为了研究我国特有物种叶城沙蜥(Phrynocephalus axillaris)的遗传多样性,采用微卫星和核基因分子标记方法,对新疆7个地区所采集的96只叶城沙蜥进行了遗传多样性分析.基于对6个微卫星位点和核基因BDNF的PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测,利用软件进行分析,结果表明群体单倍型多样性为0.707和平均核酸多样性为0.00314,观察到的杂合度平均值和预期杂合度平均值分别为0.52和0.65,总Fst值为0.175,发现试验研究所采集的叶城沙蜥群体存在明显的遗传差异及种群间存在较大的遗传分化.综合分析说明采集的叶城沙蜥群群体间遗传交流水平低,存在较高程度的遗传分化,但由于样本较少仍需对叶城沙蜥种群遗传特征进一步研究.补充和丰富了新疆部分地区叶城沙蜥的基础遗传数据,为后续合理利用及保护该地区内其他物种的种质资源奠定了基础.

为了明确太子山昆虫的种类及分布,于2021年7月对临夏太子山进行了昆虫资源调查.结果表明,在太子山采集的昆虫共有5目13科31种,其中鳞翅目22种、鞘翅目6种、直翅目1种、膜翅目1种、双翅目1种.综合太子山生态发展情况,应加强太子山植被保护及旅游业管理,进一步优化太子山国家级自然保护区生态环境,从而丰富临夏太子山昆虫多样性.

研究旨在分析兰州大尾羊、小尾羊、滩羊和藏羊的系统发育关系,并与国内外其他绵羊品种进行比较.试验分别对甘肃地区兰州大尾羊、小尾羊、滩羊和藏羊等4种绵羊品种进行线粒体基因COX1与Cytb基因序列的扩增和产物的测序,并基于COX1与Cytb基因与国内外其他绵羊品种构建发育树,分析种群遗传现状和系统发育关系.结果显示,4种绵羊品种与国内外其他物种间存在基因流,且在Cytb基因中藏羊T10与外群盘羊亲缘关系较近.研究表明,对甘肃地区4种绵羊的种质资源保护需要避免与其他物种间的基因流.

以甘肃太子山国家级自然保护区为调查研究对象,进行为期5天的野外实地调查,对保护区内草地、灌木、乔木区域进行样方随机选取,简要分析该区的植物种类组成,以及区系植物成分概况,使得我们能够有效了解保护区植物组成及分布,为我们建设和保护自然保护区植物的丰富度和多样性提供科学依据.

对甘肃地区兰州大尾羊(Lanzhou fat tailed sheep)、滩羊(Tan sheep)、小尾羊(Small tailed han sheep)和藏羊(Tibetan sheep)的线粒体ND2和ND4基因进行扩增,利用生物信息学软件将扩增得到的序列与GenBank上下载的其他20个绵羊品种的ND2和ND4基因序列进行比对,再采用MEGA-X软件用邻接法Neighbor-joining,NJ)和最大似然法(Maximum Likelihood,ML)分别构建NJ树与ML树,探讨不同绵羊种群之间的系统发生关系.结果表明:甘肃地区4种绵羊与国内外绵羊均有不同程度的亲缘关系;在NJ树中所有样本(除外群)聚为1大支,进而再分为2小支,其中2小支中大尾羊、滩羊、小尾羊和藏羊样本均有分布;而在ML树中所有样本(除外群)均聚为1支且并无分支;说明试验所选4种绵羊与这20个绵羊品种有较近的亲缘关系,也说明所采集到绵羊样本有可能与这20个亲缘关系较近的品种存在基因流.

本文利用2对引物分别对宁夏与内蒙古地区的密点麻蜥进行线粒体ND2与ND4基因序列扩增并对产物进行直接测序,探究密点麻蜥种群遗传现状与系统发生关系.结果显示,宁夏地区的3个采集点之间存在基因流,且所采集的全部密点麻蜥样本与荒漠麻蜥品种也存在着基因交流.在保护密点麻蜥种质资源及维持其遗传多样性过程中,应避免密点麻蜥种群间的过度基因交流以及适当控制与近缘物种的渗透杂交.

麻蜥属(Eremias)广泛分布于非洲、欧洲以及亚洲的温带和暖温带,其生存演化情况可作为考察生态环境的重要参数,遗传多样性可作为生物进化的基因动力之体现.本文介绍了麻蜥属蜥蜴遗传多样性的研究进展,结合研究方法、分子标记的种类,从时间维度与功能特点阐述了核型分析、线粒体基因组DNA、微卫星DNA、单核苷酸多态性等研究手段的应用.讨论认为,核型分析能够直观反映染色体层面的性状差异,几种分子标记能够从基因层面深入分析遗传差异产生的程度与原因,对于各种研究手段应用领域的交叉综合运用应当成为现代遗传多样性研究的新思路.

为加强岷县黑裘皮羊及贵德黑裘皮羊种质资源的合理利用及保护,本研究对6个岷县黑裘皮羊样本以及5个贵德黑裘皮羊样本线粒体DNA的Cytb、COI、ND2、ND4四对线粒体基因序列进行PCR扩增及序列分析.结果表明:岷县黑裘皮羊与贵德黑裘皮羊之间、岷县黑裘皮羊与国内外绵羊品种之间以及贵德黑裘皮羊与国内外绵羊品种之间均存在一定的基因流.其中,岷县黑裘皮羊的样本M1与样本M4受到外来杂交品种基因的冲击较大.基于上述结果,本研究对于岷县及贵德黑裘皮羊提出了保种建议:一是避免岷县及贵德黑裘皮羊与其他绵羊品种产生基因流;二是加强岷县及贵德黑裘皮羊的品种提纯工作.

细胞永生化使细胞能够在保持遗传性状的同时无限增殖,细胞的体外永生化需要将HPV的E6和E7基因、SV40的LT基因或人端粒酶逆转录酶(hTERT)等导入目标内,而SV40-LT是建立永生化细胞最便捷的基因.本试验利用慢病毒感染方式将SV40-LT导入MDCK细胞中,阳性筛选后经qPCR和免疫荧光实验均检测到SV40-LT的表达,成功建立了利用慢病毒方式导入SV40-LT的实验体系,为后续永生化细胞建系研究提供了技术依据.

当前贵德黑裘皮羊品种资源形势较为严峻.试验研究利用所设计的一对引物对5个贵德黑裘皮羊样本线粒体DNA的COI基因片段进行PCR扩增并对产物进行直接测序,基于mtDNA COI基因探究贵德黑裘皮羊种群遗传现状.结果 显示,贵德黑裘皮羊与国际上乌珠穆沁羊、滩羊、青海藏羊等18个绵羊品种有较近的亲缘关系,存在基因流.研究表明,对贵德黑裘皮羊种质资源进行保护,应该要避免其与其他绵羊品种之间的基因流.

为研究藏獒体细胞的生物学特性,保存藏獒遗传资源,以实验室前期自主分离的藏獒肾脏细胞为材料,探讨了其体外培养的形态特征、传代次数、冻存复苏、生长特性、细胞核型以及G418最低致死浓度.结果表明:藏獒肾脏细胞体外培养时形态均为成纤维细胞,形状梭形,呈放射状与旋涡状样式生长;细胞冻存后复苏活率为91％,且复苏后形态与长势均呈现良好状态;F1代至F5代,细胞增殖较快,F5代至F8代,细胞增殖减弱甚至停滞,细胞呈多边形状态,出现细胞脱落现象,最终于F8代无法继续生长;生长曲线测定结果显示,24孔板内细胞数目最高值达到4.06×105个/mL,最短倍增时间为27 h;藏獒核型2n=78;藏獒肾脏细胞的G418筛选最低致死浓度为500μg/mL.

绵羊是世界上最早被驯化的畜种之一,且在我国品种种类繁多,但如今由于长期进行杂交,导致畜种趋于减少、濒于消失甚至泯灭,其中我国特有的绵羊地方品种——兰州大尾羊便是其中一个濒临灭绝的畜种.本研究通过对甘肃地区的大尾羊绵羊品种的线粒体Cytb基因(Cytochrome?b?gene)进行扩增,并与国内外其他绵羊品种进行进化树分析,对其种群之间的系统发生关系进行了研究,结果表明:现存兰州大尾羊这一品种可能存在着较为严重的杂交情况,对探讨种群之间的系统发生关系及兰州大尾羊品种起源提供了理论依据,且对研究甘肃地区的绵羊品种起源以及对绵羊品种的保护和利用有着一定的意义.

对凤冈绿茶中原花青素的提取工艺条件进行优化.本文在单因素试验基础上,采用响应面法研究原花青素提取工艺中乙醇浓度、超声温度、超声时间和料液比四个因素对凤冈绿茶中原花青素得率的影响.结果 表明,最佳提取工艺参数为:乙醇浓度83％、超声温度58℃、超声时间40 min、料液比1∶33 g/mL.在此条件下,凤冈绿茶中原花青素得率为4.798％±0.05％,与模型预测值(4.804％)接近,且其相对误差为1.05％,说明该模型回归项良好,拟合度较好,优化后的工艺条件可行,可以为凤冈绿茶中原花青素的进一步开发利用提供理论依据.

在建立单重PCR的基础上成功建立了多种二重PCR体系,以同时检测2种肉源成分(猪、牛、鸡和羊).PCR扩增的是每种动物的线粒体基因,由于鸡、羊的PCR扩增片段大小过于接近(131和119 bp),电泳图上不易区分,故试验中的二重PCR体系使用了5种动物组合.所建立的二重PCR方法能够迅速、稳定地同时鉴别2种肉源性成分,为下一步建立三重或四重PCR方法奠定了良好的基础.