目的 考察抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)对四氯化碳(CCl4)所致的大鼠急性肝损伤的保护机制研究.方法 将4～6周龄的SPF级SD雄性大鼠随机分为A、B、C三组,分别为模型组、对照组和NAC治疗组.本实验制备经典CCl4大鼠急性肝损伤模型,通过腹腔注射浓度为10％的CCl4橄榄油溶液10ml/kg建立SPF级SD大鼠急性肝损伤的模型,CCl4注射前30 min、给药后6、12h分别给腹腔注射等体积生理盐水,共三次.通过生化仪器检测血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血清碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清总胆红素(TBil)、白蛋白(ALB)、谷氨酸脱氢酶(GLDH)、谷氨酰转肽酶(GGTP)、血清铁、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平.留取每只大鼠肝脏相同部位,4％多聚甲醛固定,进行石蜡包埋,石蜡切片,每组织切1张,并进行HE染色及全景扫描.观察肝组织病理学变化.结果 NAC治疗组的GLDH水平低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.01);NAC治疗组的血清铁与SOD水平高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.000 1);NAC治疗组的TBil、MDA水平低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.000 1).NAC治疗组能够降低模型组大鼠血清中GLDH水平,增加肝组织SOD的水平,降低肝组织TBil和MDA水平,可减少肝细胞坏死.结论 NAC通过抗氧化应激途径,能够有效改善CCl4所致大鼠急性肝损伤,对肝损伤有积极作用.

目的 了解深圳市坪山区健康体检人幽门螺杆菌(Hp)感染特点,为开展健康管理提供参考.方法 采用13C呼气试验检测985名健康体检者是否感染Hp.结果 在985名体检者中,按年龄分为A、B、C、D、E共5组.检出Hp阳性386例,感染率为39.2％,其中男性Hp阳性222例,感染率40.6％,女性Hp阳性164例,感染率37.4％;A组感染率(男性35.1％、女性33.9％),B组感染率(男性42.9％、女性28.6％),C组感染率(男性42.7％、女性41.7％),D组感染率(男性37.0％、女性49.3％,E组感染率(男性35.7％、女性57.7％).男性30～39岁感染率最高(42.9％).女性30～39岁感染率最低(28.6％),40岁以后逐步增高,50～59岁感染率达到49.3％;30～39岁时,男性感染率显著高于同年龄段女性,而50～59岁人群,女性感染率高于同年龄段男性12.3％.结论 深圳市坪山区体检人群Hp感染率与年龄、性别有关.50岁以上人群,女性感染率高于同年龄段男性的原因,有待于大样本流行病学和分子生物学研究.

目的 筛选肝细胞癌(HCC)组织表达下调蛋白,探索生物标志物.方法 采用在中国人民解放军某三甲医院8例住院患者HCC组织及癌旁组织标本,使用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)蛋白标记技术和液相串联质谱分析对这些标本进行蛋白表达水平研究.结果 共筛选出下调蛋白71个,结合蛋白覆盖度、可信度及文献,发现蛋白谷胱甘肽转移酶(GSTM1)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、细胞色素氧化酶(CYP)2C8、CYP2A6、氨基酰化酶1(ACY1)明显下调.结论 HCC组织下调蛋白对该病的诊断、预后判断有重要价值,下调蛋白迫切需要大样本进行验证,并开展关键蛋白机制研究,为HCC的防治提供新的信息.

目的 探讨原发性肝癌(PLC)患者外周血中环状RNAs(circRNAs)作为PLC分子标志物的临床诊断价值.方法 利用circRNAs微阵列芯片技术检测4例PLC患者(PLC组)和4例健康对照者(对照组)外周血circRNAs的表达谱,并进行组间差异分析,基因本体/基因功能(GO/KEGG)分析差异表达的circRNAs明显富集的潜在功能和信号通路.结果 与对照组比较,PLC组中共有26种circRNAs具有差异表达,包括上调的14种circRNAs和下调的12种circRNAs,亲本基因为:NFATC3、UBQLN1、SKA3、OAT、DENND4A、MGEA5、N4BP2L2、MKLN1、RANBP9、PICALM、SPECC1、LRP5、FAM64A、RPS8、FLI1、PCNXL2、RPL13、LINC00340、KIF26B、WBSCR17、NUP214、GPI、GRB10.GO/KEGG分析发现,亲本基因多涉及转录因子活性、RNA转运RT及通过内质网蛋白质加工、泛素介导的蛋白质水解和参与cGM P-PKG信号通路等功能.结论 PLC患者外周血存在明显差异表达的circRNAs,其亲本基因可能参与PLC复杂的发病机制.

已有大量研究发现了炎症与肾结石形成的相关性.炎症在草酸钙结石的形成过程中发挥了作用,这是由于尿液中的草酸和草酸钙晶体成分可引起上皮细胞损伤,进而导致炎症的发生.本文综述与肾结石形成相关的一些炎性细胞因子研究进展,并提出存在的一些问题和进一步的研究方向.

胃癌是消化道常见的恶性肿瘤之一,也是我国致死率最高的四大癌症之一,其发病机制仍是当今人类探索的热点之一.染色质三维构象的变化能在一定程度上影响正常基因的表达和功能,进而诱导疾病的发生发展.为加深对胃癌发生机制的理解,本文从细胞染色质三维构象角度,探讨其与胃癌发生发展之间的关联,同时展望了细胞染色质三维结构在胃癌临床诊治中的应用前景.

目的 应用同位素相对标记与绝对定量技术(iTRAQ)分析支原体肺炎患儿血清蛋白,筛选出差异蛋白并行其功能分析.方法 采用强阳离子交换色谱分析法对8种不同同位素标记的iTRAQ和液相色谱法以及串联质谱分析支原体肺炎组(MPP组)和健康对照组血清蛋白并通过Mascot软件分析和GO分析表达差异的蛋白.结果 与对照组相比,MPP组中共鉴定出有定量信息的蛋白质66个,包括52个上调蛋白和14个下调蛋白.生物信息学分析显示差异表达的蛋白主要参与急性期反应、急性炎症反应、氧气输送、空气运输、过氧化氢分解过程、细胞氧化解毒、凝血、及细胞解毒等过程,这些表达差异的蛋白中选择6个显著表达差异作为候选蛋白,分别是上调蛋白SAA、CRP、HBB、APOM和下调蛋白APOC3、GPX3.结论 本研究发现这6种蛋白在小儿支原体肺炎过程中发挥重要作用,可能作为该病潜在的临床筛查生物标志物.

目的 探讨应用同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)筛选的相关差异蛋白在重症肺炎患儿并心肌损害和心力衰竭诊断中的临床价值,为临床诊治提供参考依据.方法 通过强阳离子交换色谱分析法的8种不同同位素标记的iTRAQ和液相色谱法以及串联质谱分析重症肺炎患儿(观察组)和健康儿童(对照组)血清蛋白.通过Mascot软件分析和GO分析表达差异的蛋白.结果 与对照组相比,观察组中共鉴定出有定量信息的蛋白质89个,包括61个上调蛋白和28个下调蛋白.生物信息学分析显示差异表达的蛋白主要参与急性期反应、氧运输活动及酶催化等过程,这些表达差异的蛋白中选择5个显著表达差异作为候选蛋白,分别是CRP、SAA、PI16、BLVRB、G3P.结论 本研究发现这5种蛋白在小儿重症肺炎并发心肌损害和心力衰竭过程中发挥重要作用,可能作为该病潜在的临床筛查生物标志物.

目的 筛选IgA肾病患者的DNA N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenine,6mA)异常甲基化谱,探讨IgA肾病的发病机制,为其诊断和治疗寻找新靶标.方法 采用N6-腺嘌呤甲基化免疫共沉淀高通量测序技术(N6-methyladenosine immunoprecipitation sequencing,6mA-IPSeq)检测10例IgA肾病患者和10例健康人全基因组的6mA水平,筛选出差异的DNA甲基化谱,通过基因本体功能注释、富集分析和KEGG信号转导通路富集分析,初步对IgA肾病患者基因甲基化情况进行分析.结果 共检测IgA肾病组中6mA位点61465个,主要分布在内含子上,其中上调基因2550个,下调基因1563个.生物信息学分析结果提示,差异基因组主要参与线粒体呼吸链复合体Ⅳ、多囊肾蛋白复合体、核常染色质、细胞器内膜等组成;主要涉及调节肾小管和上皮细胞形态发生、ATP生物合成、细胞周期等生物过程;IgA肾病差异基因在胞吞通路富集程度最高,该通路中MHC、TGB1、PIP5K、PLD1、RAB、CLB等基因6mA表达水平显著下调.结论 IgA肾病的发生、发展可能与胞吞功能失调有关.

Objective:Using isobaric tags for relative and absolute quantification (iTRAQ) technology to analyze the proteins in serum of β-thalassaemias and find the differentially expressed proteome.Methods:Analyzing the total proteins in serum samples from patients with β-thalassaemias and samples of healthy controls by using eight-plex iTRAQ added with strong cation exchange choematography and liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry.The differentially expressed proteins were identified by Mascot and GO.Results:A total of 58 differentially expressed proteins were identified,including 49 proteins were up-regulation and 9 proteins were down-regulation.Bioinformatics analysis revealed that differential expression proteins were mainly related to the blood coagulation Coagulation,hemostasis,wound healing,response to wounding,regulation of body fluid levels,acute inflammatory response,vesicle-mediated transport,platelet activation,and platelet degranulation process.Among of them,there were 5 proteins significant differentially expressed,including CRP,SAA1,HBA,FBLN1,and HRG.Conclusion:This study found that 5 kinds of protein in children with mycoplasma pneumonia play an important role in the process,promisingly as the disease clinical screening of potential biomarkers.

采用静态法从10种大孔树脂中筛选纯化银杏叶黄酮的最佳树脂,并通过动态吸附考察最佳大孔树脂的吸附性能和最优洗脱参数,同时研究银杏叶黄酮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性.确定LX-68大孔树脂纯化银杏叶黄酮的最佳工艺条件为:提取液pH值为4.0,上柱流速为2 BV·h-1,先以4 BV 10％乙醇洗脱杂质,再用70％乙醇洗脱,洗脱流速为3 BV·h-1.在此条件下,银杏叶提取物总黄酮含量达27.3％.纯化的银杏叶黄酮提取物具有餐后降血糖的作用,作用优于阿卡波糖,表明银杏叶黄酮提取物是一种优质的降血糖产品.

目的:研究纤维素酶/果胶酶/半纤维素酶复合酶酶解提取银杏叶中黄酮类化合物的最佳工艺条件.方法:以黄酮得率为考察指标,通过单因素试验及正交试验确定最佳提取工艺.结果:复合酶法提取银杏叶总黄酮的最佳工艺条件为酶用量0.4％,酶解温度40℃,酶解时间120 min,pH 5.5,纤维素酶/果胶酶/半纤维素酶的配比2:3:1时对银杏叶的细胞组织具有较强的破壁力;与不加酶相比,总黄酮提取率提高了36.6％.结论:采用复合酶法,可以降低酶的使用量,提取条件温和,提高了总黄酮提取率.