We studied the effects of age and suntan on the expression of necroptosis signaling molecules (RIPK1, RIPK3, and MLKL kinases) and first TNF receptor (TNFR1) in isolated skin cells from women undergoing facelift surgery. In women above 50 years, the expression of the TNFR1, kinases RIPK1, RIPK3, and MLKL, the phosphorylated forms of these kinases was significantly (p<0.05) increased in comparison with the corresponding parameters in women under 30 years. The expression of all necroptosis proteins and TNFR1 in women with suntan was significantly (p<0.05) higher than in those without tan. Cells from the surgical material were incubated with TNFα to determine the level of induced necroptosis. In women aged >50 years and women with suntan, the expression of phosphorylated forms of kinases was significantly increased, which attested to necroptosis activation. This study allowed identifying the targets on skin cells for prevention of necrosis and inflammation after facelift surgery.

Цель работы - измерение уровня экспрессии проапоптозных сигнальных белков Bad, Bax, Bak, Bim, Bid, 14-3-3, а также каспазы-2 и каспазы-9, в клетках кожи и подкожно-жировой ткани, выделенных из операционного материала при операции по коррекции контуров лица. методика. Из операционного материала в самом начале операции (контрольные образцы), а также после её завершения (опытные образцы), были выделены образцы кожи и подкожной клетчатки, из который были изолированы жизнеспособные клетки. Эти клетки обрабатывали антителами к сигнальным молекулам апоптоза и затем анализировали на проточном цитометре FACSCalibur по программе SimulSet. результаты. По сравнению с контрольными образцами, не подвергавшимися ишемии, клетки кожи, выделенные по завершению операции, подвергались действию ишемии / реперфузии, то есть в них оказались активированы сигналы апоптоза, ассоциированного с митохондриями, на что указывает повышение экспрессии проапоптозных белков и их фосфорилированных форм. Уровень экспрессии этих белков был проанализирован с позиций возраста пациенток. Было установлено, что в возрастной группе старше 50 лет все показатели статистически значимо превышали норму, а также соответствующие показатели пациенток более молодого возраста. Заключение. Полученные данные указывают на активацию сигнальных путей апоптоза, ассоциированного с митохондриями, в клетках кожи и подкожно-жировой ткани, выделенных из операционного материала при коррекции контуров лица, а также на усугубление процесса апоптоза по мере старения организма пациента. The aim of this work was to measure the expression of proapoptotic signaling proteins, Bad, Bax, Bak, Bim, Bid, and 14-3-3, as well as caspase-2 and caspase-9, in skin cells and subcutaneous adipose tissue isolated from tissues collected during face lifting surgery. methods. Skin and subcutaneous tissue samples were isolated at the very beginning of the operation and after its completion; then viable cells were isolated from the samples. The cells were stained with antibodies to apoptosis signaling molecules and analyzed with a FACSCalibur flow cytometer using SimulSet software. Statistical analysis was performed with BIOSTAT software. results. Skin cells isolated at the end of the operation were more severely damaged compared with control samples (cells isolated at the very beginning of the operation and not subjected to ischemia). In the cells obtained after the surgery, effects of ischemia/reperfusion were observed. The cells isolated after the face lifting surgery contained activated apoptotic signals associated with mitochondria, as indicated by increased expression of proapoptotic proteins and their phosphorylated forms. The proapoptotic protein expression was analyzed based on the patients’ age. It was found that in the group older than 50 years, all indexes significantly exceeded both the normal range and respective values in younger female patients.conclusion. The study results showed activation of proapoptotic signaling pathways associated with mitochondria in skin cells and subcutaneous adipose tissue isolated during face lifting surgery along with aggravation of apoptosis as the patient ages.

Целью работы было определение уровня экспрессии хемокиновых рецепторов на лимфоцитах периферической крови пациентов при проведении операции абдоминопластики, а также сравнение этих показателей у пациентов с ожирением и с нормальной массой тела. Методы. В работе проанализированы данные 92 женщин в возрасте от 18 до 56 лет, которым в клинике пластической и эстетической хирургии «Фрау Клиник 1» проведена операция абдоминопластики. Кровь брали натощак перед операцией, мононуклеары выделяли на градиенте плотности, клетки окрашивали моноклоанльными антителами, конъюгированными с флуоресцентными красителями. Интенсивность флуоресценции измеряли на проточном цитометре FACSCalibur по программе SimulSet. Статистический анализ проводили по программе «Биостатистика». Результаты. Было показано, что у больных с ожирением в периферической крови достоверно повышен уровень CD4+ Т-клеток, Т-хелперов первого порядка (Th1), регуляторных Т-клеток (Treg), наивных Т-клеток и Т-клеток памяти. Экспрессия хемокиновых рецепторов CXCR4, CCR6, CCR7, CCR9 достоверно повышена на субпопуляции CD4+ Т-лимфоцитов при ожирении. Также было установлено, что ожирение ассоциировано с повышением хемокиновых рецепторов CCR5, CX3CR1, CXCR3 на CD8+ цитотоксических лимфоцитах, что отражает их способность отвечать на регуляторные хемокины и аккумулироваться в жировой ткани. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют об изменении в системе регуляции хемокинов и их рецепторов при ожирении, что является патогенетической основой для развития локального воспаления в жировой ткани и может оказывать негативное влияние на развитие осложнений после операции абдоминопластики. The aim of this study was to determine the level of chemokine receptor expression on peripheral blood lymphocytes of patients undergoing abdominoplasty and to compare these data in obese patients and with data in patients with normal body weight. Methods. We analyzed the data of 92 women aged 18 to 56 years who underwent abdominoplasty surgery at the Plastic and Aesthetic Surgery “Frau Klinik 1”. Blood was collected during fasting before surgery. Mononuclear cells were isolated on a density gradient and stained with monoclonal antibodies conjugated with fluorescent dyes. Fluorescence intensity was measured on a FACSCalibur flow cytometer using the SimulSet program. Data were analyzed statistically with Biostatistics software. Results. In obese patients, the peripheral blood levels of CD4+ T-cells, T-helper cells 1 (Th1), regulatory T-cells (Treg), naive T-cells, and memory T-cells were significantly increased (p < 0.05). Also in obese patients, expression of chemokine receptors CXCR4, CCR6, CCR7, and CCR9 was elevated on the CD4+ T-lymphocyte subpopulation. It was found that obesity is associated with an increased expression of the chemokine receptors CCR5, CX3CR1, and CXCR3 on CD8+ cytotoxic lymphocytes, which reflects their ability to respond to regulatory chemokines and to be accumulated in the adipose tissue. Conclusion. The results indicate a change in regulation of chemokines and their receptors in obesity. This is the pathogenetic basis for developing local inflammation in adipose tissue, and this regulatory change may facilitate the development of complications following abdominoplasty surgery.

Цель работы - определение уровня хемокинов, ассоциированных с фибробластами и кератиноцитами, в клетках кожи, выделеных из операционного материала при абдоминопластике у пациенток с нормальной массой тела и ожирением. Методика. Для исследования использовали фрагменты кожи пациенток с нормальной массой тела и ожирением. Степень ожирения оценивали по индексу массы тела (ИМТ) согласно международным критериям. ИМТ, принятый в исследовании за норму, составлял 19,8±1,7 кг/м2, для пациенток с ожирением - 38,3±4,1 кг/м2. Клетки выделяли путем ферментативной обработки коллагеназой II. Проводили иммунотипирование клеток моноклональными антителами меченными флуоресцентными красителями. Использовали антитела к хемокинам семейства CXCL (R&D systems) и CCL (Boeringer Ingelheim, Германия). Меченные флуоресцентными красителями иммунотипированные клетки анализировали на проточном цитометре FACSCalibur (Becton Dickinson, США) по программе SimulSet. Статистический анализ проводили по программе ANOVA. Результаты. Были проанализированы хемокины семейства CCL и CXCL, секретируемые кератиноцитами и фибробластами кожи. Показано, что в коже пациенток с ожирением повышен процент клеток, экспрссирующих рецепторы CXCR3, CXCR4, CCR3, CCR10, регулирующие секрецию хемокинов кератиноцитами и фибробластами кожи. При ожирении в клетках кожи повышен уровень хемокинов CXCL8, CXCL9, CXCL10, CXCL13, CCL24 и CCL27, имеющих отношение к развитию и поддержанию воспалительного процесса в коже, а уровень хемокинов CCL17, CCL22, CCL28 снижен, что указывает на нарушение хемокиновой и цитокиновой регуляции при ожирении и является основой для развития послеоперационных осложнений при абдоминопластике. Заключение. Полученные данные указывают на нарушение хемокиновой регуляции при ожирении, что способствует развитию послеоперационных осложнений при абдоминопластике. The aim of the study was to compare chemokine expression in skin cells obtained from patients with normal body weight and obesity after abdominoplasty. Methods. Obesity was determined by body weight index (normal, 19.8±1.7 kg/m2; obesity, 38.3±4.1 kg/m2). Only skin without subcutaneous fat was isolated from surgical material. The skin cells obtained from surgical material were stained with monoclonal antibodies to chemokines. Fluorescence of proteins and receptors was analyzed by flow cytometry. Statistical analysis was performed with ANOVA. Results. Keratinocyte- and fibroblast-derived chemokines of the CCL and CXCL families were analyzed. Percentage of cells expressing CXCR3, CXCR4, CCR3, and CCR10 receptors (regulators of chemokine secretion by keratinocytes and skin fibroblasts) was increased in the skin of obese patients. Expression of the pro-inflammatory chemokines, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CXCL13, CCL24, and CCL27, was increased in skin cells from obese patients. Obesity was associated with reduced expression of the chemokines CCL17, CCL22, and CCL28 in skin cells. Conclusion. Chemokine regulation is disturbed in obesity, which may underlie the development of complications after abdominal surgery.

The study was aimed at assessing the role of chemokines in inflammatory changes in tissue following abdominoplasty. The levels of neutrophil-coupled chemokines and their receptors in the serum and blood cells, as well as in cells isolated from the subcutaneous adipose tissue sampled during abdominoplasty were compared in patients with obesity and normal body weight. The levels of chemokines CCL3, CCL3, and CCL5 in blood serum and expression of chemokine receptor CXCR2 and CXCR6 on blood neutrophils were significantly higher (p<0.05) in obese patients in comparison with patients with normal body weight. Elevated expression of chemokines CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, CCL18, and CCL20 (p<0.05) was detected in subcutaneous adipose tissue cells isolated obese patients in comparisons with persons with normal body weight. These findings attest to favorable conditions for enhanced neutrophil migration to the adipose tissue in patients with obesity, which can promote leukocyte infiltration of the suture site after abdominoplasty and serves as additional risk factor for the development of postoperative complications associated with activity of neutrophil-derived proteolytic enzymes.

Цель. Изучение клеток иммунной системы полости рта у пациентов до проведения операции лифтинга лица, а также сопоставление этих данных с показателями, выявленными при осложнениях в послеоперационном периоде. Методика. Исследованы клетки иммунной системы полости рта 100 женщин (23-68 лет), которым перед операцией лифтинга лица проведено стоматологическое обследование и необходимое лечение при наличии кариеса дентина, клиновидного дефекта эмали зуба, хронического периодонтита или пульпита. Выделенные путем смывов десенной борозды клетки окрашивали моноклональными антителами и анализировали на проточном цитометре. Определяли уровень спонтанного и индуцированного апоптоза. Оценивали уровень фагоцитоза и генерацию супероксидного аниона нейтрофилами. Результаты. Показано, что хронические воспалительные заболевания зубов оказывают негативное влияние на состояние иммунных клеток ротовой полости, сопровождаются повышением генерации супероксидного аниона нейтрофилами, повышением уровня спонтанного и церамид-индуцированного апоптоза клеток десенной борозды. Заключение. Наличие хронической патологии зубов, даже после санации, оказывает негативное влияние на течение послеоперационного периода при проведении операции лифтинга лица, в частности, способствует увеличению времени заживления операционной раны, инфицированию раны с появлением очагов некроза в области операционного шва. The object. The study of the cells of the immune system of the oral cavity in patients before the operation of face lifting, as well as a comparison of these indicators with complications in the postoperative period. Methods. The immune cells from the oral cavity were studied in 100 women (23-68 years), who underwent a dental examination and necessary treatment if they had the dentin caries, wedge-shaped defect of tooth enamel, chronic periodontitis or pulpitis before the facial lifting operation. The immune cells have been isolated by a lavage of gingival sulcus around the damaged tooth. Results. It has been shown that chronic dental diseases made a negative contribution to the oral cavity immune cells. It has been accompanied by the elevated levels of superoxide originating from neutrophils as well as the increased levels of spontaneous and ceramide-induced apoptosis of immune cells isolated from the gingival sulcus. Conclusion. The presence of chronic pathology of teeth even in the case of the preoperative dental sanation has a negative impact on the postoperative period after face lifting, in particular, contributes to the lengthening of the surgical wound healing time, wound infection as well as the partial necrosis of suture.

В период ишемии оперируемого органа или ткани, вызванной прекращением доступа питательных веществ с кровью, активируется аутофагия, что позволяет клеткам сохранить жизнеспособность. Цель работы - определение экспрессии белков аутофагии Beclin-1, LC3-II, p62, ATG5в клетках кожи и подкожно-жировой клетчатки (ПЖК), выделенных из операционного материала при проведении лифтинга лица. Пациентки - женщины в возрасте 21-64 лет (n = 84). Материалы и методы. Из образцов кожи и ПЖК лица, иссеченных во время операции лифтинга, путем обработки коллагеназой получали суспензию клеток. Измерение уровня флуоресценции белков аутофагии в клетках проводили методом проточной цитометрии. Данные анализировали по алгоритму ANOVA - в зависимости от возраста пациенток. Результаты. Уровень экспрессии исследуемых маркеров аутофагии снижался с возрастом, достоверные различия (p < 0,05) получены для пациенток в возрасте старше 50 лет по сравнению с лицами моложе 30 лет. Выводы. Показано, что процессы аутофагии в клетках кожи и ПЖК активируются при лифтинге лица, но активность аутофагии достоверно снижается после 50 лет по сравнению с молодым возрастом. Также установлено сопряжение активности аутофагии с гипоксией и с изменением мембранного потенциала митохондрий в клетках ПЖК. Autophagy is known to be activated during organ or tissue ischemia induced by blood deprivation during surgery to keep the cells viable. Aim. To evaluate the expression of autophagy proteins, Beclin-1, LC3-II, p62, and Atg5 in cells isolated from the skin and subcutaneous fat excised from the face lifting surgical material. Patients. Women aged 21-64 (n = 84) were recruited. Methods. Cells were obtained from face lifting surgical materials using the collagenase treatment. The autophagy protein expression was analyzed using the flow cytometry. Statistics was performed using ANOVA based on the age of patients. Results. Expression of the studied autophagy markers was found to decrease with age; significant differences (p < 0.05) were obtained for patients older than 50 compared with those under 30. Conclusions. We demonstrated that autophagy was activated in cells from skin and subcutaneous fat during the face lifting. The autophagy protein expression was significantly reduced at ages older than 50 compared to the age under 30. The autophagy coupling with both hypoxia and changes in the mitochondrial membrane potential was also shown.

The object. The study of the cells of the immune system of the oral cavity in patients before the operation of face lifting, as well as a comparison of these indicators with complications in the postoperative period. Methods. The immune cells from the oral cavity were studied in 100 women (23—68 years), who underwent a dental examination and necessary treatment if they had the dentin caries, wedge-shaped defect of tooth enamel, chronic periodontitis or pulpitis before the facial lifting operation. The immune cells have been isolated by a lavage of gingival sulcus around the damaged tooth. Results. It has been shown that chronic dental diseases made a negative contribution to the oral cavity immune cells. It has been accompanied by the elevated levels of superoxide originating from neutrophils as well as the increased levels of spontaneous and ceramide-induced apoptosis of immune cells isolated from the gingival sulcus. Conclusion. The presence of chronic pathology of teeth even in the case of the preoperative dental sanation has a negative impact on the postoperative period after face lifting, in particular, contributes to the lengthening of the surgical wound healing time, wound infection as well as the partial necrosis of suture.

It was investigated the activity of leukocyte elastase, alpha 1-proteinase inhibitor and C-reactive protein in patients with delayed negativation of serological reactions after a treatment of syphilis. The patients were divided into three subgroups. The first subgroup consisted of patients who did not have the signs of non-specific immune system response. Second subgroup consisted of patients with clear signs of infection process. The patients this subgroup had elevated values of the contents of inflammatory mediators. The remaining patients with questionable results were attributed in the third subgroup. The obtained results can be of great value to determine further treatment strategy in patients with delayed negativation of serological reactions.

Goal of the study. To study the role of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines for the course of atopic dermatitis (AD). Materials and methods. The study involved 72 patients aged 25-55 suffering from atopic dermatitis for 2-30 years and with at least two relapses a year. The AD patients were assigned to the following groups depending on the SCORAD (iSc) index: Group 1: light form (iSc 50 points). The control group comprised 23 practically healthy subjects aged 25-35. The level of cytokines (IL-1 β, -4, -6, -8, -10, -12, -13, TNF-α and IFN-γ) in blood serum was determined based on the immune-enzyme assay method. Results. A trend to the increased production of anti-inflammatory cytokines (IL-4, -6, -10, -13) at the exacerbation stage and increased synthesis of pro-inflammatory ones (IFN-γ, TNF-α and IL-12) at the remission stage was observed in patients with atopic dermatitis, which confirms the dysregulation of reciprocal relationships between Th1 and Th2 lymphocyte subpopulations during the disease.

The authors present an algorithm of measurements of immunity values in patients with chronic dermatoses for evaluation of the destructive processes by the activity of leukocytic elastase.