目的 构建双重逆转录PCR对急性弛缓性麻痹(AFP)病例中脊髓灰质炎病毒(PV)和肠道病毒(EV)进行检测和基因分型.方法 从2021年河南省AFP病例中细胞分离得到的36株EV和7株PV粪便标本,利用EVVP4区引物EVP4、OL68-1和PV VP1区引物UG1、UC11构建双重逆转录PCR进行检测,分析特异性和敏感性;以细胞分离培养阳性结果为参照,分析双重逆转录PCR检测的灵敏性.结果 18株EV检测为阳性,4株EV检测为弱阳性,阳性率为61.1％;5株PV检测为阳性,阳性率为71.4％.EV以柯萨奇B组病毒3型为主,PV均为疫苗类似株.结论 本次实验构建的双重逆转录PCR可以作为PV和EV的辅助诊断手段.

目的 分析2020年河南省疑似急性弛缓性麻痹(AFP)监测病例中实验室确诊感染脊髓灰质炎病毒(PV)的病毒型别,为维持"无脊灰野病毒(WPV)状态"制定科学的防控策略提供理论依据.方法 按照《全国急性迟缓性麻痹(AFP)病例监测方案》的要求,对AFP标本进行病毒分离及序列核苷酸变异鉴定分析.结果 共检测498例疑似AFP病例,其中3例(0.60％)分离出6株PV,其中Ⅰ型PV 2株,与脊灰疫苗株(Sabin株)相比,核苷酸VP1区发生变异的数量均为1;Ⅰ+Ⅲ型PV4株,最大变异数分别为2、2、3和3.8例(1.61％)病例分离出非脊灰肠道病毒(NPEV),其中5例发生在11-12月份.结论 2020年河南省分离出的PV均为Sabin相似株,毒株型别以Ⅰ+Ⅲ型为主,VP1区核苷酸序列以低变异为主,未发现WPV、疫苗衍生脊灰病毒及疫苗高变异脊灰病毒.PV及NPEV感染均以下半年为主.

目的 制备和滴定2019年河南省脊髓灰质炎病毒实验室质量控制标准毒株(Laboratory Quality Control Strain,LQCS).方法 中国Sabin参考毒株(China Sabin Test Reference Strain,CSTRS)扩增制备LQCS,以CSTRS为平行实验,进行三次独立实验完成LQCS 滴定.结果 LQCS RD Ⅰ 型为10848 CCID50/0.1 mL、RD Ⅲ 型为108.5 CID50/0.1 mL、L20B Ⅰ 型为107.82 CCID50/0.1 mL和L20B Ⅲ型为107.20 CCID50/0.1 mL.结论 河南省已制备可用于细胞敏感性实验的LQCS.

目的 分析河南省15岁以下儿童急性弛缓性麻痹病例(Acute Flaccid Paralysis,AFP)实验室确诊肠道病毒感染特征,为制定科学有效的肠道病毒防控策略提供依据.方法 采用朱海明描述流行病学方法对病例资料进行分析,使用RD和L20B两种细胞进行病毒分离,采用荧光定量PCR法进行鉴定,分析2016年河南省AFP病例肠道病毒感染状况.结果 河南省2016年AFP病例肠道病毒(Enterovirus,EV)感染率为12.11％,河南省肠道病毒感染中脊灰病毒(Poliovirus,PV)占12.73％,非脊灰肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)占87.27％.河南省肠道病毒感染以5～8月份居多(58.18％),均为5岁以下病例(100.00％).病例疾病谱主要为短暂性肢体麻痹、格林巴利综合征、脊髓炎等,残留麻痹率为16.36％.结论 河南省急性弛缓性麻痹病例肠道病毒感染以NPEV为主,感染高峰为夏季前后,5岁以下儿童易感,应针对高发季节及易感人群制定措施降低肠道病毒感染率.

肠道病毒(Enterovirus,EV)包括脊髓灰质炎(脊灰)病毒(PV)、柯萨奇病毒(Cox)、埃可病毒(ECHO)和新肠道病毒68～72型等共68个血清型.非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)是无菌性脑炎、脑膜炎等的主要病因,同时有些型别也是造成儿童急性弛缓性麻痹(APP)的原因.为了解河南省急性弛缓性麻痹病例中的非脊髓灰质炎肠道病毒感染的型别和流行情况,探讨NPEV感染与其发病关系,对1997～2000年AFP病例分离到的129株NPEV进行血清分型研究.

目的进一步提高脊灰实验室监测质量.方法脊灰病毒分离与鉴定.结果河南省2002年共报告急性弛缓性麻痹(AFP)病例610例,15岁以下儿童AFP病例报告发病率231/10万.粪便标本采集率为98.95%,采集合格粪便标本496例,占86.41%;574例粪便标本共分离出脊髓灰质炎病毒(PV)62例(68株),阳性率为10.8%;非脊灰肠道病毒(NPEV)29例(33株),阳性率为5.0%;AFP病例接触者28例,分离出PV5例(5株);分离出的脊灰病毒经国家脊灰实验室鉴定均为疫苗相关株或疫苗变异株.结论AFP病例实验室监测指标达到了卫生部和世界卫生组织规定指标.