Yangzheng mixture has been used as adjuvant tumor therapy as a traditional Chinese medicine in clinical. However, less is known about the toxicity of Yangzheng mixture. In our study, we explored the anti-tumor activity of Yangzheng mixture for HCC in vitro and in vivo.The effects of Yangzheng mixture on HCC biological behaviors were assessed using colony formation assay, EdU staining, cell cycle assay, Annexin V/PI staining, and wound healing assay. Migration and invasion of HCC cells were further evaluated via transwell assays, while molecular mechanisms were investigated through western blotting and immunofluorescence staining. Additionally, the anticancer effect of Yangzheng mixture in vivo were examined using H22 xenograft and H22 metastatic hepatocellular carcinoma models.Our results revealed that Yangzheng mixture inhibited colony formation, EdU incorporation, cell migration, and invasion, while arresting cell cycle at the G2-M phase in Bel-7402 and SMMC-7721 cells. Mechanistic studies demonstrated that Yangzheng mixture showed a markedly inhibition on Bel-7402 and SMMC-7721 cells with higher NLRP3 expression. We further confirmed that Yangzheng mixture could activated NLRP3 inflammasome through NF-κB by western blotting and immunofluorescence staining. Additionally, Yangzheng mixture inhibited β-catenin nucleus translocation and reversed EMT process. In vivo, the H22 xenograft model depicted that Yangzheng mixture significantly reduced tumor size and weight compared with control. Moreover, H22 lung metastasis model showed that Yangzheng mixture significantly inhibited liver cancer cell spreading to lungs in mice.Overall, our finding revealed that Yangzheng mixture inhibited HCC proliferation and migration in vitro and in vivo by reversing EMT via NF-κB/NLRP3/β-catenin pathway. These results may serve new therapeutic evidences for Yangzheng mixture application in clinical.

目的 建立龙生蛭胶囊的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别方法进行质量评价.方法 采用HPLC法建立龙生蛭胶囊的指纹图谱,进行相似度评价,确定共有峰;对测定结果进行层次聚类分析和主成分分析,并结合正交偏最小二乘-判别分析对样品进行模式识别,以VIP值大于1为标准筛选影响龙生蛭胶囊质量的差异性成分.结果 19批龙生蛭胶囊样品的HPLC指纹图谱共标定了20个共有峰,相似度均大于0.95,指认了9个共有峰,分别为槲皮素、没食子酸、原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸、芍药苷、刺五加苷E、异嗪皮啶、毛蕊异黄酮葡萄糖苷.19批样品可分为2类;前4个主成分的累积方差贡献率为85.504％;以VIP值大于1为标准,筛选出8个主要峰,13、8、2(没食子酸)、3(原儿茶酸)、1(槲皮素)、14(芍药苷)、10、11号峰.结论 建立了龙生蛭胶囊更全面、系统的质量评价和分析方法,为龙生蛭胶囊的质量标准提高提供理论依据.

Objective To study the bioequivalence of generic and original hydrochloride terazosin tablets in Chinese healthy subjects after single dose under fasting conditions. Methods A single-center, random, open, single-dose, two-preparations, double-period, crossover study was adopted. A total of 24 healthy adult male and female subjects were included in the random crossover administration. Single oral dose 2 mg of test and reference were taken, respectively. Plasma concentration of terazosin was determined by liquid chromatography tandem mass spectrometry. The main pharmacokinetic parameters were calculated by Phoenix WinNonlin 8.0 software. Results The main pharmacokinetic parameters of the test and reference preparations of hydrochloride terazosin tablets in the fasting group were as follows: C max were（53.79±9.77） and（57.62±14.18） ng·mL -1 , AUC 0-t were（519.90±179.49） and（551.99±143.15） ng·mL -1 ·h, AUC 0-∞ were（565.59±161.15） and（576.91±149.43） ng·mL -1 ·h, t max were 1.00（0.28, 2.02） and 0.75（0.50, 1.67） h, t 1/2 were（10.35±1.71） and（10.30±1.61） h. Under fasting conditions, the 90% confidence intervals of the main pharmacokinetic parameters of the test and reference preparations were in the range of 80.00%-125.00%. Conclusion Under fasting conditions,a single oral dose of generic and original hydrochloride terazosin tablets in Chinese healthy adult volunteers showed bioequivalence.

为了解秦岭龙胆(Gentiana apiata)开花前后的多糖含量变化,利用响应面法优化多糖的提取工艺,并对多糖抗氧化活性进行测定.结果表明,秦岭龙胆开花后的多糖含量高于未开花的.秦岭龙胆开花药材的多糖最佳提取工艺为提取3 h,料液比1:16,醇沉比为1:10,离心速率1537×g,多糖的提取率为5.13％,与预测的5.42％接近.多糖对DPPH和ABTS均有一定的抗氧化能力,且高于维生素C(Vc)和二丁基羟基甲苯(BHT).因此,秦岭龙胆除作为药用外,也可作为抗氧剂用于食品、保健品领域.

目的 预测龙生蛭胶囊中"桃仁-红花-川芎"药组治疗脑卒中的药效物质基础及作用机制.方法 利用中医药整合药理学研究平台V2.0(TCMIP V2.0),将"桃仁-红花-川芎"药组化学信息进行靶标预测,构建与脑卒中相关疾病靶标信息的蛋白互作网络(PPI),采用通路富集分析药组干预疾病的关键靶标,并构建"桃仁-红花-川芎"药组活性成分、关键核心靶标和疾病相关通路的PPI,绘制"中药-活性成分-关键核心靶标-通路"网络图,分析与核心靶标相关的主要成分,并采用分子对接技术对活性成分进行虚拟筛选.结果 共预测到活性成分19个,核心网络靶标62个,其中药物靶标27个,疾病靶标35个,疾病与药物共有靶标2个(NR3C1,APP);其药效物质基础主要为生物碱类、挥发油类、黄酮类、有机酸类等成分;"桃仁-红花-川芎"药组主要活性物质与细胞外信号调节蛋白激酶2(ERK2)、Janus激酶2(JNK2)形成较好的对接模式与较高的亲和力,具有治疗脑卒中的活性.结论 龙生蛭胶囊中"桃仁-红花-川芎"药组通过多成分、多靶点、多通路的形式发挥脑卒中治疗作用,其作用机制可能与调控ERK2和JNK2等核心靶标有关.

目的:建立天麻蜜环菌的质量标准.方法:采用薄层色谱法(TLC)建立天麻蜜环菌鉴别方法,按照《中华人民共和国药典》2020年版(四部)通则2331测定天麻蜜环菌中二氧化硫的残留量,并建立天麻蜜环菌中染料木素、麦角甾醇高效液相色谱法(HPLC)测定方法.结果:建立的TLC色谱图中,天麻蜜环菌样品与天麻蜜环菌对照药材在相同位置上显示相同颜色的斑点.3批天麻蜜环菌样品中二氧化硫残留量为9.477～15.905 mg·kg–1,均低于《日本药局方》第17版与《美国药典》43版要求.建立的天麻蜜环菌HPLC测定方法,染料木素、麦角甾醇线性关系良好(r分别为0.9995、0.9998),平均加样回收率分别为102.90％、101.29％,RSD均小于2％.结论:建立的天麻蜜环菌测定法具有方法简单、稳定性好、专属性强的优点,能够用于天麻蜜环菌质量评价.

冠心舒通胶囊主要由广枣、丹参、丁香、冰片、天竺黄五味药组成的现代中药制剂,具有活血化瘀、通经活络、行气止痛的作用.现代研究发现其可产生对抗心肌细胞凋亡、增加心肌能量代谢、调节血脂、降低炎症水平、抗氧化应激等药理作用,临床上通常将其配合常规给药治疗心血管疾病可明显提升临床效果,降低不良反应,改善并发症.本文通过对冠心舒通胶囊产生药理作用的机制及其临床应用进行总结,为该药揭示科学内涵及拓展临床应用提供理论参考.

目的:优化地黄多糖及梓醇的共提取条件,并评价抗氧化活性.方法:采用单因素试验结合响应面-满意度函数优选最佳共提取工艺.利用DPPH和ABTS自由基对地黄的抗氧化活性进行研究.结果:地黄中多糖与梓醇的共提最佳条件为乙醇浓度30％、提取时间16 min、液料比10:1(mL/g)时,多糖提取率为16.15％,梓醇提取率为0.92％,与预测值17.31％、0.94％接近.地黄对DPPH和ABTS均有一定的抗氧化能力,且具有一定的量效关系.结论:响应面?满意度函数可用于地黄中多糖及梓醇共提取工艺的优化,该方法快速、简单、稳定,此条件下的地黄提取液具有显著的抗氧化活性.

目的:研究山楂核干馏液抗炎和抗菌的主要物质基础.方法:使用干馏釜制备山楂核干馏液;通过大孔吸附树脂柱色谱对干馏液进行分离;基于气相色谱-质谱法对山楂核干馏液进行分析;以脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7生成一氧化氮模型评价山楂核干馏液的抗炎作用,采用微稀释法评估其体外抑制白色念珠菌生长活性,采用灰色关联度分析法建立其谱效关系,以评估其抗炎和抗菌活性,并筛选主要活性化合物.结果:山楂核干馏液及其4个亚流分具有明显的抗炎作用和抑制白色念珠菌生长作用,其中F r.B的抗炎和抗菌作用均较强.从山楂核干馏液4个流分的色谱图中确定12个共有峰,其中发挥主要抗炎作用的成分为4、6、2、9号峰,质谱分析鉴定4个峰分别对应2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、1,2,5-三甲氧基-3-甲基苯、2,6-二甲氧基苯酚和乙酰丁香酮;发挥主要抗菌作用的成分为4、2、9、11号峰,质谱分析鉴定这4个峰分别对应2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、2,6-二甲氧基苯酚、乙酰丁香酮和二氢芥子醇.结论:山楂核干馏液具有较好的抑制脂多糖诱导的RAW264.7细胞生成一氧化氮的作用,同时对白色念珠菌的生长具有显著的抑制作用,明确了山楂核干馏液中2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、1,2,5-三甲氧基-3-甲基苯、2,6-二甲氧基苯酚和乙酰丁香酮4个成分对其抗炎作用贡献最大,2,6-二甲氧基-4-甲基苯酚、2,6-二甲氧基苯酚、乙酰丁香酮和二氢芥子醇对其抗菌作用贡献最大.研究结果为山楂核资源的开发利用及相关产品质量标准的制定提供参考.

目的 基于整合药理学,研究当归抗动脉粥样硬化(Atherosderosis,AS)的作用机制.方法 借助中药整合药理学平台(TCMIP V2.0),预测分析当归抗动脉粥样硬化的机制及其药效物质基础.结果 当归抗动脉粥样硬化的17种有效成分,直接或间接作用于PPARG(过氧化酶体增殖物激活受体)、APOE(载脂蛋白E)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)、炎性趋化因子(CCL2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、MTTP(微粒体三酰甘油转移蛋白)等26个核心药靶,这些药靶作用涉及胆固醇跨膜转运、胆固醇酯代谢、炎症反应、脂质氧化修饰、PPARα 活性基因的表达等10条主要调控通路.结论 可预测当归中部分有机酸和挥发油成分主要通过PPARG、MTTP靶标作用炎症及脂质代谢通路对抗AS的发生.

目的 提高小儿健胃咀嚼片的质量标准.方法 采用薄层色谱法(TLC)对荷叶、麦芽进行定性鉴别;采用超高效液相色谱法(UPLC)同时测定陈皮中橙皮苷和芸香柚皮苷的含量,色谱柱为Waters BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)柱,流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,柱温为35℃,进样量为2μL,检测波长为283 nm.结果 TLC鉴别斑点清晰,荷叶、麦芽供试品在与对照品、对照药材色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点,且阴性样品无干扰;橙皮苷、芸香柚皮苷的线性范围分别为10.17～152.60、4.35～65.25μg·mL-1,平均回收率分别为101.14％、100.77％,RSD值分别为1.41％、1.66％.结论 该方法操作简单,结果准确可靠,可用于小儿健胃咀嚼片的质量控制.

将微滤、超滤膜技术应用于康妇炎胶囊制剂二次开发中的分离纯化操作单元,研究其替代传统醇沉法的可行性.以康妇炎胶囊制剂中药水提液及其中间体干浸膏的理化性质为考察指标,分析比较膜技术与醇沉法的分离纯化效果;同时考察膜操作条件对膜通量及膜污染的影响.结果表明,经膜技术分离纯化后,康妇炎胶囊制剂中药水提液的浊度、黏度等均有不同程度的降低.在杂质整体去除方面,醇沉法优于膜技术;而在有效成分保留方面,膜技术优于醇沉法.同时,膜技术可降低康妇炎胶囊制剂中药干膏粉的吸湿性,提高了干膏粉的稳定性.跨膜压差、料液流速等工艺参数对膜通量及膜污染具有重要影响,需通过工艺优化,确定适宜的膜工艺参数.根据以上研究结果与分析,将膜技术应用于康妇炎胶囊制剂二次开发中的分离纯化操作单元具有一定的适宜性、可行性.

目的:研究乳香的薄层色谱鉴别方法,为乳香的质量控制提供依据.方法:采用薄层色谱法对乳香中所含成分进行定性鉴别.结果:不同产地和批次乳香所含成分与对照药材所含成分基本相同.结论:本法操作简便,重复性好,效果明显、稳定.

目的 通过动物实验和网络预测的形式来揭示龙生蛭胶囊中"黄芪-当归-刺五加"药组治疗脑卒中后PSCI(PSCI)的作用机制,为龙生蛭胶囊的开发研究及临床应用提供参考.方法采用Morris水迷宫实验评价"黄芪-当归-刺五加"药组对PSCI大鼠行为学的影响,同时对血清生化学相关指标进行测定和比较;采用整合药理学平台(TCMIP V2.0)对"黄芪-当归-刺五加"药组治疗PSCI的作用机制进行挖掘与预测.结果"黄芪-当归-刺五加"药组对PSCI大鼠的空间记忆能力和学习能力具有良好的改善作用;同时药组还能显著降低模型脑卒中大鼠血清中丙二醛(MDA)的含量,提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性.共预测得到27个活性成分,11个药物与疾病的共有靶标.结论证实了"黄芪-当归-刺五加"对PSCI大鼠的行为学及血清生化指标具有一定的影响及改善作用,同时也初步预测了"黄芪-当归-刺五加"药组治疗PSCI的药效物质基础及作用机制,可为龙生蛭胶囊的进一步开发利用提供参考.

目的 采用正交试验-满意度函数法优化黄精的酒炙工艺,并对炮制前后黄精的抗氧化能力进行对比研究.方法 在单因素试验的基础上,以酒黄精的水溶性浸出物、醇溶性浸出物、多糖含量、性状等为评价指标,利用正交试验结合满意度函数法进行工艺参数优化,确定黄精的最佳酒炙工艺;利用清除DPPH自由基试验及ABTS自由基测定法比较黄精及酒黄精的抗氧化活性.结果 酒黄精的最佳工艺为:闷润5h,蒸制2h,蒸制3次.在此条件下,所得酒黄精色泽黑润,酒香浓烈,嚼之黏性足,微甜,符合《中国药典》中的要求;验证性试验的平均总体满意度为0.98,RSD=1.35％.黄精炮制前后均具有一定的抗氧化活性,且对自由基的清除率均呈浓度依赖性,其抗氧化性能力与酒炙存在一定的内在关联性.结论 采用正交试验-满意度函数法进行黄精酒炙工艺的优化,可部分消除各因素间的交互影响,所得工艺参数更加稳定、可靠;酒炙对黄精的抗氧化性存在一定的影响,其具体的作用机制有待研究.

目的:建立指纹图谱、多指标定量相结合的头痛宁胶囊质量评价方法.方法:采用高效液相色谱法,选用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);以甲醇-0.1％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL· min1;柱温:30℃;检测波长:220 nm(0～40 min)、290 nm(40～100 min);进样量:10 μL.运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”对15批样品色谱图进行分析,以落新妇苷为参照,确定22个共有峰为特征峰,相似度均＞0.977;天麻素、阿魏酸、落新妇苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、二苯乙烯苷线性关系良好,r均＞0.999 9,加样回收率在95.5％～98.9％,RSD＜5％(n=6).结论:该方法简便、准确及专属性强,可用于头痛宁胶囊质量控制和综合评价.

目的:探讨龙生蛭胶囊对高脂喂养的ApoE-/-小鼠心肌肥厚的抑制作用.方法:以C57BL/6雄性小鼠为正常对照组,给予普通饲料.ApoE-/-雄性小鼠随机分为模型对照组、龙生蛭胶囊0.45 g/kg、1.2 g/kg、1.8 g/kg组、辛伐他汀0.0025 g/kg组,采用高脂饲料喂养12 w造模,连续灌胃给药8w后检测小鼠左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、左室舒张末期直径(LVIDd)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)、心脏体重比(HW/BW);HE染色观察小鼠心肌形态学的变化并测量心肌细胞跨核最短直径及横截面积;取血检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)含量及抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织中Bax、Caspase-3蛋白表达.结果:和正常对照组比较,模型对照组小鼠心脏EF、FS明显减弱,LVIDd、LVPWd、HW/BW值显著增加;心肌细胞肥厚,排列松散,心肌细胞跨核直径、横截面积显著增加;血清中TC、TG含量显著增加,MDA含量显著增加、SOD活性显著下降;心肌组织中Bax、Caspase-3蛋白表达显著上调(P＜0.05或P＜0.01);和模型对照组相比较,龙生蛭胶囊1.2 g/kg、1.8 g/kg组心脏EF、FS明显增强,LVIDd、LVPWd、HW/BW值明显降低,明显改善心肌细胞肥厚,心肌细胞跨核直径、横截面积显著降低,TC、TG含量明显降低、抗氧化SOD活性显著升高、MDA含量显著降低,同时能够明显下调心肌组织中Bax、Caspase-3蛋白表达(P＜0.05或P＜0.01).结论:龙生蛭胶囊对ApoE-/-小鼠的心脏保护作用可能是通过抗氧化作用,抑制细胞凋亡发生.

目的:探讨二根龙蛭汤改善卒中后认知功能的分子作用机制.方法:借助整合药理学平台(TCMIP),对二根龙蛭汤改善卒中后认知功能的分子机制进行研究.结果:二根龙蛭汤共预测核心成分53个,主要为挥发油、有机酸、黄酮类、生物碱类等;其作用于55个关健靶标,有Na+/K+ATP酶A1亚基(Sodium/potassium-transporting ATPase subunit alpha-1,ATP1A1)、细胞色素C氧化酶(cytochrome c oxidase subunit 7C,COX7C)、磷脂酶D2(phospholipase D2,PLD2)、雄激素受体(androgen receptor,AR)、维生素D受体(vitamin D3 receptor,VDR)等;涉及到30条主要通路,有信号转导、Fox0信号通路、ErbB信号通路、神经营养因子信号通路、神经系统、神经退行性疾病等生物过程和代谢通路.结论:二根龙蛭汤改善卒中后认知功能的分子作用机制可能与卒中后认知障碍发病机制及药物活性成分有一定吻合,证明TCMIP在预测中药及复方作用机制方面具有较高的准确性.但研究结果还需要进一步实验研究加以验证.

目的基于"成分反映活性,活性指向功效"的中药质量控制研究思路,建立用于赤芍饮片等级评价的Logistic回归模型。方法采用超高效液相色谱（UPLC）法测定质量标志物芍药苷的含量,以赤芍抗凝血生物效价,羟自由基抑制率和DPPH抑制率作为生物活性评价指标,运用Logistic回归分析法将各批次芍药苷含量和生物活性指标进行关联分析,最终建立用于赤芍4个等级（优、良、中、差）评价研究的"主成分分析-Logistic回归"模型。结果等级评价结果显示,各批次赤芍的等级概率达到了95%以上。16个批次的赤芍饮片分布在优级、良级和中级各有5个批次,差级有1个批次。结论初步建立了不同批次赤芍饮片等级评价的新方法,并用于赤芍饮片质量的评价。

目的:采用整合药理学方法预测清肺排毒汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的现代功效及作用机制,为其进一步开发研究及临床应用提供参考.方法:依托中医药整合药理学研究平台V2.0,预测清肺排毒汤治疗新型冠状病毒肺炎的的关键靶标和作用通路,绘制“方剂-中药-疾病-关键靶标-作用通路”多维网络图,中西医结合探讨其临床作用及作用机制.结果:预测得到的清肺排毒汤排名前20的核心靶标如细胞肿瘤抗原p53 (tp53),蛋白激酶B1(Akt1)以及系列核因子核转录因子-κB(NK-κB)p105亚基(NFKB1),核因子p65亚基(RELA),人NK-κB抑制蛋白α(NFKBIA)等大多与肺部损伤相关.推测清肺排毒汤可能通过调控白细胞介素(IL)信号通路、肾上腺素受体,C型凝集素域家族7成员A(CLEC7A)/炎症途径,磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)炎症信号传导通路,tp53调节的DNA修复基因的转录等相关信号通路,针对肺炎、发烧咳嗽等症状起治疗作用.研究结果表明,清肺排毒汤具有抗炎、抗病毒、增强免疫力、抑制肺纤维化发展、保护心肺、治疗哮喘、调理胃肠道等临床疗效多方面功效,且合方之原方间呈现出较好的协同作用又各有侧重.结论:预测清肺排毒汤可通过多途径、多靶点、多环节防治COVID-19,且合方功效优于原方,适用于COVID-19各个病程的治疗.本研究结果为预测清肺排毒汤的临床应用提供理论依据,同时为中医药防治现代传染性疾病提供研究思路.