Цель работы - определение уровня хемокинов, ассоциированных с фибробластами и кератиноцитами, в клетках кожи, выделеных из операционного материала при абдоминопластике у пациенток с нормальной массой тела и ожирением. Методика. Для исследования использовали фрагменты кожи пациенток с нормальной массой тела и ожирением. Степень ожирения оценивали по индексу массы тела (ИМТ) согласно международным критериям. ИМТ, принятый в исследовании за норму, составлял 19,8±1,7 кг/м2, для пациенток с ожирением - 38,3±4,1 кг/м2. Клетки выделяли путем ферментативной обработки коллагеназой II. Проводили иммунотипирование клеток моноклональными антителами меченными флуоресцентными красителями. Использовали антитела к хемокинам семейства CXCL (R&D systems) и CCL (Boeringer Ingelheim, Германия). Меченные флуоресцентными красителями иммунотипированные клетки анализировали на проточном цитометре FACSCalibur (Becton Dickinson, США) по программе SimulSet. Статистический анализ проводили по программе ANOVA. Результаты. Были проанализированы хемокины семейства CCL и CXCL, секретируемые кератиноцитами и фибробластами кожи. Показано, что в коже пациенток с ожирением повышен процент клеток, экспрссирующих рецепторы CXCR3, CXCR4, CCR3, CCR10, регулирующие секрецию хемокинов кератиноцитами и фибробластами кожи. При ожирении в клетках кожи повышен уровень хемокинов CXCL8, CXCL9, CXCL10, CXCL13, CCL24 и CCL27, имеющих отношение к развитию и поддержанию воспалительного процесса в коже, а уровень хемокинов CCL17, CCL22, CCL28 снижен, что указывает на нарушение хемокиновой и цитокиновой регуляции при ожирении и является основой для развития послеоперационных осложнений при абдоминопластике. Заключение. Полученные данные указывают на нарушение хемокиновой регуляции при ожирении, что способствует развитию послеоперационных осложнений при абдоминопластике. The aim of the study was to compare chemokine expression in skin cells obtained from patients with normal body weight and obesity after abdominoplasty. Methods. Obesity was determined by body weight index (normal, 19.8±1.7 kg/m2; obesity, 38.3±4.1 kg/m2). Only skin without subcutaneous fat was isolated from surgical material. The skin cells obtained from surgical material were stained with monoclonal antibodies to chemokines. Fluorescence of proteins and receptors was analyzed by flow cytometry. Statistical analysis was performed with ANOVA. Results. Keratinocyte- and fibroblast-derived chemokines of the CCL and CXCL families were analyzed. Percentage of cells expressing CXCR3, CXCR4, CCR3, and CCR10 receptors (regulators of chemokine secretion by keratinocytes and skin fibroblasts) was increased in the skin of obese patients. Expression of the pro-inflammatory chemokines, CXCL8, CXCL9, CXCL10, CXCL13, CCL24, and CCL27, was increased in skin cells from obese patients. Obesity was associated with reduced expression of the chemokines CCL17, CCL22, and CCL28 in skin cells. Conclusion. Chemokine regulation is disturbed in obesity, which may underlie the development of complications after abdominal surgery.
The study was aimed at assessing the role of chemokines in inflammatory changes in tissue following abdominoplasty. The levels of neutrophil-coupled chemokines and their receptors in the serum and blood cells, as well as in cells isolated from the subcutaneous adipose tissue sampled during abdominoplasty were compared in patients with obesity and normal body weight. The levels of chemokines CCL3, CCL3, and CCL5 in blood serum and expression of chemokine receptor CXCR2 and CXCR6 on blood neutrophils were significantly higher (p<0.05) in obese patients in comparison with patients with normal body weight. Elevated expression of chemokines CCL2, CCL3, CCL4, CCL5, CCL18, and CCL20 (p<0.05) was detected in subcutaneous adipose tissue cells isolated obese patients in comparisons with persons with normal body weight. These findings attest to favorable conditions for enhanced neutrophil migration to the adipose tissue in patients with obesity, which can promote leukocyte infiltration of the suture site after abdominoplasty and serves as additional risk factor for the development of postoperative complications associated with activity of neutrophil-derived proteolytic enzymes.
Цель. Изучение клеток иммунной системы полости рта у пациентов до проведения операции лифтинга лица, а также сопоставление этих данных с показателями, выявленными при осложнениях в послеоперационном периоде. Методика. Исследованы клетки иммунной системы полости рта 100 женщин (23-68 лет), которым перед операцией лифтинга лица проведено стоматологическое обследование и необходимое лечение при наличии кариеса дентина, клиновидного дефекта эмали зуба, хронического периодонтита или пульпита. Выделенные путем смывов десенной борозды клетки окрашивали моноклональными антителами и анализировали на проточном цитометре. Определяли уровень спонтанного и индуцированного апоптоза. Оценивали уровень фагоцитоза и генерацию супероксидного аниона нейтрофилами. Результаты. Показано, что хронические воспалительные заболевания зубов оказывают негативное влияние на состояние иммунных клеток ротовой полости, сопровождаются повышением генерации супероксидного аниона нейтрофилами, повышением уровня спонтанного и церамид-индуцированного апоптоза клеток десенной борозды. Заключение. Наличие хронической патологии зубов, даже после санации, оказывает негативное влияние на течение послеоперационного периода при проведении операции лифтинга лица, в частности, способствует увеличению времени заживления операционной раны, инфицированию раны с появлением очагов некроза в области операционного шва. The object. The study of the cells of the immune system of the oral cavity in patients before the operation of face lifting, as well as a comparison of these indicators with complications in the postoperative period. Methods. The immune cells from the oral cavity were studied in 100 women (23-68 years), who underwent a dental examination and necessary treatment if they had the dentin caries, wedge-shaped defect of tooth enamel, chronic periodontitis or pulpitis before the facial lifting operation. The immune cells have been isolated by a lavage of gingival sulcus around the damaged tooth. Results. It has been shown that chronic dental diseases made a negative contribution to the oral cavity immune cells. It has been accompanied by the elevated levels of superoxide originating from neutrophils as well as the increased levels of spontaneous and ceramide-induced apoptosis of immune cells isolated from the gingival sulcus. Conclusion. The presence of chronic pathology of teeth even in the case of the preoperative dental sanation has a negative impact on the postoperative period after face lifting, in particular, contributes to the lengthening of the surgical wound healing time, wound infection as well as the partial necrosis of suture.
В период ишемии оперируемого органа или ткани, вызванной прекращением доступа питательных веществ с кровью, активируется аутофагия, что позволяет клеткам сохранить жизнеспособность. Цель работы - определение экспрессии белков аутофагии Beclin-1, LC3-II, p62, ATG5в клетках кожи и подкожно-жировой клетчатки (ПЖК), выделенных из операционного материала при проведении лифтинга лица. Пациентки - женщины в возрасте 21-64 лет (n = 84). Материалы и методы. Из образцов кожи и ПЖК лица, иссеченных во время операции лифтинга, путем обработки коллагеназой получали суспензию клеток. Измерение уровня флуоресценции белков аутофагии в клетках проводили методом проточной цитометрии. Данные анализировали по алгоритму ANOVA - в зависимости от возраста пациенток. Результаты. Уровень экспрессии исследуемых маркеров аутофагии снижался с возрастом, достоверные различия (p < 0,05) получены для пациенток в возрасте старше 50 лет по сравнению с лицами моложе 30 лет. Выводы. Показано, что процессы аутофагии в клетках кожи и ПЖК активируются при лифтинге лица, но активность аутофагии достоверно снижается после 50 лет по сравнению с молодым возрастом. Также установлено сопряжение активности аутофагии с гипоксией и с изменением мембранного потенциала митохондрий в клетках ПЖК. Autophagy is known to be activated during organ or tissue ischemia induced by blood deprivation during surgery to keep the cells viable. Aim. To evaluate the expression of autophagy proteins, Beclin-1, LC3-II, p62, and Atg5 in cells isolated from the skin and subcutaneous fat excised from the face lifting surgical material. Patients. Women aged 21-64 (n = 84) were recruited. Methods. Cells were obtained from face lifting surgical materials using the collagenase treatment. The autophagy protein expression was analyzed using the flow cytometry. Statistics was performed using ANOVA based on the age of patients. Results. Expression of the studied autophagy markers was found to decrease with age; significant differences (p < 0.05) were obtained for patients older than 50 compared with those under 30. Conclusions. We demonstrated that autophagy was activated in cells from skin and subcutaneous fat during the face lifting. The autophagy protein expression was significantly reduced at ages older than 50 compared to the age under 30. The autophagy coupling with both hypoxia and changes in the mitochondrial membrane potential was also shown.
The object. The study of the cells of the immune system of the oral cavity in patients before the operation of face lifting, as well as a comparison of these indicators with complications in the postoperative period. Methods. The immune cells from the oral cavity were studied in 100 women (23—68 years), who underwent a dental examination and necessary treatment if they had the dentin caries, wedge-shaped defect of tooth enamel, chronic periodontitis or pulpitis before the facial lifting operation. The immune cells have been isolated by a lavage of gingival sulcus around the damaged tooth. Results. It has been shown that chronic dental diseases made a negative contribution to the oral cavity immune cells. It has been accompanied by the elevated levels of superoxide originating from neutrophils as well as the increased levels of spontaneous and ceramide-induced apoptosis of immune cells isolated from the gingival sulcus. Conclusion. The presence of chronic pathology of teeth even in the case of the preoperative dental sanation has a negative impact on the postoperative period after face lifting, in particular, contributes to the lengthening of the surgical wound healing time, wound infection as well as the partial necrosis of suture.
Цель работы - изучение взаимосвязи между уровнем хемокинов и интенсивностью воспалительного процесса в подкожно-жировой ткани (ПЖТ) у лиц с ожирением и нормальной массой тела. Задача работы - определение уровня экспрессии хемокинов, сопряженных с моноцитами/макрофагами, и их рецепторов в клетках ПЖТ, выделенных при проведении абдоминопластики. Пациенты. В период с 2013 по 2017 гг. в Клинике пластической и эстетической хирургии проведены операции абдоминопластики у 262 женщин, биологический материал которых использован в работе. Методы. Состав тела и процент жировой массы определяли методом биоимпедансного анализа. Из образцов ПЖТ из операционного материала выделяли клетки, окрашивали их меченными флуоресцеинами антителами к хемокинам и анализировали на проточном цитометре FACSCalibur по программе SimulSet. Статистический анализ проводили по программе ANOVA. Результаты. Показано, что наличие ожирения оказывает влияние на клеточный состав ПЖТ. Экспрессия хемокинов семейства CC, а также рецепторов хемокинов CCR1, CCR2 и CCR5 в ПЖТ у пациентов с ожирением достоверно выше, чем у пациентов с нормальной массой тела. Заключение. Различия в экспрессии хемокинов на клетках ПЖТ у пациентов с ожирением или с нормальной массой тела отражают функциональные особенности ПЖТ и могут оказывать влияние на развитие осложнений после проведения операции абдоминопластики. AIM: we study the relationship between chemokines and intensity of the inflammatory process in the subcutaneous adipose tissue (SAT) in individuals with obesity and normal body weight. Objective: we determined the expression levels of chemokines associated with monocyte/macrophages, as well as their receptors on the cells of SAT, that were obtained during abdominoplasty. Patients. In this work we have used the biological material of 262 women to whom has been performed an abdominoplasty in the Clinic of plastic and aesthetic surgery from 2013 to 2017 years. Methods. Body composition and the weight of body fat were determined by bioimpedance analysis. SATs have been obtained during abdominoplasty surgery. SAT cells were isolated followed by the staining with fluoresceine labeled antibodies which fluorescence was analyzed using a flow cytometer FACSCalibur according to the program SimulSet. Statistical analysis was carried out using ANOVA. Results. It has been shown that the progressing obesity may affect the SAT cellular composition. The expression of chemokines from CC family and its receptors (CCR1, CCR2 and CCR5) on cells from SAT were significantly higher in patients with obesity compared to the normal body weight patients. Conclusions. Differences in the chemokine expression on SAT cells between patients with obesity and with normal body weight may reflect the functional features of SAT itself and can modify the complication developments after abdominoplasty.