目的 观察大柴胡汤加减方(MDD)对湿热证胆囊胆固醇结石(CS)小鼠胆固醇代谢基因SRBI、ABCG5/G8表达的影响.方法 将24只雄性C57BL/6J小鼠按体质量随机分为空白组、模型组、中药组和西药组,每组6只.除空白组外,其余小鼠采用"2%高胆固醇致石饲料+内湿+外湿"的方法 造模13周建立CS湿热证小鼠模型,通过观察胆囊形态、一般情况与旷场行为学实验评判CS湿热证模型是否建立成功.第14周开始,4组小鼠均按体质量0.02 mL/(g·d)灌胃干预,中药组和西药组分别给予1.17 g/mL大柴胡汤加减方药液和2.5 mg/mL熊去氧胆酸溶液,其余2组则给予生理盐水,共干预4周.ELISA法检测4组小鼠胆汁中总胆固醇(TC)含量、总胆汁酸(TBA)、磷脂(PL)的含量和血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量、总胆固醇(TC)的含量,HE染色法观察肝脏细胞组织形态学变化,qPCR和Western blot分别检测B类清道夫受体Ⅰ(SRBI)、三磷酸腺苷结合盒转运体G5(ABCG5)、三磷酸腺苷结合盒转运体G8(ABCG8)mRNA与蛋白表达量.结果 与空白组比较,模型组小鼠胆囊结石与湿热证候表现突出,肝脏脂肪样变性明显,胆汁中TC含量升高、TBA与PL含量均减少(P＜0.05),血清中HDL-C含量降低、TC含量均增多(P＜0.05),SRBI、ABCG5、ABCG8 mRNA相对表达水平均有明显上调(P＜0.05),SRBI和ABCG8蛋白表达均量上调(P＜0.05).与模型组比较,中药组小鼠的肝脏脂肪变性程度减轻,胆汁中TBA、PL含量显著升高而TC含量均显著降低(P＜0.05),血清中HDL-C升高、TC均降低(P＜0.05),SRBI mRNA相对表达水平明显降低(P＜0.05),ABCG8 mRNA及蛋白表达均呈明显下调(P＜0.05).结论 SRBI、ABCG5/G8表达异常升高可能是CS湿热证的分子生物学机制之一.大柴胡汤加减方能通过抑制SRBI、ABCG5/G8的表达,调节胆固醇代谢,减少胆固醇过饱和胆汁的分泌,改善肝脏脂肪变性,发挥清热祛湿、利胆消石的作用,从而达到治疗湿热型胆石症的效果.

目的 从表观遗传学之基因启动子DNA甲基化角度探讨围绝经期抑郁症对大鼠海马Notch1信号通路关键基因表达及其启动子DNA甲基化的影响.方法 将12月龄雌性围绝经期SD大鼠随机分为对照组和模型组.分别采用旷场实验和糖水消耗实验进行焦虑样及抑郁样的行为学评价.采用实时荧光定量PCR法(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测大鼠海马Notch1信号通路关键基因的表达.运用重亚硫酸氢盐测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法分析Notch1信号通路关键基因启动子区的甲基化位点及其甲基化水平.结果 围绝经期抑郁症大鼠旷场实验水平得分和垂直得分及糖水消耗率均显著下降;围绝经期抑郁症大鼠海马组织中Notch1信号通路关键基因Jagged1、Notch1和Hes5的表达均显著下调(P＜0.01或P＜0.05);其中Hes5基因的部分甲基化位点及其甲基化率均显著增加,而Jagged1和Notch1基因的甲基化位点及其甲基化率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 围绝经期抑郁症大鼠海马Notch1信号通路关键基因表达显著下调,其中Hes5基因表达下调可能与其启动子DNA甲基化水平上升有关.

目的 探讨柴胡疏肝散对胆囊胆固醇结石(CS)小鼠胆囊收缩功能的影响及其作用机制.方法 将32只ICR小鼠随机分为空白组8只和造模组24只.空白组予以普通饲料喂养,造模组采用高胆固醇致石饲料喂养制备CS小鼠模型,9周后随机选取8只模型小鼠胆囊取材,观察CS造模是否成功.将成模小鼠随机分为模型组和柴胡疏肝散组.柴胡疏肝散组予柴胡疏肝散灌胃,空白组和模型组予等量的生理盐水灌胃,连续干预4周.用ELISA法检测血清胆囊收缩素(CCK)、二酰基甘油(DAG)、甘油三脂(TG)与胆汁总胆固醇(TC)、总胆汁酸(TBA)含量;HE染色法观察胆囊和肝脏的组织形态;分别采用q-PCR法与Western blot法检测肝脏蛋白激酶C(PKC)和胆囊调宁蛋白(CAP)、血管活性肠肽(VIP)基因水平和蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组血清DAG、TG及胆汁TC含量明显升高(P<0.05,P<0.01),血清CCK和胆汁TBA含量明显降低(P<0.01),肝脏PKC mRNA与蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01),胆囊CAP、VIP的mRNA与蛋白表达均明显升高(P<0.01);与模型组比较,柴胡疏肝散组血清DAG、TG及胆汁TC明显降低(P<0.05),血清CCK和胆汁TBA明显升高(P<0.05,P<0.01),肝脏PKC mRNA表达明显升高(P<0.05),胆囊CAP、VIP mRNA与蛋白表达均显著降低(P<0.05,P<0.01).经药物干预后,柴胡疏肝散组小鼠肝细胞脂肪变性明显改善,胆囊结石状况及组织黏膜胶原纤维改善明显.结论 柴胡疏肝散通过降低DAG、TG及胆汁TC水平并提高血清CCK、胆汁TBA含量,上调肝脏PKC与下调胆囊CAP、VIP蛋白表达,改善胆囊收缩功能,发挥利胆排石的作用.

目的:采用高脂致石饲料联合21天"慢性不可预知温和刺激(CUMS)+孤养"模式,制备胆石症肝郁证动物模型.方法:33只雄性ICR小鼠随机分为对照组12只,致石组21只.不同饮食喂养16周后,每组取3只查看胆囊内结石形成情况、胆汁浑浊度及透光性;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测胆囊胆汁总胆固醇(TC)、总胆汁酸(TBA)及磷脂(PL)含量,判断是否建立胆石症病模型.模型成功后,致石组随机分为模型组(CS组)、模型肝郁组(CS肝郁组).CS肝郁组采用21天"CUMS+孤养"模式建立肝郁模型.造模期间动态观察小鼠的精神状况、摄食、行为活动,及时记录小鼠体质量、强迫游泳、糖水偏好数据.结果:16周后,与对照组相比,致石组胆汁浑浊,透光性变差,胆囊内可见固体沉淀,致石组胆汁TC水平升高(P＜0.05),而TBA、PL水平下降(P＜0.05,P＜0.05)."CUMS+孤养"造模期间,CS肝郁组小鼠喜蜷缩于笼子角落,精神欠佳,摄食减少;对照组、CS组小鼠体质量不断增加,而CS肝郁组小鼠体质量不断下降,造模结束后,CS肝郁组体质量明显低于其他两组."CUMS+孤养"造模前,3组小鼠强迫游泳静止时间及糖水消耗率差异无统计学意义(P值均＞0.05),造模结束后,对照组、CS组之间的游泳静止时间及糖水消耗率差异无统计学意义(P值均＞0.05),但对比CS组,CS肝郁组小鼠糖水消耗率显著降低(P＜0.05)、强迫游泳静止不动时间延长(P＜0.05).结论:高脂致石饲料联合21天"CUMS+孤养"模式可成功制备胆石症肝郁证动物模型.

当前梅核气诊断标准与咽喉检查技术更新进程脱节,与梅核气现代认识不符,临床实用性较差.将内镜视野下咽喉部体征信息纳入梅核气中医望诊体系,不但符合窍脏整体观,而且有利于梅核气的诊断与局部辨证.但是,构建基于内镜的梅核气咽喉中医望诊体系仍面临诊断标准框架亟待重构、病变部位笼统、咽喉征象中医内涵尚不明晰等挑战.针对以上挑战,须辨析梅核气的内涵及外延,重构诊断标准框架,设计符合梅核气疾病特征的咽喉征象采集方法,并在整体观念指导下明晰咽喉征象的中医内涵,进而为梅核气咽喉望诊体系临床应用提供依据.

目的 系统探索微观辨证领域研究总体情况及主题演化趋势.方法 本文采用文献计量学与科学知识图谱方法,并充分整合Citespace和VOSviewer 2种可视化软件优势,对国内微观辨证领域发文作者、机构合作、关键词共现、时间演变等情况进行系统剖析.结果 从总体发文看,微观辨证研究主要经历了起源、探索、发展、平台4个较明显阶段,该研究领域发文量整体呈上升趋势.此次文献研究中共包括38位高产作者,主要机构有湖南中医药大学、北京中医药大学、山东中医药大学等,机构间合作以中医药大学及其相应的附属医院为主.研究主题主要包括微观与宏观辨证、中西医结合、证的微观指标、辨证论治研究四大模块,各类模块间相互交叉、渗透.立足中医整体思维将微观辨证融入整体辨证的研究成为明显趋势.结论 微观辨证可弥补既往中医诊治的不足,提高临床诊断的准确性.但面对微观辨证领域研究未能得到理想发展问题,未来研究应注意开展多学科协作、多维度挖掘证的内涵,并遵循中医整体观念进行科研设计.

中医学将人体的状态分为未病态、欲病态、已病态和病后态.对于胆石症患者,未病态时以预防为主,未焚徙薪,防患于未然,健康管理以规范饮食、调畅情志、保持适度锻炼以巩固正气为要,增强体质.欲病态时以救其萌芽,早遏其路,防微杜渐为主,健康管理需引导民众养成健康的生活作息与习惯,注重城乡发展差异,关注易感人群,提升全民健康意识.已病态应及早诊治,掌握疾病发展、传变规律,防其传变,胆石症最大的危险是癌变,故胆石症一旦确诊就应把握时机,及时采取相应的治疗对策;病后态应休养生息,调摄正气,扶正以祛邪.患者的心理、精神健康管理尤为重要.术后宜清淡饮食,劳作有度,减少疾病复发的概率.

目的:通过比较不同模型建立方法,筛选制备高效、可靠的胆囊胆固醇结石动物模型.方法:将36只5周龄SPF级雄性ICR小鼠随机分为对照组、2％高脂组、1％胆固醇组,每组各12只.对照组采用普通颗粒饲料喂养,2％高脂组采用2％高脂饲料喂养,1％胆固醇组采用1％胆固醇饲料喂养.喂养16周,记录各组小鼠的死亡数量,计算存活率;观察并记录各组造模成功的小鼠数量及胆囊体积大小、胆汁的浑浊度、透光性等,计算小鼠成石率;ELISA法检测胆囊胆汁总胆固醇(total cholesterol,TC)、总胆汁酸(total bile acids,TBA)、磷脂(phospholipid,PL)及胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)的含量;HE染色观察小鼠胆囊、肝脏病理学变化.结果:对照组小鼠无死亡,胆囊大小正常,胆囊壁结构正常,胆汁澄清透亮,透光性好,胆囊内无沉淀;肝脏细胞排列整齐,结构完整.2％高脂组小鼠死亡1只,胆囊壁肌层变厚,浆膜结构及形态破坏,胆汁呈浑浊状态,透光性差,成石率为66.67％;肝脏细胞结构破坏严重,可见大量脂质空泡,肝脏存在明显的脂肪变性.1％胆固醇组小鼠死亡1只,胆囊体积明显增大,胆囊壁肌层毛糙、增厚,浆膜结构及形态破坏严重,胆汁呈褐色浑浊状态,透光性差,成石率约为83.33％;肝细胞排列紊乱,细胞结构破坏,肝脏出现小的脂质空泡.与对照组比较,2％高脂组和1％胆固醇组胆汁内TC含量升高,胆汁TBA、PL、CCK含量降低;与2％高脂组比较,1％胆固醇组胆汁TC、CCK含量降低,胆汁内TB、PL含量升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:1％胆固醇饲料喂养建立胆囊胆固醇结石动物模型效果最好,可作为胆囊胆固醇结石相关研究的备选模型.

针对《中医诊断学》(以下简称中诊)的课程特点和中诊教学互动中存在的问题,提出通过丰富互动方式、设计互动内容、评价互动效果等环节进一步优化该课程的教学互动,以促进课堂有效教学,激发学生学习中医的兴趣,培养其学习能力,做到教学相长.

目的:基于法尼酯衍生物X受体(FXR)/成纤维细胞生长因子15(FGF15)/成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)通路观察大柴胡汤加减对胆囊胆固醇结石(CS)湿热证模型小鼠的影响,以从方证对应的角度,探讨CS湿热证的分子生物学机制.方法:将48只6周龄小鼠随机分为空白组、模型组、大柴胡汤加减组(23.4 g·kg-1)和熊去氧胆酸组(0.12 g·kg-1),每组12只;空白组作为对照,其他3组采用"内湿+外湿+高胆固醇致石饲料"的模式造模12周建立CS湿热证小鼠模型,大柴胡汤加减组和熊去氧胆酸组给予相应的药物灌胃,模型组和空白组给予等量的生理盐水灌胃,共干预4周.造模前后每组小鼠均要进行旷场行为学实验判断其活动度和精神状态,每周观察记录各组小鼠体质量、饮食量、皮毛、二便等一般情况变化以评判其湿热证候表现;干预结束后,取各组小鼠肝脏、胆囊组织进行苏木素-伊红(HE)染色,对血清中γ-谷氨酰基转移酶(GGT),碱性磷酸酶(ALP),总胆红素(TBIL)指标进行生化检测;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测胆汁中总胆固醇(TC),总胆汁酸(TBA)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠回肠FXR,FGF15,以及肝脏FGFR4,胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)mRNA与蛋白表达水平.结果:与空白组比较,模型组小鼠胆囊增大,胆汁呈褐色浑浊状态,肉眼可见絮状沉淀;湿热证候表现明显;肝脏组织有明显的脂肪样变性,胆囊壁毛糙、增厚;血清肝功能指标ALP,GGT,TBIL水平均显著升高(P＜0.01);胆汁内TC含量显著增多(P＜0.01),TBA含量显著减少(P＜0.01);回肠组织的FXR mRNA与蛋白表达均显著升高(P＜0.01),FGF15mRNA和蛋白表达均明显升高(P＜0.05,P＜0.01),肝脏FGFR4 mRNA和蛋白表达量均明显增多(P＜0.05),CYP7AlmRNA表达显著降低(P＜0.01),蛋白表达量呈降低趋势但差异无统计学意义.与模型组比较,两用药组小鼠胆汁浑浊程度明显降低、其中大柴胡汤加减组小鼠胆汁更为澄澈;干预后大柴胡汤加减组小鼠湿热证候表现明显减轻;两用药组小鼠肝脏、胆囊病变程度均明显降低;两用药组小鼠血清肝功能指标ALP,GGT,TBIL含量均显著降低(P＜0.01),其中就ALP,TBIL两指标的降低程度来看大柴胡汤加减组更为显著(P＜0.01);两用药组小鼠胆汁内TC含量均显著减少,TBA含量均显著增多(P＜0.01),大柴胡汤加减组变化趋势较熊去氧胆酸组更为显著(P＜0.01);大柴胡汤加减组小鼠FXR mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),FGF15和FGFR4mRNA表达明显降低(P＜0.05),蛋白表达水平也有降低趋势,CYP7A1 mRNA表达明显增多(P＜0.05),蛋白表达有所升高;熊去氧胆酸组小鼠FXR,FGF15,FGFR4 mRNA与蛋白表达均有降低趋势,其中FXRmRNA表达明显降低(P＜0.05),CYP7A1 mRNA与蛋白表达均有所增加.结论:大柴胡汤加减可明显改善CS湿热证模型小鼠的结石情况、肝功能、胆汁成分、胆固醇-胆汁酸代谢异常及湿热证候表现,其机制可能与调控胆固醇-胆汁酸代谢通路的关键因子FXR,FGF15,FGFR4,CYP7A1 mRNA和蛋白表达水平有关.

"异病同治"体现了中医学辨证论治思想的精髓,对临床诊疗与科研具有重大指导意义.目前临床上胆石症多发,胆固醇代谢异常是其发生的重要机制之一,且已有研究表明肠道菌群可影响胆汁酸-胆固醇代谢,并对胆固醇结石的发生有着至关重要的影响.基于文献学习归纳发现,多种疾病湿热证候的病理表现均与肠道菌群存在一定相关,且湿热蕴结是胆石症常见的发病基础和病理表现.故在中医学"异病同治"理论指导下,将肠道菌群、湿热与胆石症三者结合起来,探讨三者间的作用机理,创新性地提出"肠道菌群可能通过影响胆固醇-胆汁酸代谢相关分子的表达导致胆石症湿热证的发生"的想法,旨为胆石症的学术研究和临床防治提供新的切入点.

中医思维是中医药学的根基和灵魂,是中医药传承发展的生命.强化中医思维、夯实临床技能是培养中医药特色人才的重中之重.目前,中医思维培养的"弱化"、"西化"和"僵化"问题较为突出.文章梳理中医思维培养存在的主要问题,从"优化课程体系、夯实国学基础;强化经典学习、注重临证体验;改革教学方法、加强技能训练;重视基地建设,拓展课外实践"等方面入手,思考并探索中医思维培养的有效路径,不断提升人才培养质量.

近年来,随着人民生活水平的提高,我国胆石症发病率逐年提高,本文就近几年胆石症常见的外科手术与中医治疗方法的研究进行概述,综合各类文献研究结果显示,手术治疗胆结石见效快但是并发症及复发率的问题较为突出;中医对胆石症的治疗独具特色、疗效显著;西医手术联合中医药治疗综合了各方面的优势,取长补短.目前胆结石的形成机制复杂且不完善,多与生活习惯、基因、体质等因素相关,术后结石复发的现象难以被精确分析及攻克,这是胆石症治疗研究的一大重要方向,需要各方继续努力.胆结石的临床治疗并不都要手术为主,要具体情况具体分析,针对病情、体质、个人意愿、经济等状况及当地的医疗卫生条件等酌情安排诊疗计划.术后药物调养和心理、情绪疏导的结合对胆结石的临床疗效改善十分重要.胆石症的诊疗要协调处理好治疗和后期调养,做到中西医并举、形神兼具,认真分析病发机制,对于亟待解决的难题要积极研究进行思考与展望.

"五辨"立足于中医原创思维,包括辨机、辨人、辨证、辨病、辨症,强调整体、动态地认识疾病,能够帮助防治疾病和指导处方用药.胆石症防治中运用"五辨"思维,辨机有利于掌握胆石症的内在机理,把握疾病的本质,帮助确立相应防治原则;辨人有利于判断胆石症的发展趋势,建立风险预警,根据不同个体特点"因人制宜";辨证有利于识别胆石症特定阶段的病理状态,分辨主次矛盾,判断病情发展变化,鉴别真假病证;辨病有利于把握胆石症的变化规律,帮助确立基本的治则治法;辨症有利于分析胆石症的矛盾特点,着重解决疾病的突出矛盾."五辨"思维灵活运用于胆石症的防治,可以为临床分析疾病、确立治则治法和指导处方用药提供理论依据,对于医者防治胆石症具有一定参考价值.

整体观念是中医学理论的根本特征之一,主要包括有机整体、天人合一、时空统一三个方面,它可以为胆石症的中医健康管理提供相应的理论指导.中医健康管理基于整体观念,全面采集三观信息,建立个人健康档案;整体辨识健康状态,帮助疾病风险预警;综合评估分析,提供中医健康管理指导;全程跟踪反馈,动态调整干预方案,有效调节胆石症患者的健康状态,促使患者病情向好发展,也为胆石症的临床治疗提供参考.

目的 通过建立三种胆囊胆固醇结石湿热证小鼠模型,分析并评价模型间差异,基于中医基础理论探索合适的胆囊胆固醇结石湿热证动物模型.方法 将24只C57BL/6J小鼠,随机分为空白对照组(K组)、内因模型组(M组)、内外因模型A组(A组)、内外因模型B组(B组).K组采用普通饲料喂养并给予正常饮用水;M组采用高脂高胆固醇致石饲料喂养,给予20％蔗糖水饮用;A、B组给予高脂高胆固醇致石饲料和20％蔗糖水并置于湿热环境中,造模周期为12周,其中A组全程处于湿热环境,B组造模后4周置于湿热环境.观察并记录各组小鼠造模前后的一般状态,进行旷场实验;造模结束后取材并进行相关指标检测.结果 与K组相比,M、A、B三组出现不同程度的湿热证的中医临床证候表现,体视镜下小鼠胆囊可见不同程度浑浊,HE染色表明肝脏、小肠、舌组织出现胆结石和湿热证相关的病理性改变,血清碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)和间接胆红素(IBIL)也不同程度的增高,胆汁中胆固醇(TC)、胆汁酸(TBA)含量升高;综合评价以上结果,B组更显著地体现了胆囊胆固醇结石湿热证候.结论 给予高脂高胆固醇致石饲料和20％蔗糖水12周加湿热环境4周的综合造模方法,可复制质量良好的胆囊胆固醇结石湿热证动物模型.

为进一步提升学生综合分析四诊信息进行辨证论治的能力,解决当前中医实训规范化不足、中医思维能力训练欠缺的问题,研究团队围绕中医思维特点,以证素辨证原理为指导,采用虚拟仿真技术模拟真实世界中医临床辨证论治的全过程,开展中医思维训练虚拟仿真系统研究,通过设置四诊归类、证素辨证、综合案例三个模块,为学生搭建起一个涵盖中医基础理论知识学习、中医辨证思维培养和临床实践技能训练的现代化中医实训平台.

胆石症病位在肝胆,肝胆疏泄失常,胆液郁滞日久化热,湿热熏蒸胆道而致本病.其中,肝郁为本病发生的基础和关键,湿热为本病迁延发展的重要因素.现代医学研究表明,胆石症相关微观指标与肝郁证、湿热证密切相关.肝郁证胆石症患者的胆汁黏度指数、谷酰转肽酶升高;湿热证患者的白细胞计数、中性粒细胞比值、β内啡肽升高等.胆石症的辨治应中医宏观辨证与现代医学微观辨证相结合,辨病与辨证相结合.继续深入研究临床证候的微观量化指标,可针对胆石症肝郁证、湿热证的生物学基础与药物干预机制展开研究.

肾藏精主骨生髓,髓居骨内以养骨,肾虚髓亏,骨髓生化乏源,则骨髓基质干细胞分化失衡,是绝经后骨质疏松症(PMOP)骨痿的病理基础.骨免疫失衡,引起血清中miRNA差异表达,在骨髓基质干细胞成骨-成脂分化过程中发挥重要调控作用,提示miRNA调控骨髓基质干细胞分化失衡可能是PMOP肾虚证的物质基础.因此,文章借鉴现代分子生物学技术,初步探讨miRNA调控骨髓基质干细胞分化失衡在肾虚证形成过程中作用,旨在探索PMOP肾虚证微观层次的诊断依据,从而丰富肾主骨的科学内涵.

基于“理论教学与临床实践脱节,中医临床辨证思维弱化”是《中医诊断学》教学的共性问题,提出教学—模拟—实践三位一体的多元化教学模式,开设中医诊断临床模拟训练的教程,增加理论教学与临床实践的过渡环节,采用点线面教学设计、教考分离与多元评价的方法,改革教学内容,创新教学形式,建立了多元、开放、动态的培养模式,遵循中医 药人才的成长规律,从而实现强化中医思维的核心目的,为中医卓越人才培养提供新策略.