From the perspective of lncRNA MALAT1 regulating cholesterol metabolism in chondrocytes, this paper explores the effect and mechanism of Tougu Xiaotong Capsules(TGXTC) in delaying the degeneration of osteoarthritis. After one week of adaptive feeding, 48(8-week-old) C57BL/6 mice were randomly divided into a blank group(12 mice) and a model group(36 mice) by random number table method. The mice in the model group were anesthetized by inhalation of 5% isoflurane, and the OA model was induced by Hulth method. The experiment randomly divided the mice into a model group(12 mice), a drug-positive group(taururso-deoxycholic acid)(12 mice), and a TGXTC group(12 mice). The drug-positive group was given 500 mg·kg~(-1) taurodeoxycholic acid by intragastric administration. TGXTC group was given TGXTC 368 mg·kg~(-1) by gavage. The blank group and model group were given the same amount of normal saline for four weeks. After the intervention, the mice in each group were killed under anesthesia, and the knee cartilage tissue was separated and collected. The morphologic changes of knee cartilage were observed. The level of lncRNA MALAT1 in the cartilage tissue was detected by real-time PCR. The protein expressions of ABCA1, ApoA1, LXRβ, CHOP, and caspase-3 in mouse articular cartilage were detected by Western blot. Lentivirus-coated plasmid was used to transfect mouse chondrocytes with sh-MALAT1. The gene levels of lncRNA MALAT1 in mouse chondrocytes transfected with sh-MALAT1 were detected by real-time PCR. Western blot was used to detect the effect of TGXTC on the protein content of ABCA1, ApoA1, LXRβ, CHOP, and caspase-3 in thapsigargin(TG)-induced mouse chondrocytes after lncRNA MALAT1 knockdown. Flow cytometry was used to detect the effect of TGXTC on apoptosis of TG-induced mouse chondrocytes after lncRNA MALAT1 knockdown. The results of HE and saffranine O staining showed that compared with the model group, the structure of the cartilage layer was basically intact; the damage degree of joint structure was significantly improved, and the cartilage matrix was significantly enhanced by saffranine O staining in the TGXTC group and drug-positive group. Compared with the model group, the lncRNA MALAT1 level was significantly decreased in the TGXTC group and drug-positive group. Compared with the model group, the protein content of ABCA1, ApoA1, and LXRβ was significantly increased, while that of CHOP and caspase-3 in the TGXTC group and drug-positive group significantly decreased. Compared with the TG group, the lncRNA MALAT1 level in the TG+sh-MALAT1 group was decreased. The lncRNA MALAT1 level in the TG+sh-MA-LAT1+TGXTC group was increased compared with the TG+TGXTC group. Western blot results showed that compared with the model group, protein expressions of ABCA1, ApoA1, LXRβ, CHOP, and caspase-3 in the TGXTC group were significantly decreased, after lncRNA MALAT1 knockdown, the regulation and apoptosis of ABCA1, ApoA1, LXRβ, CHOP, and caspase-3 in TG-induced mouse chondrocytes were weakened by TGXTC. TGXTC can improve the disorder of cholesterol metabolism in OA chondrocytes and delay OA degeneration, which is closely related to the regulation of lncRNA MALAT1.

目的:从分子水平可视化探讨丹参和降香配伍在改善骨关节炎炎症微环境中的协同作用.方法:①从北京大学天然产物库中,检索180个丹参化学成分和119个降香化学成分,构建各自的化学成分数据集;从化学结构角度进行聚类分析,并计算两者的全局指纹相似度分值.②依托定量构效关系及主成分分析平台,分析丹参和降香化学成分数据集的化学空间.③以白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、基质金属蛋白酶1(Matrix Metallopeptidase 1,MMP-1)、MMP-3、MMP-9和MMP-13为改善骨关节炎炎症微环境的靶点,利用分子对接和生物网络等平台,研究其与丹参、降香中化学成分的相互作用,并构建丹参和降香的化合物-靶点网络,分析丹参和降香配伍在改善骨关节炎炎症微环境中的意义.结果:①对丹参和降香化学成分数据集进行聚类,发现丹参和降香化学成分数据集在第1、2、3、4、5、6、8、9、10类存在交集,但在第7类仅出现丹参化学成分;同时,对两个数据集的全局指纹进行比较,发现其相似度分值为0.637 5.②丹参和降香化学成分数据集在化学空间的后底部存在相近的分布.③丹参化合物-靶点网络显示,丹参的潜在活性化合物个数达到32个,其核心化合物为酚酸类成分,核心作用靶点为IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-1和MMP-9;降香化合物-靶点网络显示,降香中的潜在活性化合物个数达到64个,其核心化合物为黄酮类成分,核心作用靶点为IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-1、MMP-3和MMP-9.结论:从化学结构特征及化学空间分布看,丹参和降香存在相似之处,配伍后具有更多的潜在活性成分种类和数量、更广的化学空间分布,可通过对应的特定靶点和共同靶点在改善骨关节炎炎症微环境中相互作用发挥互补协同效应.即计算机模拟实现丹参和降香配伍协同改善骨关节炎炎症微环境作用的可视化分析.

目的 基于网络药理学探讨山慈菇治疗骨肉瘤的药效分子与药效机制,并采用分子对接模拟技术验证其潜在药效靶点.方法 选择TCMSP数据库和HERB数据库预测山慈菇的活性成分及相关靶点;GEO数据库筛选骨肉瘤差异表达基因;取骨肉瘤差异表达基因与山慈菇预测靶点的交集获得交集基因,Cytoscape 3.8.1软件构建山慈菇活性成分-骨肉瘤靶点的关联网络;交集基因导入STRING数据库构建PPI网络,Cytoscape 3.8.1软件拓扑分析筛选出山慈菇治疗骨肉瘤的核心靶点;基于R语言的Bioconductor软件合集对交集基因进行基因本体(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析;应用Auto Dock 1.5.6和Vina进行分子对接模拟活性成分与核心靶点的结合强度.结果 从TCMSP与HERB数据库筛选出山慈菇预测22个及其对应的靶点96个;从3个骨肉瘤芯片(GSE36001、GSE28424、GSE19276)中筛选出3178个骨肉瘤差异表达基因;活性成分的96个调控靶点和3178个骨肉瘤差异表达基因映射获得预测靶点43个.PPI拓扑分析获得4个核心靶点,即PTGS2、SRC、ESR1、CASP3;GO富集分析获得结果1518条,其中BP结果1419条,CC结果13条,MF结果85条;KEGG富集分析获得信号通路133条,主要涉及细胞凋亡、肿瘤坏死因子和P53等信号通路.分子对接模拟验证4个核心靶点和对应的9个山慈菇活性成分结合能力,获得结合能＜-5 kcal/mol的对接结果11对.结论 从分子水平揭示了山慈菇治疗骨肉瘤具有多成分、多靶点和多向药理学特征,为山慈菇治疗骨肉瘤的药效成分和靶点研究提供依据.

目的:观察荣筋拈痛方对膝骨关节炎大鼠软骨组织自噬的影响,探讨其防治膝骨关节炎的作用机制.方法:将24只SD大鼠按照随机分层法分为假手术组、模型对照组、荣筋拈痛方组,每组8只.除假手术组外,其他组采用改良Hulth法复制膝骨关节炎模型.给药12周后,从假手术组和模型对照组中随机抽取3只大鼠拍摄膝关节MRI,观察模型是否成功.采集大鼠膝关节组织,HE染色法观察软骨组织形态结构,采用Mankin病理评分对关节软骨进行组织形态学评分;免疫组织化学法观察软骨组织酵母自噬相关基因6同源物(Beclin1)及微管相关蛋白Ⅰ轻链3B(LC3B)的定位与表达.结果:MRI显示,假手术组关节间隙正常,关节面平整;模型对照组关节间隙增宽,关节软骨面不平整、局部缺损,结缔组织增生,骨赘形成.荣筋拈痛方组大鼠骨关节炎模型关节软骨的大体外观及HE染色均改善明显,Mankin软骨评分高于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.01).荣筋拈痛方组自噬蛋白Beclin1及LC3B表达均呈上升趋势.结论:荣筋拈痛方可能通过提高自噬相关蛋白Beclin1、LC3B的表达,改善软骨细胞状态,延缓关节软骨退变.

目的 基于lncRNA NEAT1和IRE1α/XBP1信号通路,探讨透骨消痛胶囊延缓膝骨关节炎(KOA)软骨退变的机制.方法 48只8周龄小鼠适应性喂养1周后,采用随机数字表法分为空白组12只、造模组36只,造模组动物经5%异氟醚吸入麻醉后,采用Hulth法诱导KOA模型,随机数字表法分为模型组12只、透骨消痛胶囊组12只和对照组12只.透骨消痛胶囊组予以透骨消痛胶囊 368 mg/kg进行灌胃;对照组使用牛磺熊去氧胆酸500 mg/kg进行灌胃;空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,连续4周.干预结束后,麻醉状态下处死各组小鼠,分离与收集膝关节软骨组织,Micro-CT观察小鼠膝关节软骨组织形态变化;Western blot检测关节软骨IRE1α/XBP1通路相关蛋白表达;qPCR检测软骨组织中lncRNA NEAT1表达水平.结果 与空白组比较,模型组半月板结构缺失,胫骨平台软骨面呈现凹凸不平状、伴有明显的骨赘增生,软骨组织IRE1α、XBP1、GRP78、CHOP蛋白含量、lncRNA NEAT1表达均显著升高(P＜0.05);透骨消痛胶囊组、对照组小鼠内侧半月板结构缺失,2组软骨组织的IRE1α、XBP1、GRP78、CHOP蛋白含量均显著降低(P＜0.05),lncRNA NEAT1表达水平均显著降低(P＜0.05).结论 透骨消痛胶囊可通过下调KOA小鼠关节软骨组织中lncRNA NEAT1水平,抑制软骨组织与内质网应激有关的IRE1α/XBP1通路蛋白表达发挥作用.

Endoplasmic reticulum stress (ERS) has been identified to be an important factor leading to chondrocyte apoptosis in osteoarthritis (OA). Previous studies have confirmed that Achyranthes bidentata polysaccharides (ABPS) can inhibit chondrocyte apoptosis; however, the mechanism of action of ABPS on chondrocyte ERS remains unclear. Thus in this study, we aim to investigate whether ABPS could inhibit OA-associated chondrocyte apoptosis by regulating ERS, especially by observing the relationship between the lncRNA NEAT1 and miR-377-3p, to explore further the protective mechanism of ABPS in OA. In vitro and in vivo experiments showed that ABPS inhibited chondrocyte ERS by regulating the expression of lncRNA NEAT1 and miR-377-3p. Moreover, both lncRNA NEAT1 silencing and miR-377-3p inhibition could attenuate the therapeutic effect of ABPS on ERS. Dual-luciferase results indicated that miR-377-3p targets the lncRNA NEAT1 gene in mouse chondrocytes. Therefore, we concluded that ABPS could inhibit thapsigargin (TG)-induced chondrocyte ERS through the lncRNA NEAT1/miR-377-3p axis.

目的:探讨荣筋拈痛方调控NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路减轻软骨细胞焦亡,改善骨关节炎炎性病变的作用机制.方法:将二代软骨细胞随机分为正常组、模型组[脂多糖(LPS)+三磷酸腺苷(ATP)]、荣筋拈痛方组(LPS+ATP+荣筋拈痛方)和抑制剂组(LPS+ATP+MCC950)oHoechst 33342/PI双染检测软骨细胞膜的完整性;双转盘活细胞共聚焦实时成像分析系统观察NLRP3和caspase-1的定位与表达;ELISA检测白细胞介素(IL)-1 β和IL-18的水平;RT-PCR检测NLRP3、caspase-1、GSDMD、Ⅱ 型胶原蛋白(collagen Ⅱ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)mRNA水平;Western Blot检测NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、collagen Ⅱ、aggrecan、基质金属蛋白酶(MMP)-3和MMP-13蛋白表达.结果:与模型组比较,荣筋拈痛方可降低因细胞膜完整性丧失而染上的PI红色荧光强度;降低NLRP3和caspase-1蛋白表达的绿色荧光强度(P＜0.01);降低软骨细胞上清液中炎症因子IL-1 β和IL-18水平(P＜0.01);降低NLRP3、caspase-1、GSDMD mRNA水平(P＜0.05,P＜0.01),提高collagen Ⅱ和aggrecan mRNA水平(P＜0.01);降低NLRP3、pro-caspase-1、caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、MMP-3和MMP-13蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01),提高collagen Ⅱ和aggrecan蛋白表达(P＜0.05).结论:荣筋拈痛方可通过调控软骨细胞NLRP3/caspase-1/GSDMD途径,减轻因细胞焦亡而导致的炎症反应,改善骨关节炎炎性病变.

目的:建立一种降低HPLC-ELSD国产流动相试剂(甲醇、乙腈、二氯甲烷等)噪音的方法.方法:将流动相试剂置蒸馏装置中进行常压蒸馏、水浴加热,水温控制在高出被蒸馏试剂沸点5-20℃,再将馏出液经有机滤膜过滤、超声波脱气.结果:经本法处理后的国产流动相试剂ELSD噪音得到明显降低,达到正常检测的要求.结论:该方法简单、有效、可明显降低HPLC-ELSD国产流动相试剂的噪音.

目的:探讨人参在治疗骨关节炎(OA)中发挥抗炎镇痛作用的可行性.方法:从中药系统药理数据库及分析平台(TCMSP)中筛选人参中口服生物利用度≥30％和类药性≥0.18的成分,从活性化合物专家网站中检索OA疼痛密切相关白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的抑制剂,在Discovery studio(DS)模拟平台,分别建立人参和抑制剂分子数据集;在定量构效关系(DS QSAR)模块下,计算和分析两分子数据集的化学空间,两数据集中的化合物在空间上距离越近,代表具有相似作用的可能性越大.以IL-1β、IL-6、TNF-α为OA抗炎镇痛的治疗靶点,从蛋白质数据库(RCSB PDB)中下载其与配体的复合物结构,代码分别为6Y8M、1ALU和2AZ5,在DS LigandFit中,研究人参分子数据集中化合物与抗炎镇痛靶点IL-1β、IL-6、TNF-α之间的相互作用,从中筛选出比蛋白与各自原配体作用的DOCK-SCORE高的化合物,视为人参抗炎镇痛的活性成分.结果:人参分子数据集含有化学成分22个,抑制剂分子数据集含有化学成分26个;在三维化学空间中,人参和抑制剂分子数据集中化合物均聚集在后背部,且距离较近,具有相似的化学空间,意味着可能具有相似的作用;以IL-1β、IL-6和TNF-α与各自原配体的DOCK-SCORE为阈值,从人参中筛选出抗炎镇痛的潜在活性化合物有11个,分别为脱氧三尖杉酯碱(Deoxyharringtonine)、石竹胺(Dianthramine)、苏齐内酯(Suchilactone)、花生四烯酸(Arachidonate)、山柰酚(Kaempferol)、人参皂苷Rg5(Ginsenoside Rg5)、人参皂苷Rh2(Ginsenoside Rh2)、五味子酯乙(Gomisin B)、苯代南蛇碱(Celabenzine)、菊黄质(Chrysanthemaxanthin)和5-苯甲酰基-4-乙酰基锥序南蛇藤呋喃四醇(Malkangunin).结论:综合分析人参的化学空间及其存在抗炎镇痛的活性成分,认为人参在治疗OA方面具有抗炎镇痛的作用,本研究可为健脾法在OA临床治疗中的应用提供新依据.

目的 基于PERK通路探讨荣筋拈痛方(RJNTD)对毒胡萝卜素(TG)诱导的软骨细胞内质网应激反应的抑制作用.方法 将30只4周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠处死后,体外分离双膝软骨细胞置于低糖DMEM培养基培养,经Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色法鉴定后将软骨细胞分成空白组、对照组、模型组和中药组.空白组常规培养4 h,对照组常规培养4 h后更换300μg/mL RJNTD培养液培养12 h,模型组用25μmol/L TG培养液培养4 h后改为常规培养,中药组用25μmol/L TG培养液培养4 h后更换300μg/mL RJNTD培养液培养12 h.干预后采用Real-time PCR检测各组软骨细胞中miRNA-377-3p相对表达水平;Western blot检测各组软骨细胞中内质网降解增强子(EDEM1)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、转录激活子4(ATF4)、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)与DNA损伤诱导基因153(GADD153)蛋白表达水平.结果 对照组各指标与空白组比较均无统计学意义(P均>0.05);与空白组比较,模型组及中药组miRNA-377-3p相对表达水平显著降低(P<0.05),且中药组较模型组降低更不明显(P<0.05);与空白组比较,模型组及中药组EDEM1、PERK、ATF4、BIP、GADD153蛋白表达水平均升高(P均<0.05),且中药组上述各指标较模型组升高更不明显(P均<0.05).结论 RJNTD可通过PERK通路抑制内质网应激反应,进而发挥延缓TG诱导的软骨细胞退变作用,其潜在作用机制可能与调节miRNA-377-3p相关.

目前,治疗类风湿关节炎的优选策略是控制炎症与其他病理反应,缓解其疼痛不适等临床症状.槲皮素具有抑制炎症介质的表达和分泌、抗氧化、免疫调节、抑制基质金属蛋白酶的生成,以及抑制滑膜细胞增生等多种生物活性,可抑制类风湿关节炎的病理进程.槲皮素在预防和治疗类风湿关节炎上具有广阔的应用和发展前景.

目的:探讨独活寄生汤治疗大鼠膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制.方法:从66只大鼠中随机选取48只,采用改良Hulth法建立大鼠KOA模型,随机选择3只正常大鼠和3只建模大鼠进行鉴定.证实建模成功后,将剩余的15只正常大鼠纳入正常对照组,采用随机数字表将剩余的45只KOA模型大鼠分为KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组,每组15只.正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠均按每天10 mL·kg-1分别以0.9％生理盐水、0.9％生理盐水、独活寄生汤(浓度为0.93 g·mL-1)、盐酸氨基葡萄糖溶液(浓度为0.015 g·mL-1)灌胃,连续干预12周.12周后,切取大鼠双侧胫骨近端和股骨下端的软骨组织.采用实时定量PCR检测大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)H19及聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)mRNA的表达量,采用蛋白印迹法检测大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan、CollagenⅡ的蛋白表达量.结果:①大鼠饲养结果.KOA模型组大鼠因肺栓塞死亡2只,独活寄生汤治疗组大鼠因腹泻死亡1只,盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠因肺栓塞死亡1只.②大鼠胫骨近端软骨组织中KOA相关基因的RNA表达结果.正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、lncRNA H19、Aggrecan mRNA、CollagenⅡmRNA的表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=83.050,P=0.000;F=436.003,P=0.000;F=129.212,P=0.000;F=135.844,P=0.000).KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、Aggrecan mRNA、CollagenⅡmRNA的表达量均低于正常对照组(miR-675-3p:P=0.000;P=0.003;P=0.002;Aggrecan mRNA:P=0.000;P=0.000;P=0.000;CollagenⅡmRNA:P=0.000;P=0.000;P=0.000);KOA模型组大鼠胫骨近端软骨组织中lncRNA H19的表达量低于正常对照组(P=0.002),独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中lncRNA H19的表达量与正常对照组比较,差异无统计学意义(P=0.058,P=0.069);独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、Aggrecan mRNA、CollagenⅡmR-NA的表达量均高于KOA模型组(miR-675-3p:P=0.000;P=0.000;Aggrecan mRNA:P=0.000;P=0.000;CollagenⅡmRNA:P=0.000;P=0.000);独活寄生汤治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、lncRNA H19、Aggrecan mRNA、CollagenⅡmR-NA的表达量与盐酸氨基葡萄糖治疗组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.922;P=0.778;P=0.857;P=0.904).③大鼠股骨远端软骨组织中软骨组成相关基因的蛋白表达结果.正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组的大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=58.118,P=0.002;F=16.625,P=0.001).KOA模型组、独活寄生汤治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan的蛋白表达量均低于正常对照组(P=0.003;P=0.004),盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan的蛋白表达量与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.078),KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中CollagenⅡ的蛋白表达量均低于正常对照组(P=0.000;P=0.028;P=0.018),独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和Colla-genⅡ的蛋白表达量均高于KOA模型组(Aggrecan:P=0.025;P=0.034;CollagenⅡ:P=0.003;P=0.004),独活寄生汤治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量与盐酸氨基葡萄糖治疗组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.999;P=0.775).结论:独活寄生汤治疗大鼠KOA的作用机制,可能与其能够上调miR-675-3p、lncRNA H19的表达进而促进Aggrecan、CollagenⅡ的表达有关.

目的 采用计算机模拟技术,从活性成分的角度探讨当归活血和止痛作用及其关联性.方法 ① 从中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)中,检索当归的化学成分125个,以凝血酶(Thrombin)、血栓素A2受体(TXA2R)、纤溶酶原激活物抑制物1型(PAI-1)、凝血因子Ⅸa(FactorⅨa)为活血功效的靶点,以p38、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、磷酸二酯酶4A(PDE4A)为止痛功效的靶点,在蛋白质数据库(RCSB PDB)中下载有配体结合的蛋白复合物结构,代码分别为1AWH、6IIV、7AQF、3LC3、1OUY、2AZ5、4NOS和3TVX;利用分子对接技术,筛选大于蛋白复合物结构中的原配体的DOCK-SCORE高的化合物,视为当归中活血功效和止痛功效的活性成分.② 构建当归活血功效和止痛功效的活性成分数据集,提取其全局指纹,计算其Tanimoto相似系数来反映两活性成分数据集的化学结构特征相似度.当相似系数值为0时,表示两数据集间没有相同的分子结构片段;当系数为1时,则表示有相同的字节编码,也就表示有相同的分子结构片断,即系数越接近1,代表两数据集在分子结构特征方面的关联性越好.③ 利用Cytoscape生物网络平台,构建当归活性成分与功效靶点相互作用的可视化网络,选择度值≥3的节点,视为网络中的重要活性成分和靶点.结果 ① 从当归化学成分中筛选出8个活血功效的活性成分和17个止痛功效的活性成分,其中,活血和止痛功效的共同活性成分有6个,主要属于苯肽类、磷酯类、生物碱类、有机酸类等,75％的活血功效的成分具有止痛作用,但仅约35％的止痛功效的成分具有活血作用.② 当归活血和止痛功效活性成分数据集全局指纹的Tanimoto相似系数为0.7736,显示两个功效活性成分之间在结构特征上具有很好的关联性.③ 当归活性成分-靶点网络显示了活性成分与功效靶点之间存在"一对多,多对一"的特点,活血功效的重要活性成分为异汉防己碱、欧当归内酯A和阿魏酸松柏酯,重要靶点为Thrombin、FactorⅨa和PAI-1;止痛功效的重要活性成分为欧当归内酯A和阿魏酸松柏酯,重要靶点为PDE4A、iNOS和TNF-α.结论 从活性成分的角度,计算机模拟直观显示当归的活血和止痛作用,且存在关联性;同时,活血的活性成分在很大程度上可达到止痛的功效,且当归活血功效与止痛功效的成分可通过与既能活血又能止痛活性成分的组合发挥协同作用,为理解"活血止痛"的内在联系提供依据.

膝骨关节炎的治疗以改善临床症状、延缓疾病进展为主要策略.升麻素苷具有抗炎、镇痛、解热,以及抗血小板聚集等多种药理活性作用,可以通过抑制炎症反应,抗氧化作用,抑制基质金属蛋白酶的表达等,缓解膝骨关节炎的炎性症状,干预其病理进程.升麻素苷对细胞周期的调节作用,对核转录因子-κB信号通路和丝裂原活化蛋白激酶信号通路调控机制,尚有待进一步研究.

目的 观察独活寄生汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨LncRNA GAS5/miR-21及其下游MMP-3、MMP-9、MMP-13和ADAMTS-5的影响,探讨独活寄生汤治疗KOA的作用机制.方法 2月龄SD大鼠66只,适应性喂养1周后,随机分为正常组(18只)和造模组(48只).应用改良Hulth法复制大鼠KOA模型,造模2周后,从正常组和造模组中随机抽取3只大鼠进行小动物MRI观察,鉴定造模是否成功.造模成功后,采用抽签法分为模型组、治疗组和西药组各15只.正常组和模型组给予0.9％生理盐水灌胃,治疗组给予独活寄生汤灌胃,西药组给予盐酸氨基葡萄糖胶囊灌胃.治疗12周后,切取右侧胫骨平台软骨组织,Real-time PCR法检测LncRNA GAS5、miRNA-21、MMP-3、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-5基因表达.结果 Real-time PCR结果显示,与模型组相比,独活寄生汤和盐酸氨基葡萄糖胶囊均能抑制LncRNA GAS5、MMP-3、MMP-9、MMP-13、ADAMTS-5基因表达(P<0.05),促进miR-21基因表达(P<0.05),但2组间无统计学意义(P>0.05).结论 独活寄生汤可能通过调控LncRNA GAS5/miR-21,延缓软骨细胞外基质降解,起到治疗KOA的作用.

"福九味"是福建省中药材产业协会宣布的九大闽产药材,具有区域发展的特色和优势,然而以"福九味"为主要品牌的中药尚缺乏系统的研究.文章通过简述"福九味"的研究现状及发展机遇,论述加强闽产药材"福九味"现代化研究的必要性,提出研究的思路与方法,建议组建由福建省高等院校、科研院所和企业合作牵头的多学科人员组成的研究团队和联合实验室,开展"福九味"药材的优良品种选育、生态种植技术、化学成分、质量控制、治病机理、大健康产品、"互联网+福九味"服务系统等方面的基础研究,以提升"福九味"品牌的市场竞争力和社会认可度,这对于推动"福九味"的现代化进展具有重要意义.

Objective:To construct the active component target of Hindu datura and the disease target of rheumatoid arthritis by using network pharmacology, to predict the specific molecular signal and pathway of hindu datura in the treatment of rheumatoid arthritis, and to analyze its potential therapeutic target and molecular mechanism.Methods:All the chemical components of hindu datura were summarized and screened through Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform(TCMSP)database, retrieval was performed with the preset oral bioavailability(OB)≥30%and drug like(DL)≥0.18.Uniprot database was used to screen the entire correlation basis of the effective chemical compound.After screening the disease target with"rheumatoid arthritis"as the retrieval word using GeneCards and OMIM database, the superimposed target area between the drug target of hindu datura and the disease target of rheumatoid arthritis was summarized and analyzed, and it could be used as the prediction target gene of hindu datura for treating rheumatoid arthritis.Network targets were constructed and analyzed for the exported data based on Cytoscape 3.7.1 software and STRING 7.8 database.Finally, GO functional enrichment analysis and KEGG signal pathway analysis were performed to further screen the main targets and signal pathways.Results:①Through screening and analysis, 27 effective compounds, 318 corresponding target genes and 125 predicted target genes were obtained for the treatment of rheumatoid arthritis.②The core genes in PPI network mainly included JUN, AKT1, RELA, MAPK1, etc.③GO functional enrichment analysis showed that the biological process(BP)for the treatment of rheumatoid arthritis by hindu datura mainly involves response to lipopolysaccharide, response to lipopolysaccharide, response to molecule of bacterial origin, response to metalion, response to oxidative stress, response to steroid hormone, cellular response to oxidative stress, reactive oxygen species metabolic process, response to oxygen levels, etc..The cell component(CC)consisted of membrane raft, membrane region, plasma membrane raft and presynaptic membrane; molecular functions(MF)mainly involved the nuclear receptor activity, transcription factor activity(direct ligand regulated sequence-specific DNA binding), steroid hormone receptor activity, cytokine receptors, cytokine activity, DNA-binding transcription activator activity, RNA polymeraseⅡtranscription factor binding, kinase regulator activity, receptor ligand activity, etc.The analysis of KEGG signaling pathway showed that the obvious pathway of hindu datura in the treatment of rheumatoid arthritis may involve IL-17 signaling pathway, TNF signal pathway, HIF-1signalpathway, Toll-like receptor signal pathway, etc.Conclusion:The potential mechanism of hindu datura for the treatment of rheumatoid arthritis is to exert anti-inflammatory, analgesic and antioxidant effects, which involve a number of interactive signal pathways.

细胞焦亡、铁死亡是区别于传统细胞凋亡、坏死、自噬的两种新型细胞程序性死亡方式,两者具有不同的生物学特征,对骨关节炎软骨基质稳态的调控方式、作用特点亦有区别.通过细胞焦亡、铁死亡对骨关节炎软骨基质稳态的影响及可能作用途径进行初步探讨,为进一步防治骨关节炎开辟新方向.

目的:基于核转录因子-κB(NF-κB)炎症相关信号通路,观察乌头汤水提物对脂多糖(LPS)诱导体外培养软骨细胞炎症模型的影响.方法:①制备乌头汤水提物;②分离、培养软骨细胞;③噻唑蓝(MTT)法检测乌头汤对LPS诱导软骨细胞活性的影响;采用Western Blot法检测NF-κB p65、IκB激酶复合物(IKK)、磷酸化核因子 κB抑制蛋白(pIκB)含量表达.结果:①MTT实验结果显示,乌头汤水提物对LPS诱导软骨细胞的最佳干预时间和浓度分别为24 h和150μg?mL-1;②Western Blot检测结果显示,乌头汤水提物100μg?mL-1组、150μg?mL-1组、200μg?mL-1组对LPS诱导的软骨细胞干预24 h后,可调节与炎症相关的NF-κB p65、IKK、pIκB含量表达,尤其以乌头汤水提物150μg?mL-1组变化显著(P<0.01).结论:乌头汤通过降低LPS诱导的软骨细胞中与炎症相关的NF-κB途径调节因子含量表达,发挥抗炎作用.