着剂量的增加肾脏组织被膜增厚,肾皮质空泡化逐渐加重.瞿麦高剂量组能够极显著抑制OAT1和OAT3 mRNA的表达;瞿麦中、低剂量组可以显著抑制OAT1和OAT3 mRNA的表达.结论 蒙药瞿麦对小鼠具有毒性作用,且肾脏损害严重.

为探究山慈菇酯提物(Cremastra appendiculata,CrAp)体内外抗4T1乳腺癌的作用以及对4T1乳腺癌荷瘤小鼠免疫相关的分子机制的影响.采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测不同浓度(12500、1250、125、12.5、1.25、0.125μg/mL)的CrAp在24、48、72 h对4T1乳腺癌细胞的增殖抑制作用.100只BABL/c雌性小鼠植瘤成功后,随机分成空白对照组、模型组、阿霉素(adriamycin,ADM)阳性对照组、CrAp组以及CrAp+ADM组,每隔7 d小鼠称重一次,绘制体重曲线;每3 d测量小鼠肿瘤长径及短径,绘制肿瘤曲线;剥离癌组织,计算抑瘤率;取癌组织做苏木精-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色;ELISA法检测白介素-2(interleukin-2,IL-2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)含量的变化.TMT分析CrAp调控与4T1乳腺癌免疫相关的差异蛋白.结果表明:在MTT实验中,不同浓度的CrAp抑制率范围为13.48％ ～74.47％,其中CrAp(125μg/mL)在72 h抑制作用最强,抑制率为74.47％.乳腺癌荷瘤鼠体重明显降低;CrAp能明显增加乳腺癌小鼠的体重(P<0.01),并明显降低乳腺癌肿瘤体积(P<0.01).癌组织HE染色:模型组肿瘤细胞形态完好,数目较多,坏死区域少见;CrAp及CrAp+ADM组肿瘤细胞破裂以及胞核溶解,密度降低,并存在不同程度的死亡区域,且各给药组增加了乳腺癌中免疫细胞的数量.在癌组织中,与模型组相比,各药物组明显升高IL-2和IFN-γ的含量(P<0.01),而明显降低TNF-α和IL-10的含量(P<0.01).在体外,CrAp可抑制4T1乳腺癌细胞的增殖.在体内,CrAp能抑制4T1乳腺癌的增长,增加荷瘤小鼠的体重,改善乳腺癌荷瘤小鼠的生存.CrAp提高癌组织中免疫因子IL-2、IFN-γ的表达而降低TNF-α、IL-10的表达.此外,CrAp可以增强ADM抗4T1乳腺癌及免疫调节作用.

应用Pharm Mapper在线数据库预测虾青素(astaxanthin,ASX)的作用靶点,并应用OMIM、TTD等在线数据库获取乳腺癌的作用靶点;将ASX的靶点与乳腺癌的疾病靶点取交集得到ASX抑制乳腺癌的靶点,通过Cytoscape 3.7.1软件构建作用靶点的蛋白相互作用网络图筛选关键靶点;利用GO和KEGG数据库对所有作用靶点进行基因功能富集分析和通路富集分析,以确定其关键作用通路,探讨ASX抑制乳腺癌的作用机制.采用MTT法检测ASX对乳腺癌4T1细胞增殖的影响,通过Western Blot法对p-AKT和PI3K表达水平进行检测.结果显示ASX抑制乳腺癌靶点共21个,并筛选出ADIPOQ、BECNI和PGR 3个核心靶点,通过基因功能及通路富集分析结果发现,ASX抑制乳腺癌主要涉及癌症通路、免疫系统及细胞因子等多个生物过程.细胞增殖结果发现150和300μmol/L的ASX对乳腺癌4T1细胞生长有显著的抑制作用.Western Blot结果显示ASX可显著降低AKT的磷酸化及PI3K的表达水平.因此推断ASX可能通过PI3K/AKT信号通路来预防乳腺癌.

To explore the immunomodulatory effect of adriamycin on 4T1 breast cancer. We used a tandem mass tag-based quantitative proteomic method to detect differential proteins in breast cancer tissues, and multiple bioinformatics databases to analyze the differentially expressed proteins in the proteome. Also, we used enzyme-linked immunosorbent assay to detect the effects of adriamycin on helper T cells 1 and 2 in breast cancer tissues, and flow cytometry to detect CD4+ T cells, CD8+ T cells and regulatory T cells. We discovered the immunomodulatory targets of adriamycin in differential proteins. In total 170 differential proteins were significantly up-regulated, whereas 58 were markedly down-regulated. In addition, 73 proteins were involved in immune regulation. Kyoto encyclopedia of genes and genomes enriched important protein pathways related to cytokines and factor receptors, interleukin 17 pathway and cancer transcriptional regulatory pathways. These pathways and important differential proteins related to immunomodulatory functions were ultimately regulated by adriamycin on CD4+ T cells, CD8+ T cells and regulatory T cells, thereby affecting the prognosis of breast cancer. Moreover, adriamycin significantly increased interleukin 2, CD4+ T and CD8+ T (P<0.01) and markedly reduced regulatory T cells (P<0.05). The function of adriamycin against triple-negative breast cancer was closely related to the immunoregulation process of the differential proteins Ighm, Igkc, S100A8, S100A9 and Tmsb4x. Adriamycin could regulate the content of helper T cells 1 cytokines, CD4+ T and CD8+ T lymphocytes in breast cancer and reduce the number of regulatory T cells to produce immunomodulatory effects.

目的 结合毒理学基础课程特点,探讨如何利用雨课堂等网络教学平台开展教学改革,以期提高教学质量和教学效果.方法 采用问卷星自编问卷对2015级预防医学专业学生展开调查.结果 有86.30％的学生认为毒理学基础作为预防医学的专业基础课应更注重实用性,仅有38.36％的学生对现有教学方法 非常满意,79.45％的学生认为雨课堂有助于提高对毒理学基础的学习兴趣,71.23％的学生认为能够通过雨课堂随时解决学习中遇到的问题,91.78％的学生愿意教师使用雨课堂教授毒理学基础课程.结论 雨课堂有助于提高学生毒理学基础学习兴趣,并能为教师提供及时的反馈信息,帮助教师改进教学工作.

目的 阐明瞿麦对免疫低下小鼠免疫功能的调节作用.方法 应用脾脏、胸腺指数检测瞿麦对免疫器官的影响;采用耳肿胀度检测和T细胞增殖检测瞿麦对细胞免疫的调节作用;通过测定血清溶血素含量,研究瞿麦对体液免疫的调控;利用碳廓清实验和腹腔巨噬细胞增殖实验,明确瞿麦对免疫低下小鼠非特异免疫的调节作用.结果 瞿麦能提高脾脏、胸腺指数,显著增强免疫低下小鼠的碳廓清能力和腹腔巨噬细胞的增殖能力,增强细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫.结论 瞿麦能增强免疫低下小鼠的免疫功能.

目的 研究蒙药山沉香不同提取物护肝、抗氧化作用,筛查山沉香具有护肝、抗氧化作用的活性部位.方法 以浓度为95%乙醇回流提取山沉香粉末浓缩得到乙醇提取物浸膏,用水分散制成混悬液后按极性从小到大依次用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇按比例1∶3萃取,减压浓缩干燥后称质量用于药效学实验.将80只雄性昆明种小鼠随机分成空白组(羧甲基纤维素钠CMC-Na)、模型组(CCl4-花生油)、阳性对照组(联苯双酯)、山沉香乙醇部位提取物组、山沉香石油醚部位提取物组、山沉香乙醚部位提取物组、山沉香乙酸乙酯部位提取物组、山沉香正丁醇部位提取物组,每组10只.每天按20 mL·kg-1的剂量灌胃给药1次,连续灌胃7 d.最后一次给药1 h后除空白组外其余组均注射0.1%CCl4-花生油(20 mL·kg-1)造成急性肝损伤模型,空白组注射等量花生油.12 h后观察小鼠的毛色及活动情况,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量,肝匀浆中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并观察肝组织形态外观、切片病理特征及对其进行Ishak评分.结果 与空白组比较,模型组小鼠体型偏瘦,毛发黯淡无光且较稀疏,灵活度下降,容易聚堆;血清ALT、AST含量明显升高(P＜0.01);肝匀浆MDA含量明显升高(P＜0.01),GPx和SOD含量明显降低(P＜0.01);模型组小鼠肝组织外观呈暗棕色,体积增大;病理切片表现为肝小叶中央静脉周围出现凝固性坏死、肝索肝窦排列不整齐Ishak评分明显升高(P＜0.01).与模型组比较,山沉香乙醇提取物组和乙酸乙酯提取物组小鼠毛色光泽,体型较为丰满;血清ALT、AST含量明显降低(P＜0.01);山沉香乙酸乙酯提取物组小鼠肝匀浆MDA含量明显降低(P＜0.01),GPx(P＜0.01)和SOD(P＜0.05)含量明显升高;且该组肝组织形态外观与空白组接近,病理损伤有明显改善,Ishak评分明显降低(P＜0.01).结论 蒙药山沉香具有护肝作用,而且可通过抗脂质过氧化来保护肝脏,山沉香95%醇提物的乙酸乙酯提取物是其护肝、抗氧化的活性部位.

旨在比较辛伐他汀与依折麦布对高脂饮食金黄地鼠降脂效果的差异.选取体况健康的雄性叙利亚金黄地鼠40只随机分为4组,分别为空白对照组、高脂模型组、辛伐他汀组和依折麦布组;空白对照组饲喂基础饲料,其他3组饲喂高脂饲料;采用灌胃方法分别给予高脂饲喂的金黄地鼠辛伐他汀与依折麦布,连续灌胃9周,空白对照组和高脂模型组同期灌胃蒸馏水;试验结束时,称量各组金黄地鼠体重,取肝脏样本进行称重,计算肝体比;制备肝脏组织学切片进行HE染色,利用显微镜观察病理变化.结果表明:与空白对照组相比,辛伐他汀组的肝脏重量极显著增加(P<0.01),依折麦布组的肝脏重量变化不显著(P>0.05);辛伐他汀组的肝体比极显著高于空白对照组(P<0.01),依折麦布组的肝体比显著低于空白对照组(P<0.05);辛伐他汀组肝脏颜色呈土黄色,表面有颗粒感,边缘锐利,眼观特征与高脂模型组相似;依折麦布组肝脏与空白对照组肝脏眼观特征一致,均呈暗褐色,质地柔软,边缘锐利;辛伐他汀组肝脏镜检观察可见肝周边缘部肝细胞质内出现大脂肪空泡,将细胞核挤向一边,可见空泡变性和炎性细胞浸润;依折麦布组肝脏组织学检查可见肝细胞均质红染,胞质丰富,未见大脂肪空泡、空泡变性和炎性细胞浸润,肝索排列整齐.综上提示,依折麦布对高脂饲喂的金黄地鼠肝脏的降脂效果优于辛伐他汀.

昆明种小鼠灌胃苦豆子总碱,进行单次毒性试验,记录急性中毒症状,剖检组织病理学检查发现靶器官并以Bliss法计算苦豆子总生物碱的半数致死量.得到苦豆子总碱半数致死量为301.75mg·kg-1.实验结果表明,苦豆子总碱经口途径给药的主要靶器官是肺脏、肝脏、肾脏和脑.

Objective To explore the procedures of 3Q validation for blood coagulation analyzer under the good laboratory prac‐tice(GLP) system based on the Sysmex CA7000 automatic blood coagulation analyzer .Methods Four test indicators of PT ,APTT , TT and FIB were chosen to conduct the performance verification in the within‐run precision ,between‐day precision ,accuracy ,linear‐ity ,carry‐over contamination rate of the automatic blood coagulation analyzer .They were prothrombin time(PT) ,activated partial thromboplastin time(APTT) ,thrombin time(TT) ,and fibrinogen(FIB) .Results The within‐run precision CV values of PT , APTT ,TT and FIB were 1 .33% ,1 .57% ,1 .47% and 1 .90% ,respectively ;the inter‐day precision CV values of PT ,APTT ,TT and FIB were 1 .73% ,1 .52% ,1 .55% and 2 .14% respectively ;in terms of accuracy ,the normal quality control CV values were 7 .45% ,3 .88% ,-4 .98% and 4 .36% respectively ;the abnormal quality control CV values of PT and APTT were 8 .11% and 8 .77% respectively ;the r value of FIB linear correlation coefficient was 0 .999 3 ,the a value was 1 .02 ;the highest CV value of car‐ry‐over contamination rate was 2 .15% ;the detected results all conformed to the general industry standards and requirements of in‐strument manufacturer .Conclusion The 3Q validation under the GLP system proves that the Sysmex CA7000 automatic blood co‐agulation analyzer is good in performance and is appropriate for the laboratory work of clinical laboratory department .

将苦豆子总碱和苦参碱制剂在不同的光和热条件下放置90d,用UV法和HPLC法对药物的光和热稳定性进行比较研究.方法:样品采用有机溶剂卒取,UV法测定药物含量,检测波长413nm,HPLC法采用SIGMA Discovery C18柱(25cm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾(用磷酸氢二钾调PH至6.45)为流动相,波长220nm.比较药物浓度的RSD.结果:色谱图中峰分离良好.UV法的RSD值高于HPLC法,UV法产生的误差较大.结论:HPLC法比UV法测定方法重现性好,灵敏度好,精密度高.确定两种药物密封,4℃ 避光保存.

将苦豆子总碱和苦参碱制剂在不同光照和温度下放置3个月,并观察药物的颜色及pH值变化,考察药物对光和热的敏感性以及药物产生的物理变化,通过不同条件的贮存,初步为确定药物的贮存条件提供依据.

目的：观察苦参碱制剂和苦参碱透皮制剂作为外用药的安全性。方法根据《化妆品卫生规范》（2007年版），对家兔进行皮肤刺激性实验。结果：苦参碱制剂对皮肤无刺激性；苦参碱透皮制剂对皮肤有轻度刺激。结论：苦参碱制剂及苦参碱透皮制剂外用安全。

To establish SD rat models of hyperlipemia and fatty liver,the SD rats were randomly divided into two groups,and then were continuously fed a normal diet and high- fat diet for 30 d,respectively. The levels of serum triglyceride( TG),total cholesterol( TC),high density lipoprotein( HDL),low density lipoprotein( LDL),and bile acid in the SD rats were determined. The wet weight of rat liver was taken to calculate the liver index( the ratio of liver wet weight to body weight in the rat),and a small piece of liver tissue was taken and fixed in 10% neutral formalin solution,and then the histopathological examination was conducted under a microscope using hematoxylin- eosin( HE) staining. The results showed that the contents of serum TC and LDL in the high- fat model group were extremely significantly increased( P 0. 01) compare with the control group,and the content of serum HDL in the high- fat model group was extremely significantly lower( P 0. 01) than that of the control group; the liver index,bile acid index of the SD rats in the high- fat model group were extremely significantly higher( P 0. 01) than those in the control group. The results of histopathological examination showed that the structure and contour of hepatic lobular of the SD rats in the high- fat model group basically disappeared,and the hepatocyte morphology was irregular; most of hepatocytes were swelling with ballooning degeneration,and vacuolar degeneration could be seen in the hepatocytes,and some hepatocytes appeared lytic necrosis. The results indicate that using the high- fat diet to feed the SD rats for 30 d,may occur hyperlipemia,which causes enlargement of the liver and fatty liver,and some hepatocytes appear lytic necrosis.

为了建立大白鼠高脂血症及对血液流变学的检测,试验将SD大白鼠随机分为2组,分别给予普通饲料、高脂饲料,连续饲喂2周,测定大白鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血流变学指标。结果表明院高脂组大白鼠血清TC、LDL-C含量显著升高,HDL-C显著低于正常对照组；高脂组全血黏度、红细胞压积均较空白组明显升高。说明院大白鼠给予高脂饲料饲喂90d,可出现高脂血症,并且血液流变学指标会发生明显的变化。

该研究旨在提供一种在较低室温下快速制作大鼠踝关节石蜡切片的方法，以期为大鼠关节炎的病理组织学评价提供重要技术支持。取类风湿关节炎模型（CIA）大鼠踝关节，经10%中性缓冲福尔马林溶液固定2 d，流水冲洗后，分为室温脱钙组和恒温脱钙组，两组均采用8%硝酸脱钙液脱钙，制作石蜡切片，采用HE染色法染色后，光镜下观察并评价其效果。结果表明，不同温度脱钙组制片后均能获得平整、染色良好的石蜡切片，可实现对关节的组织学评估，但恒温脱钙组脱钙完成时间明显短于室温脱钙组，可作为冬季较低室温条件下快速制备切片的脱钙方法。