目的 观察母鼠孕期和哺乳期暴露于壬基酚(NP)对子代肝脏增殖细胞核抗原(PCNA)的影响.方法 试验分为2组:包括NP染毒组(NP 200 mg/kg·bw)和对照组(花生油).母鼠受孕第6d到仔鼠出生后21 d灌胃染毒壬基酚,60 d后剖杀仔鼠,检测肝脏PCNA的表达,并检测肝脏功能(包括血总蛋白TP、白蛋白ALB、前白蛋白PA、球蛋白GLB).结果 与对照组比较,NP暴露组60 d PCNA阳性细胞数明显增多(P＜0.01),积分光密度增高(P＜0.01).经检测仔鼠的TP、ALB(P＜0.05)与对照组差异有统计学意义,而PA、GLB(P =0.194、0.644)与对照组相比较差异无统计学意义.结论 NP暴露使仔鼠肝脏组织PCNA的表达增加,即处于增殖状态的细胞增多,并且可能对肝脏功能产生一定影响,提示NP对肝脏具有损伤作用.

目的 通过表达谱基因芯片,筛选与神经毒性相关的差异表达基因及通路.方法 建立孕期和哺乳期暴露NP的仔鼠模型,提取暴露组和对照组出生21 d仔鼠脑组织mRNA,采用Roche Nimblegen公司生产的12 × 135位点的包含大鼠26,419个基因的表达谱基因芯片,检测脑基因的表达,扫描仪进行扫描及处理数据.结果 暴露组与对照组共有1 254个差异表达基因,其中619个基因上调,635个基因下调.GO(Gene Ontology)分析差异表达基因涉及的主要功能包括:分子功能包括结合活性、金属离子结合活性、催化活性、核酸结合活性;参与的主要生物学过程有细胞大分子代谢过程,细胞氮化合物代谢过程、核苷酸及核酸代谢过程、蛋白质代谢过程;所涉及细胞成分包括胞外区、细胞器、高尔基体部分、细胞质、中间纤维等.结论 NP干扰神经系统的发育可能与差异表达基因涉及的分子功能、参与的主要生物学过程和所涉及细胞成分改变有关.

Objective To observe the influence of exposure to p-nonylphenol(NP) during pregnancy and lactation on tumor necrosis factor(TNF)-αin the cortex of male rat pups. Methods According to the pregnancy time,32 pregnant rats were randomly divided into the control group and the exposure group (of low,middle,high dose). Exposure dosages of digestive tract were 0,25,50,100 mg/(kg·d) respectively. Exposure duration was from 6th day of conception to the 21st day after birth (end of the lactation for newborn rats). Immunohistochemistry was adopted to determine the expression level of TNF-αin the cortex of male rats pups on the 21st day and 60th day after birth ,and the association between NP exposure and these alterations in TNF-αwas analyzed as well. Results Compared with the control group,the expression level of TNF-αin exposure group(of low,middle,high dose) increased on the 21st day and 60th day after birth. Conclusion Exposure to NP during gestation might induce an increase of TNF-αexpression levels in the cortex of pup rats,and the inflammatory reaction might damage mechanism of the cortex of pup rats.

将交配成功的31只孕鼠根据妊娠日期分层后随机分为4组:对照组,壬基酚(NP)低、中、高剂量(25、50、100 mg/kg)染毒组;NP暴露时间为受孕第6天到出生后21 d哺乳期结束.Real TimePCR和免疫组织化学法检测胶质原纤维酸性蛋白(GFAP) mRNA和蛋白的表达,并分析上述变化与NP暴露之间的关系.高剂量组21 d、60d海马GFAP mRNA表达增加,差异有统计学意义(P＜0.05),21d、60d仔鼠皮质部位GFAP mRNA表达与NP暴露剂量呈正相关(r =0.670、0.588,P＜0.05),免疫组化切片可见仔鼠皮质部位星形胶质细胞体肥大,细胞分支增多,染色较深,高剂量组GFAP阳性细胞数与NP暴露剂量呈正相关(r=0.624、0.713,P＜0.05);GFAP光密度与NP暴露剂量呈正相关(r =0.733、0.679,P＜0.05).各暴露组21 d仔鼠海马GFAP阳性细胞数低于60d(t=-5.525,P＜0.05).提示NP孕期暴露影响子代大鼠脑组织GFAP的表达,且剂量越高,GFAP表达越低.

目的 母鼠孕期和哺乳期暴露NP,观察其对子代脑皮质增殖细胞核抗原(PCNA)的影响.方法 试验分为4组:即对照组,NP25、50、100组.母鼠受孕第6天到出生后21 d染毒壬基酚,21、60 d分别剖杀检测PCNA的表达,并分析上述变化与NP暴露之间的关系.结果 与对照组比较,低、中、高剂量组21、60 d PCNA阳性细胞数明显增多(F=476.34、1077.55,P ＜0.01),光密度增高(F=44.46、7.58,P＜0.01)随着给药剂量和给药时间的增加,PCNA阳性细胞数目逐渐增多,21、60 d阳性细胞数与NP暴露剂量呈正相关(r=0.87、0.60,P＜0.05).结论 NP孕期暴露使仔鼠脑组织PCNA的表达增加,即处于增殖状态的细胞增多,提示NP对脑组织有损伤作用.

目的观察母鼠在孕期和哺乳期壬基酚（NP）暴露对雄性仔鼠肾上腺TNF-α和IL-1β表达水平的影响及血清中激素水平的变化。方法根据妊娠时间将32只孕鼠随机分为对照组及低、中、高剂量暴露组;消化道暴露,暴露剂量分别为0、25、50、100 mg/（kg·d）;暴露时间为受孕第6 d到出生后21 d（仔鼠哺乳结束）。免疫组织化学法检测仔鼠出生后21、60 d肾上腺TNF-α和IL-1β表达;放免法检测血清中激素水平的变化,并分析上述变化与NP暴露之间的关系。结果与对照组比较,低、中、高剂量组21、60 d TNF-α和IL-1β光密度增高（F=4265.850;96.191及428.759;1519.815,P＜0.05）,随给药剂量和给药时间的增加,21、60 d时的光密度增高,与NP暴露剂量呈正相关。血清睾酮水平随NP暴露剂量增加而降低,雌二醇水平随NP暴露剂量的增加而增加。结论 NP孕期暴露使仔鼠肾上腺炎性介质TNF-α和IL-1β表达增加,炎症性反应可能是NP引起仔鼠肾上腺损伤的机制,而肾上腺的损伤可能导致肾上腺功能异常并进而影响仔鼠的血清激素水平。

目的 应用基因芯片技术,检测壬基酚暴露对仔鼠脑组织差异基因的表达,筛选部分与神经毒性相关的差异表达基因及通路进行进一步机制研究.方法 建立孕期和哺乳期暴露壬基酚的仔鼠模型,提取暴露组和对照组出生21 d仔鼠脑组织mRNA,采用Roche Nimblegen公司生产的12 × 135位点的包含大鼠26 419个基因的表达谱基因芯片,检测脑基因的表达,扫描仪进行扫描及数据处理.结果 暴露组与对照组共有1 254个差异表达基因,其中619个基因上调,635个基因下调.部分与神经系统功能相关差异表达基因为:①神经营养相关的基因:甘丙肽基因下调,神经生长因子基因下调;②细胞凋亡的相关基因:凋亡蛋白酶活化因子-1基因上调,凋亡抑制基因-1基因下调,半胱氨酸蛋白酶7基因上调;③信号传递及离子通道相关基因的表达:谷氨酸盐受体基因下调,钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ基因下调.结论 壬基酚能导致仔鼠海马神经元信号传导、免疫应答、细胞凋亡、炎症反应因子、神经胶质细胞发育等相关基因的差异表达,以上改变有可能干扰神经系统的发育和功能.

目的 母鼠孕期和哺乳期暴露NP,观察其对子代神经生长相关蛋白(GAP-43)的影响.方法 将交配成功的31只孕鼠根据妊娠日期分层后随机分配到4组,即对照组,NP低、中、高剂量组(NP0、25、50、100 mg/kg/day),单笼饲养,空腹灌胃,NP暴露时间为受孕第6天到出生后21 d哺乳期结束(GD6 ～ PND21),免疫组织化学法检测21 d、60 d皮质部GAP-43的变化,并分析上述变化与NP暴露之间的关系.结果 高剂剂量组21 d和60 d龄的仔鼠皮质部GAP-43免疫反应阳性细胞平均数目、积分光密度低于同期对照组仔鼠(P＜0.05);GAP-43蛋白表达与NP暴露剂量有负相关关系,差异有统计学意义(r=-0.711、-0.568,P＜0.05).结论 NP孕期暴露影响子代大鼠脑组织GAP-43的表达,且剂量越高,GAP-43表达越低.

Objective To investigate the influence of exposure to nonylphenol(NP) on proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in the kidney of newborn rats during pregnancy and lactation. Methods The experiment was divided into 3 exposure groups(low dose group,medium dose group and high dose group) and control group. NP exposure time was limited from the 6th d after conception to 21st d after birth,the kidney was got after the newborn was killed 60 d later,and the expression of PCNA was detected by immunohistochemistry. Results The cells in renal tubular was more than those in renal glomerular. Compared with the control group,the number of positive cells in PCNA of rats′kidney increased obviously in low,medium and high dose group and the number of integrated optical density(IOD) also rose,the differences had statistically significant difference(P<0.01). With the increase of dosage of administration,the number of positive cells in PCNA rose gradually, and the NP exposure dose was as sociated with PCNA-positive cells in a dose-dependent manner(r=0.979,P<0.05). Conclusion Exposure to NP of female rats during gestation will induce an increase in PCNA expression in the kidney of newborn rats.