2019年10月21日—12月中旬,江苏某动物园小熊猫(Ailurus fulgens)出现疑似犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)感染,用犬瘟热胶体金试纸条检测,结果为弱阳性,共12只小熊猫死亡.对病死小熊猫剖检,可见明显的肺充血、出血,肝肿大,心内膜出血,胃肠黏膜出血.采集2只发病小熊猫尾静脉血送检,RT-PCR检测犬瘟热核酸为阳性,用Vero-CD150细胞对样品进行病毒分离,在Vero细胞上连续传代,通过RT-PCR检测,病毒核酸仍然为阳性,最终分离到2株犬瘟热病毒,分别命名为SZ2019CDV1H和SZ2019CDV2H.扩增H基因并测序,与GenBank已公布的基因序列进行同源性比较和遗传发生分析,SZ2019CDV1H株与SZ2019CDV2H株的基因同源性为97.2％.在遗传发生关系树上,SZ2019CDV1H株为Africa毒株,SZ2019CDV2H株为Eu-ropean wildlife毒株,分属于不同的遗传分支.

为验证一种新的CRISPR分型方法——CSST分型方法分型沙门氏菌的可行性,分别采用传统CRISPR与CSST两种分型方法,对20株临床肠道沙门氏菌分离株进行分型.结果显示:CSST分型方法同传统CRISPR分型方法分型沙门氏菌的结果完全一致,均将20株临床肠道沙门氏菌菌株分成了15种亚型,其中CR4/CT4和CR9/CT9为最优势CR/CT型,而其他CR/CT型均呈零星分布.结果表明,CSST分型方法可用于肠道沙门氏菌分型,且比传统CRISPR分型方法更简洁、方便.本研究为沙门氏菌的流行病学溯源提供了重要技术方法.

从池塘中分离、纯化了1株具有极强溶血活性的革兰氏阴性杆菌BB2,在TSA培养基上菌落呈灰色、半透明圆形,经16S rRNA基因序列分析确定为色杆菌属,但无法确定到种;进一步全基因组测序结果表明,该菌株与GenBank中唯一的1株稻根色杆菌基因组同源性最高,但生物学特性又不一致.文献逆索发现其命名为稻根色杆菌主要是由于其分离于水稻根部,这对分类造成了困惑.最终依据细菌形态特征、生理生化特性、16S rRNA和全基因组序列分析及文献分析等综合信息,确定分离菌BB2为溶血色杆菌,这提醒研究者们在细菌鉴定时应谨慎使用GenBank数据序列数据,一定要对相关参考文献进行全面认真研读,获取必要的证据,为最终分类提供科学依据.本研究也为进一步研究该分离株的生物学特性和应用提供了参考和基础.

为了明确致猫呼吸道症状的病原菌及该菌的病原特征及其基因组功能信息,本研究对采集的3例发病猫的鼻腔拭子进行病原菌的分离、纯化及生化和16S rRNA基因的PCR鉴定;采用纸片法检测分离菌的药物敏感性及其对小鼠的致病性.并对其中一株分离菌进行基因组的生物信息学分析,利用不同的数据库对基因组编码的蛋白进行功能注释以及耐药和毒力相关基因的预测.细菌的分离及鉴定结果显示:分离出3株支气管败血波氏杆菌(Bb).药敏试验结果显示,分离菌对丁胺卡那、卡那霉素、四环素、氟苯尼考、恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星和氯霉素敏感,对氨苄西林、链霉素、利福平、磷霉素和呋喃唑酮耐药;致病性试验结果显示,3株分离的Bb对小鼠均有一定的致病性,且浓度越高致病性越强.基因组分析结果显示,其中一株菌基因组大小为4520328 bp,GC％含量为68.12％,含有4690个蛋白质编码基因,87个tRNA基因,25个rRNA基因,1个tmRNA基因等信息;分离菌基因组编码蛋白功能的注释结果显示该菌的功能蛋白主要表现在细菌的复制增殖和生物代谢方面;分离菌携带多种耐药基因,包括主动外排系统相关基因、多粘菌素抗性基因、磷霉素抗性基因等,并基本与耐药表型一致;携带66种毒力基因,主要是分泌系统类毒力基因以及内外毒素、黏附侵袭类毒力因子基因.上述结果表明,本研究分离的Bb耐药性不强,但对小鼠呈强致病力,且含多种毒力相关基因.本研究为对该菌的研究奠定基础,并为该菌感染的防控研究提供参考.

2020年5月,江苏省某养殖场饲养的220只山羊疑似感染产气荚膜梭菌,共死亡25只.为鉴定感染的产气荚膜梭菌复合群类型,采集大肠、小肠内容物以及肠系膜淋巴结、肝、脾、肾等组织病料进行细菌分离鉴定,并对分离菌株进行药敏试验及致病性试验.结果显示:分离菌株为革兰氏阴性短杆菌,经生化试验和16S rRNA试验鉴定为豚鼠气单胞菌;该分离株对多种常用抗菌药物耐药,仅对呋喃唑酮敏感;该菌能造成小鼠发病死亡.此次从临床发病羊病料中分离到致病性豚鼠气单胞菌,在国内较为少见,截至目前未见类似报道,本研究为避免此类疫病的临床误诊以及做好该病防控提供了帮助.

为了解鸭甲型病毒性肝炎的病原特征,对2017-2019年从山东省采集的27份疑似鸭肝炎病毒感染的病料采用鸡胚进行病毒分离,并进行RT-PCR鉴定,随后对分离株的VP1基因进行序列测定以及遗传变异分析.结果显示:从27份疑似病料中共分离出了22株病毒,8株为鸭甲肝病毒1型(DHAV-1),14株为鸭甲肝病毒3型(DHAV-3);VP1基因序列比对显示:8株DHAV-1与12株参考株的核苷酸相似性为91.7％～98.6％,氨基酸相似性为93.7％～97.5％,分离株的核苷酸相似性为97.2％～100％;14株DHAV-3与12株参考株的核苷酸相似性为89.4％～98.9％,氨基酸相似性为92.1％～100％,分离株的核苷酸相似性为93.9％～100％,属于Ⅰ型(G Ⅰ型).研究结果将为鸭甲型病毒性肝炎的防控提供了参考.

2018年7月份,扬州大学动物医院接收到宿迁送检的1份羊驼病料,根据发病情况及剖检结果怀疑为产气荚膜梭菌感染,对其肠道、肝脏、肾脏病料进行厌氧菌分离培养,对分离菌进行了纯化、革兰染色、生化反应、16S rRNA基因序列分析以及药敏实验.结果 表明:分离菌为产气荚膜梭菌,该菌对环丙沙星、氟霉素、氨苄西林敏感.

我国茶叶特别是发酵茶叶中含有许多有益真菌,其代谢产物具有抗菌、抗癌、降脂、降压的功能.目前,关于茶叶中真菌功能的研究很多,但在畜牧业中尚无相关应用研究.取湖南安化金花茯砖茶、天福南糯山熟饼、天福茗茶、天福白茶、安吉普洱茶、天福普洱、祁门红茶和金茯茶共8种茶叶进行真菌分离、纯化,共得到23株菌株,通过形态学和ITS基因序列的鉴定,共得到拟茎点霉菌1株,变色栓菌1株,枝状枝孢菌1株,黑曲霉2株,曲霉菌1株,冠突曲霉2株,阿姆斯特丹曲霉6株,棕曲霉2株,格孢菌1株,扩展青霉菌1株,拟盘多毛孢菌1株,球孢枝孢菌2株,变色曲霉2株.结果 为这些真菌的进一步研究和在生产实践中的应用提供了物质基础.并且将其中的优势菌属冠突散囊菌进行扩大培养,为后期的生产实践做好准备.

子宫蓄脓是一种常见的犬生殖系统疾病,通常由内分泌紊乱和细菌感染共同引起.为了解兽医临床子宫蓄脓病例中的常见病原菌类型,对江苏省扬州市动物医院接诊的7例子宫蓄脓病例进行病原菌分离鉴定.经实验室检测,分离出10株菌株;经序列分析,鉴定出5种病原菌,分别为大肠杆菌(3株)、粪肠球菌(1株)、产气肠杆菌(2株)、产酸克雷伯氏菌(1株)、铜绿假单胞菌(3株).结果表明,该地区犬子宫蓄脓病例感染的致病菌种类较多,但以肠杆菌科细菌为主.本研究为临床犬子宫蓄脓的防治提供了参考.

In order to investigate the effect of curcumin on the mRNA expression of lipid synthesis and lipolysis related genes of porcine adipose derived mesenchymal stem cells (MSCs),porcine MSCs were derived from subcutaneous adipose tissue at weaning stage,cultured and induced differentiation,and then treated with curcumin.Two groups were designed,control group (differentiation induced medium + curcumin dissolution reagent DMSO) and the treatment group (differentiation medium+ 10 μmol/L curcumin).The cells were collected after differentiation for 48 h and used for further detection.Results indicated that curcumin reduced the triglyceride contents of porcine adipocyte significantly,while had no obvious effects on the cell viability.Real-time qPCR results showed that mRNA expressions of peroxisome proliferatoractivated receptor-γ (PPAR-γ) and CCAAT enhancer binding protein-β (C/EBP-β),two important transcription factors during differentiation process,as well as key enzymes in fat synthesis process fatty acid synthase (FAS) and acetyl-coenzyme-A carboxylase (ACC) were reduced significantly in 10 μmol/L curcumin treated cells when compared with control group,however,mRNA expressions of hormone-sensitive triglayceride lipase (HSL) and adipose triglyceride lipase (ATGL) and the enzymatic activity of these two enzymes were significantly increased.These results suggested that curcumin reduced fat deposition in porcine adipose derived mesenchymal stem cells possibly by inhibiting fat synthesis and enhancing lipolysis.These findings provided theoretical support for the use of curcumin as feed additives in reducing porcine fat deposition in animal production.