Objective:To analyze the molecular characteristics of hemagglutinin-neuraminidase (HN) gene of human parainfluenza virus type 3 (HPIV3) among the cases with acute respiratory tract infection (ARI) in Henan Province.Methods:Nasal/throat swab samples collected from patients with severe acute respiratory tract infection (SARI) in Luohe and patients with influenza-like illness (ILI) in Zhengzhou were used in this study. HPIV nucleic acids in the samples were detected using real-time fluorescent PCR. HPIV3-positive samples were subjected to RT-PCR for the amplification of HN genes and the sequences were analyzed with Sanger method. CExpress and MEGA7.0 software were used for sequences editing, evolution tree construction and gene sequence analysis.Results:A total of 374 throat swab samples collected form ARI cases in Luohe and Zhengzhou were tested and 20 (5.3%) of them were positive for HPIV3. Eighteen HPIV3 HN gene sequences were successfully amplified and all belonged to C3 subgroups, including 16 sequences of C3f genotype and two sequences of C3a genotype. The 18 HN gene sequences shared the homology of 97.6%-100.0% in nucleotide and 99.3%-100.0% in amino acid, but the differences between them and the prototype strain Wash/47885/57 were significant. There were 12 amino acid mutations shared by them, including four function-related mutations (H295Y, I391V, D556N and I53T). There were no significant differences in the nucleotide or amino acid sequences as compared with the epidemic strain of China/BCH4210A/2014.Conclusions:The C3f and C3a branches of HPIV3 were the epidemic genotypes in Henan Province in recent years and a local circulating prevalence might be established. Continuous and in-depth monitoring of HPIV3 C3 subtype would be of great significance for the prevention and control of HPIV3-associated diseases.

目的:分析河南省首例人感染H5N6禽流感病例的流行病学及临床特征.方法:2022年3月24日,河南省首次报告一例人感染H5 N6禽流感确诊病例.参照《人感染动物源性流感预防控制技术指南(试行)》,疾控机构专业人员对病例开展现场流行病学调查,对涉及的工作场所、病例居住地以及禽类来源地等开展环境标本病原检测.结果:患者临床表现主要为高热、咳嗽、呼吸困难,后因呼吸衰竭死亡;病例有明确的禽肉相关暴露史,早期肺泡灌洗液、禽肉及工作场所环境标本H5 N6禽流感病毒核酸均为阳性.结论:该例人感染H5 N6禽流感病例通过职业暴露感染,未发现人传人的证据.

目的 了解2020-2021年河南省漯河市严重急性呼吸道感染(SARI)病例中的人呼吸道合胞病毒(HRSV)基因特征.方法 采集2020年4月至2021年3月漯河市中心医院因SARI住院的病例标本,用荧光定量PCR法进行HRSV病毒核酸检测,对检测阳性标本使用RT-PCR法进行HRSV G基因第二高变区扩增,使用CExpress以及MEGA 7.0软件进行序列编辑、进化树构建和基因特征分析.结果 共采集SARI咽拭子标本170份,其中HRSV核酸检测阳性标本15份(8.8％).对阳性标本进行靶基因扩增后获得12条序列,经分析全部为HRSVB亚型的BA9基因型.8条序列与来自欧洲的BA9基因型序列汇成一簇,处于进化树顶端;4条序列与来自国内和澳洲的BA9基因型序列汇成一簇.与参考株相比,12条序列在重复插入的60个碱基区及aa164-176区域出现突变,同时存在253NITT糖基化位点的增加和276 NSTQ糖基化位点的缺失.结论 HRSV B亚型是2020-2021年河南省漯河市SARI病例中流行的亚型,BA9基因型为流行基因型,与流行株相比变异较大,应对BA9基因型HRSV进行持续深入的监测,为科学防控SARI提供依据.

目的 了解2021年河南省健康人群乙型病毒性肝炎的表面抗体水平特征,为完善乙肝防控策略提供科学依据.方法 采用横断面研究的方法,每省辖市选取1～2个县区,每个县区随机选取1～2个城区街道办事处和(或)1～2个农村乡镇,开展问卷调查和标本采集工作,采用酶联免疫吸附试验检测血清中乙肝表面抗体(HBsAb)水平,分析HBsAb阳性率.结果 选取8 909名1～79岁人群,河南省HBsAb总阳性率为64.59％,不同年龄组HBsAb阳性率在49.75％～93.03％之间(x2=1 246.07,P＜0.01);各地市 HBsAb 阳性率在 42.42％～84.00％之间(x2=344.04,P＜0.01);不同职业人群的HBsAb阳性率在55.71％～72.89％之间(x2=81.68,P＜0.01);不同文化程度人群的HBsAb阳性率在53.40％～71.50％之间(x2=82.29,P＜0.01);接种不同剂次乙肝疫苗(HepB)人群HBsAb阳性率在59.47％～76.69％之间(x2=103.66,P＜0.01);首针接种不同剂量HepB者HBsAb阳性率在55.15％～72.14％之间(x2=88.14,P＜0.01);末剂次接种后时间＜1年、1～5年、6～10 年、≥11 年 HBsAb 阳性率分别为 89.09％、79.36％、54.00％、52.99％(x2=402.49,P＜0.01).结论 河南省不同年龄、不同地市、不同职业、不同免疫史的1～79岁健康人群乙肝表面抗体水平存在差异,建议加大在中老年人群中的乙肝防控健康宣传力度,提高HepB的成年人群接种率.

目的 研究河南省流感样病例(ILI)发病规律,探讨使用自回归移动平均(ARIMA)模型预测河南省流感样病例发病趋势的可行性.方法 收集2010年第1周至2022年第30周河南省流感样病例占门急诊就诊病例的比例(ILI％)数据,使用R语言进行时间序列分析并建立季节性ARIMA模型,使用最优模型对2010年14周至2021年40周ILI％数据进行拟合,对2021年第41周至2022年第30周进行预测.结果 2010-2014年河南省ILI％整体呈增高趋势,2014-2022年ILI％整体呈降低趋势.河南省ILI％变化呈现季节性,12月底至次年1月初为报告高峰.最终选择的模型是ARIMA(0,1,1)×(1,1,0)52,拟合和预测的发病趋势与实际观测到的情况基本一致,ILI％拟合误差范围在-2.93～3.51之间,平均误差-0.01,平均绝对误差0.29,均方根误差0.47,百分比误差(相对误差)在-213.95％～128.85％之间,平均绝对百分比误差11.22％;实际报告ILI％均在预测序列95％置信区间内.结论 季节性ARIMA模型可用于河南省流感样病例发病趋势的短期预测.

目的 了解河南省≥60岁人群流感样疾病(Influenza-like illness,ILI)流行特征.方法 在河南省22家流感监测哨点医院收集2016年4月-2021年3月≥60岁人群ILI病例,分析ILI就诊比例;定期采集部分ILI病例咽拭子标本,检测流感病毒核酸,分析检测阳性率.结果 2016年4月-2021年3月各哨点医院共报告≥60岁人群ILI病例29 151例,占总就诊病例数的0.07％;各监测年度ILI就诊比例在0.03％-0.13％之间.ILI就诊在第3-6周达到高峰.ILI病例流感病毒核酸检测总阳性率为18.47％(399/2 160),5个监测年度阳性率分别为16.84％(65/386)、34.73％(174/501)、23.11％(116/502)、14.38％(44/306)、0.00％(0/465);流感病毒 A(H1N1)型、A(H3N2)型、B型、混合型阳性率分别为7.92％、6.11％、4.40％、0.05％.结论 河南省≥60岁人群ILI呈冬春季流行高峰,流感病毒流行株以A(H1N1)、A(H3N2)和B型为主交替流行.

目的:分析河南省2019～2020年H3N2亚型流感病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因的分子进化特征,为流感防控提供科学依据.方法:对河南省2019～2020年H3N2亚型流感病毒核酸检测阳性的流感样病例(ILI)咽拭子标本进行病毒分离,对分离到的22株H3N2型流感病毒株进行HA和NA基因测序,使用生物信息学软件分析其分子特征.结果:河南省H3N2亚型流感病毒分离株的HA基因和NA基因与当年度推荐疫苗株的核苷酸同源性分别为96.6％ ～96.8％、98.1％ ～98.6％.HA和NA进化树分析显示,22株分离株属于3C.2a1b分支,虽与当年推荐疫苗株同属于3C.2a分支,但差异较大.HA基因共发生32处氨基酸突变,涉及A、B、E共3个抗原决定簇的4个氨基酸位点变异和2个病毒特异性识别受体结合位点变异.NA基因共发生21处氨基酸突变,其中共同突变8处,未发现耐药位点突变.潜在N-糖基化位点预测结果显示,HA基因在142NWT、149NGT、174NYT位点存在缺失或增加,NA基因在329NDS位点存在缺失.结论:2019～2020年河南省H3N2亚型流感病毒株的HA基因和NA基因与当年推荐的疫苗株存在较大差异,出现了抗原漂移.

目的 分析2020年河南省疑似急性弛缓性麻痹(AFP)监测病例中实验室确诊感染脊髓灰质炎病毒(PV)的病毒型别,为维持"无脊灰野病毒(WPV)状态"制定科学的防控策略提供理论依据.方法 按照《全国急性迟缓性麻痹(AFP)病例监测方案》的要求,对AFP标本进行病毒分离及序列核苷酸变异鉴定分析.结果 共检测498例疑似AFP病例,其中3例(0.60％)分离出6株PV,其中Ⅰ型PV 2株,与脊灰疫苗株(Sabin株)相比,核苷酸VP1区发生变异的数量均为1;Ⅰ+Ⅲ型PV4株,最大变异数分别为2、2、3和3.8例(1.61％)病例分离出非脊灰肠道病毒(NPEV),其中5例发生在11-12月份.结论 2020年河南省分离出的PV均为Sabin相似株,毒株型别以Ⅰ+Ⅲ型为主,VP1区核苷酸序列以低变异为主,未发现WPV、疫苗衍生脊灰病毒及疫苗高变异脊灰病毒.PV及NPEV感染均以下半年为主.

目的 分析2016-2020年度许昌市哨点医院流感样病例监测结果,为许昌市流感防控提供依据.方法 对哨点医院采集的流感样病例(Influenza like illness,ILI)咽拭子标本进行流感病毒核酸检测,描述性分析监测结果.结果 四个监测年度许昌市共报告35 953例ILI,总ILI比例(ILI％)为2.78％,各监测年度ILI％差异有统计学意义(x2=276.22,P＜0.001).ILI报告呈冬季高峰.共采集2 725例ILI标本,流感病毒核酸阳性712例,阳性率为26.13％,各监测年度的阳性检出率差异有统计学意义(x2=75.74,P＜0.001),每个监测年度均有多个亚型/系的流行.5～14岁组阳性检出率最高(37.54％),0～4岁组检出率最低(19.49％),各年龄组检出率差异有统计学意义(x2=80.82,P＜0.001).男女检出率差异无统计学意义(x2=3.86,P=0.05).学生阳性检出率最高(38.67％),其次为幼托儿童(29.94％).结论 许昌市儿童和学生是流感防控重点人群,12月和1月是流感防控重要月份,要在冬季加强对重点人群的流感防控工作.

目的 掌握河南省当前流感暴发疫情特征,查找引起暴发疫情的高危因素,为预防流感暴发和减轻流感群体性危害提供参考.方法 对2010-2018年河南省报告的流感暴发疫情进行描述性分析.结果 2010-2018年,河南省共报告37起流感暴发疫情,学校暴发疫情占97.30 ％(36/37),冬春季暴发疫情占94.59 ％(35/37),17起(45.95％)由B型流感引起.8个流行年度中,有3个地市没有暴发疫情报告,有2个流行年度全省没有暴发疫情报告.结论 各型别流感均可引起暴发;学校是流感暴发疫情的高发场所,在呼吸道传染病高发的冬春季节应在学校、幼托机构及其他人群密集的场所实行全面晨检制度,及时发现流感样病例并及时实施隔离观察;开展全民健康卫生教育对预防流感至关重要,提倡在公交车和商场等人群密集场所常规佩戴口罩,注意个人卫生;有流感样症状的人员要主动与他人保持安全的社交距离,必要时停课和停工;鼓励流感高危人群和高发人群积极接种流感疫苗.

目的 了解2017-2018年度河南省流行性感冒(简称流感)的流行特征及监测中存在的问题,为提高流感监测质量和制定流感防控策略提供支持.方法 对2016-2017年河南省流感监测结果及监测状况进行描述性分析.结果 2017-2018年河南省流感呈冬春季和秋季双峰流行,秋季流行毒株主要为季节性H3型,冬春季流行前期以B型为主,中后期优势株逐渐转为新甲H1型,流行峰值高于前三个流行年度.年度共报告22起流感暴发疫情,发生场所均为中小学,其中小学15起,占68.18％;中学7起,占31.82％.结论 2017-2018年河南省流感流行强度处于历年正常偏高水平,优势株在流行的不同时期出现转换.暴发疫情主要发生于中小学校.

Objective To evaluate the effectiveness of a rapid nucleic acid extraction kit for the detection of influenza virus. Methods Different dilutions of influenza viruses (MDCK cell strain) and 20 positive throat swabs for influenza virus were selected in the study, nucleic acids were extracted respectively using spin column method, magnetic beads method and rapid method, then using real-time fluorescent PCR for influenza virus detection.Results were analyzed using software SPSS 21.0. Results For influenza virus from cell culture and throat swabs, the rapid nucleic acid extraction method showed higher extraction efficiency than spin column and magnetic beads method.There were no differences in the detection rate and repeatability among the three methods. Conclusions Rapid nucleic acid extraction method showed advantages such as easy to operate, short time, no cross contamination, lower requirements for equipment and etc.

目的 分析河南省2012-2017年度流感监测数据,为流感防控提供依据.方法 对“流感监测信息系统”中流感样病例监测资料、病原学监测资料及暴发疫情资料进行分析.结果 2012-2017年河南省各哨点医院共报告流感样病例756416例,总流感样病例百分比(IU％)为2.96％;全省19家网络实验室共检测ILI标本98 291例,核酸阳性标本10 732例,总核酸阳性率为10.92％;H3N2型和B型检出率最高,新甲型H1N1除2014-2015年度几乎未流行外,其余4个监测年度均有小幅度流行;2012-2017年共报告暴发疫情14起,以学校疫情为主.结论 2012-2017年,河南省有3个监测年度流感疫情呈现双峰流行,2014-2015年度冬春季流行峰最强;流行病毒型别以H3N2型和B型为主交替流行;暴发疫情远低于正常水平,各地应加强对学校等聚集性场所暴发疫情的监测.

目的 分析河南省2017-2018年流感病毒对神经氨酸酶抑制剂(neuraminidase inhibitor,NAI)药物的耐药性,为流感抗病毒药物的使用提供依据.方法 病毒来自2017-2018年河南省流感监测网络送检的毒株标本,经复核鉴定后,挑选H1pdm09亚型15株、H3N2亚型6株、B型15株共36株毒株使用荧光发光法(fluorescence-basedassay,FL)检测其对奥司他韦和扎那米韦的耐药性.药物敏感参考株为A/California/12/2012(H1 pdm09)-275H、A/北京海淀/1942/2014(H3N2)-119E和B/Rochester/02/2001-198D;药物耐药参考株为A/Texas/23/2012(H1 pdm9)-H275Y、A/Texas/12/2007(H3 N2)-E119V和B/Rochester/02/2001-D198N.结果 药物敏感参考株为A/California/12/2012(H1pdm09)-275H、A/北京海淀/1942/2014(H3N2)-119E和B/Rochester/02/2001-198D对奥司他韦的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值分别为0.29 nmol/L(nM)、0.10 nM和12.71 nM,对扎那米韦的IC50值分别为0.2 nM、0.49 nM和0.33nM.2017-2018年河南省H1pdm09和H3 N2亚型流感病毒对奥司他韦的IC50值范围分别为(0.28～ 1.37 nM)和(0.08～0.17 nM),对扎那米韦的IC50值范围为(0.15 ～0.53 nM)和(0.12～0.22 nM),均在相对应型别参考株IC50值10倍以内;B型对奥司他韦的IC50值范围为(11.83 ～24.59 nM),对扎那米韦的IC50值范围为(0.48 ～ 1.25 nM),均在参考株的IC50值的5倍以内.结论 2017-2018年河南省检测的流感毒株都对神经氨酸酶抑制剂药物敏感.

目的:分析河南省2015～2018年B型流感的流行特征,为流感防控策略的制定提供依据.方法:对河南省22家流感监测哨点医院的流感样病例(ILI)咽拭子标本进行荧光定量PCR检测,对B型流感病毒阳性标本进行统计分析.结果:河南省2015～2018年共检测48123例ILI病例标本,其中B型流感病毒核酸检测阳性4433例.2015～2016年、2017～2018年B型流感病毒占所有流感病毒核酸检测阳性标本的比例分别为67.98％、43.54％,高于2016～2017年(6.75％)(P<0.05).2015～2016年和2017～2018年B型流感病毒阳性率高于2016～2017年(P<0.05);每年11月到次年4月为B型流感的流行高峰期;感染人群以5～15岁托幼儿童和学生为主;2015～2016年和2017～2018年感染人群中男性感染率高于女性(P<0.05);各个监测年度河南省各市B型流感病毒核酸阳性率不同;病毒分离以高滴度一代细胞分离毒株为主.结论:B型流感病毒具有感染率高、毒力强、易培养的特点,是河南省2015～2016年和2017～2018年流感流行的主要型别,儿童和学生是B型流感防控的重点人群.

Objective To analyze the epidemic characteristics of influenza A(H3N2) virus in Henan province during 2013-2017.Methods ILI (Influenza-like illness) swabs collected from 22 influenza sentinel hospitals in Henan province were detected by fluorescence quantitative PCR and virus isolation,and data of positive specimens of influenza H3N2 virus were analyzed.Results 62 307 ILI specimens were detected in Henan province during 2013-2017,of which 4791 cases were positive of H3N2.The positive rates of the four years were 14.9％,95.68％,12.36％ and 76.57％,respectively.There was no significant difference between the infection population of male and female,and there were the most infected cases among scattered children (24.73％-35.41％).The positive rates of different cities were variant.Characteristics of virus isolation showed that there were mainly low titer (1 ∶ 16) and the 2nd cell passaging strains (62.33％).Conclusion Influenza A (H3N2) virus shows annual cyclical epidemic.It is the main epidemic type in recent years in Henan province.Children and students are key populations of influenza A (H3N2) virus prevention and control.The virus is hard to be cultured in cell,and the virus isolation skills should be strengthened.

目的 掌握2009年甲型H1N1流感大流行后,河南省流感的季节性特征和流行毒株变化特征,为防控流感提供数据支持.方法 运用流行病学描述性分析方法,对2010年-2015年河南省22家国家级流感监测哨点医院的流感样病例监测结果进行数据分析.结果 河南省具有明显的流感冬春季节性,多数年份有秋季小高峰;近几年流行毒株为B型、季节性H3和新甲H1交替出现,每个季节一般由单一的血清型主导;新甲H1流感在2009年大流行之后,呈现季节性流行.结论 河南省流感多数年份呈双峰流行,每个流行年度有2个或3个血清型(毒株)共同流行,新甲H1型已经替代此前流行的季节性H1型呈季节性流行;ILI就诊比例不宜单独作为反映流感流行趋势的指标.

目的 实现志贺菌候选抗原rstxB-phoE的胞膜表面表达.方法 本研究利用融合PCR技术(SOE-PCR)构建可以表达rstxB-phoE的重组菌,并通过蛋白杂交、免疫胶体金电镜等手段证明重组蛋白在细胞中的定位.连续传代鉴定重组株的遗传稳定性.结果 一段长21个氨基酸的stxB肽段通过phoE蛋白载体准确递呈到了细菌胞膜表面,重组蛋白的表达对细菌的生长没有产生明显影响,且连续传代结果表明重组株的良好遗传稳定性.结论 本实验基于SOE-PCR技术初步构建了可以表面递呈rstxB-phoE重组蛋白并稳定遗传的重组菌株,为开发新型志贺菌疫苗打下基础.其免疫作用需通过动物实验进一步鉴定.

This study aims to investigate the genetic characteristics of hemagglutinin in wild-type measles viruses in Henan Province, China and to provide a basis for measles control and elimination. Specimens were collected from suspected measles cases in Henan during 2008-2012. Cell culture was performed for virus isolation, and RT-PCR was used to amplify hemagglutinin gene. The PCR products were sequenced and analyzed, including construction of phylogenetic tree and analysis of the distance between the isolated virus and the reference virus; then, the variations in predicted amino acids were analyzed. The results showed that 12 measles viruses were isolated in Henan Province and identified as H1a genotype; the nucleotide and amino acid homologies were 98.0%-100% and 97.2%-99.8%, respectively. One glycosylation site changed in all the 12 sequences because of the amino acid mutation from serine to asparagine at the 240th site, as compared with Edmonston-wt. USA/54/A. Overall, the wild-type measles virus genotype circulating in Henan Province from 2008 to 2012 was H1a, with high homology between strains; there were some variations in amino acid sequences, resulting in glycosylation site deletion.

目的：分析河南省2011～2012年度流感流行特征与病毒亚型分布情况.方法：搜集流感监测网络数据进行分析；对流感样病例咽拭标本进行病毒分离.结果：河南省2011年ILI就诊率为1.6%，2012年ILI就诊率为2.1%，未出现明显的就诊高峰。2011年共分离毒株31株，以BY（B型，Yamagata）型流感病毒为主；2012年共分离178株，以BV（B型，Victoria）型流感病毒为主。核酸检测显示有两个流行峰出现，分别在2011年1-4月和2011年12月-2012年4月，与分离峰一致.结论：2011年初出现甲型H1N1流感和B型流感的流行，12月至次年4月出现H3N2和B型流感的流行。2012年的流行强度高于2011年。