As a kinds of small extracellular vesicle, exosomes are actively secreted by different cells.In recent years, there has been continuous evidence that exosomes can participate in and mediate many physiological processes of target cells.Exosomes contain many types of microRNA（miRNA）,DNA and proteins, can facilitate the transfer of information between cells, regulates receptor cell-related gene expression and affects target cell function.As the pathological basis of disease, cell injury involves exosomes in its regulation, exosomes can not only act on intercellular signaling pathways, but also regulate cell damage and repair by acting on targeted proteins through exosome miRNAs.This paper summarizes the research progress on the role of exosomes in cell injury, and prospects its application in animal diseases.

为建立一种鉴别猪塞内卡病毒A(SVA)、猪水疱病毒(SVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)的方法,针对3种病毒的基因保守区域设计引物和探针,建立了可同时检测上述3种病毒的TaqMan三重荧光定量PCR方法.该方法仅能特异性扩增SVA和FMDV病毒基因以及SVDV阳性质粒,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、经典猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒的阳性样品cDNA或DNA无交叉反应,对3种病毒核酸的最低检出限均为10 copies/μL,组内和组间变异系数均小于4％.应用该方法对2019-2022年采集的吉林省部分地区267份病料和本实验室留存的30份猪血清样品进行检测,未检出SVA、FMDV以及SVDV.建立的三重荧光PCR方法有利于对3种病毒进行有效的流行病学调查,可给快速准确鉴别致猪水疱症状病毒性疾病提供诊断方法.

以截短的尼帕病毒(NiV)G基因原核表达产物为抗原建立检测尼帕病毒抗体的间接ELISA检测方法.对编码尼帕病毒G蛋白基因的部分序列进行扩增,将扩增获得的 目的片段克隆至原核表达载体pET-30a(+),并转化至大肠杆菌BL21(DE3).菌落PCR鉴定后,在最佳诱导条件下表达目的蛋白.用Ni-NTA柱纯化截短的G蛋白,并进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定.以纯化的蛋白为抗原建立尼帕病毒抗体间接ELISA检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性、稳定性进行验证.结果显示:成功构建重组质粒pET-30a(+)-NiV-G;表达的尼帕病毒截短G蛋白分子质量为50 ku,与预期值相符;截短的G蛋白能被His-tag抗体、抗尼帕病毒G蛋白粗提IgG识别.以该蛋白为包被抗原建立的间接ELISA检测方法检测已知阳性血清尼帕病毒抗体效价为1∶20480,裂谷热病毒、西尼罗病毒及克里米亚-刚果出血热病毒阳性马血清的检测结果均为阴性,且该方法批内、批间试验变异系数均小于10％.结果表明,成功构建了重组质粒pET-30a(+)-NiV-G,并诱导表达尼帕病毒截短G蛋白.以该蛋白建立的尼帕病毒抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性、灵敏性、稳定性,可用于尼帕病毒疫苗免疫效果的评价、尼帕病毒病的监测及尼帕病毒抗体检测试剂盒的研发.

猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)是一种新型猪肠道冠状病毒,可靶向感染猪小肠绒毛上皮细胞,引起严重肠炎.PDCoV感染宿主后,通过拮抗或逃避先天免疫信号转导通路完成在宿主体内的增殖.为了解PDCoV对先天免疫信号转导通路的作用机制,通过综述PDCoV对RLR信号通路、JAK-STAT信号通路、MAPK信号通路、线粒体信号通路的作用,阐明PDCoV与宿主先天免疫信号转导通路之间的关系,以期为PDCoV的防治提供帮助.

紧密连接是广泛存在于上皮细胞之间的一种黏连复合物,与黏附连接、间隙连接和桥粒共同构成上皮细胞连接复合体,在细胞旁途径发挥重要作用.作为肠屏障的重要组成部分,紧密连接不断受到外界刺激(如病原体、细胞因子、药物、缺血、缺氧等)的威胁,它们能通过影响紧密连接的定位、表达或紧密连接蛋白的磷酸化或去磷酸化,介导多个信号通路来改变跨上皮通透性,影响肠屏障的完整性,从而引起各种肠道疾病.本文主要从紧密连接的结构、组成、功能以及调控4个方面进行综述,为进一步研究肠道紧密连接和防控肠道疾病提供参考.

抗菌肽是一种小分子多肽,可抵抗外源性病原微生物的侵袭.动物血液是畜禽屠宰加工的主要副产品,具有较高的营养价值,近年来发现血液中不但富含蛋白质,还存在多种生物活性肽,如免疫增强肽、抗氧化肽、抗肿瘤肽和抗菌肽等,具有极为广阔的开发和应用前景.论文综述了动物血源性抗菌肽的分类、提取方法和临床应用,并对其应用前景进行了展望,为抗菌肽的应用和开发提供理论依据.

目的 了解吉林省长春地区犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)的流行及VP2基因的遗传进化特征. 方法 通过比对GenBank中已收录的不同地区、不同时间的CPV毒株基因序列,筛选保守区,设计特异性扩增完整VP2基因的通用型引物,采集疑似犬细小病毒病的犬粪便样品15份,提取DNA,PCR扩增获得完整的VP2基因并测序.将15份样品的测序结果与GenBank中已收录的22株CPV的VP2基因进行同源性比对并构建进化树,分析亚型以及遗传进化情况. 结果 PCR检测15份样品均为CPV阳性.样品株与参考株的核苷酸同源性为98.7％～99.9％,与4株商品化疫苗株的核苷酸同源性在98.1％～98.9％,遗传进化分析显示,15个分离株均为CPV-2c亚型,且所在分支十分接近,但未与所选CPV-2c亚型参考株在同一分支上. 结论 长春地区CPV流行亚型由CPV-2a、CPV-2b逐渐转变为CPV-2c,表明CPV-2c亚型的流行性越来普遍,CPV遗传变异趋势的监测和新型疫苗的研发应得到更多关注.

为了研究我国东北三省部分地区猫细小病毒(Feline parvovirus,FPV)基因的遗传进化情况,试验用PCR方法对我国东北地区25份猫肛拭子进行检测,并对检测结果呈阳性的猫进行细小病毒VP2基因克隆测序,然后进行遗传进化分析.结果 表明:经PCR扩增有10份为FPV阳性,其VP2基因序列与标准株M38246和疫苗株EU498681及EU498680的相似性达99.1％以上,有9株属于G1群,1株属于G2群.说明东北地区FPV基因型主要以G1群为主.

依据英国联合信息委员会提出的科研生命周期理论,通过文献调研探讨研究人员在科学研究过程中的需求,挖掘图书馆学科馆员支持研究人员的潜在角色.结果表明,学科馆员可以在数据保存、数据分析、数据共享、学术交流、数据权益等等方面提供学科支持服务.

细小病毒(parvovirus)属细小病毒科(parvoviridae)、细小病毒亚科(parvovirinae)、细小病毒属(protoparvovirus),是单链线状DNA病毒,病毒颗粒无囊膜.细小病毒自然感染宿主范围广,包括脊椎动物、无脊椎动物及人类.由细小病毒引起的细小病毒病正在全球范围内流行并严重威胁着人与动物的健康.现阶段实验室应用广泛的细小病毒分子生物学检测方法主要包括:实时荧光定量PCR检测、核酸探针检测、环介导等温扩增反应(loop-media-ted isothermal amplification,LAMP)、重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)、DNA芯片技术等方法.本综述分别对不同细小病毒的分子生物学检测方法的研究进展进行阐述.

为了研究猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的变异情况,试验采用分离病毒时添加胰蛋白酶的方法,从病死仔猪肠组织中成功分离鉴定出1株PEDV变异毒株,命名为CH/JLDH/2016,应用纳米巢式PCR法鉴定分离株,电镜负染观察,并对该分离株S基因序列特征和遗传进化关系进行分析.结果表明:经纳米巢式PCR扩增得到目的条带;在透射电子显微镜下可观察到完整的病毒粒子,具有冠状病毒典型结构;与现有疫苗株CV777相比,分离株S基因存在16处碱基的插入、10处碱基的缺失并伴有大量碱基突变,其推导的氨基酸序列存在5个氨基酸的插入和3个氨基酸的缺失;该分离株与疫苗株CV777处于不同分支,亲缘关系较远,而与近几年分离得到的PEDV变异毒株亲缘关系较近.说明PEDV呈现进化和变异趋势.

2018年9月5日,吉林省野生动物救护繁育中心发生1例自繁自养的东北虎感染犬腺病毒Ⅰ型病例.该病例从发病到死亡病程较长,以食欲下降至废绝,饮水量降低,精神萎靡不振,呕吐,眼窝凹陷为特征.剖检发现,肝脏颜色暗黑,肾脏肿大,脾脏肿大,胃部有出血,牙龈及口腔色泽苍白无血色.临床血液生理生化指标检测显示,此虎贫血,肝、肾功能损伤.通过试纸条检测确诊感染犬腺病毒 Ⅰ 型病毒.

宠物用血液制品是由健康动物的血液或经特异免疫的动物血浆,经分离、提纯或由重组DNA技术制成的血浆蛋白成分,以及血液细胞有形成分的统称.文中对血液生物制品的概念及作用、宠物血液生物制品的种类及临床应用、宠物血液生物制品的制备技术及工艺进行论述,为我国宠物用血液生物制品的研发提供参考.

外泌体(exosome)是通过细胞内多泡体与细胞膜融合产生的纳米级细胞外膜泡,广泛分布在血清、尿液、唾液和其他生物液体中.外泌体作为细胞间通信和遗传物质的重要转移载体,可通过受体介导的相互作用或通过各种生物活性分子(如细胞膜受体、蛋白质、mRNA和miRNA)的转移直接刺激靶细胞,从而发挥其生物学功能.文章主要综述了外泌体内含蛋白质和miRNA的功能及外泌体在临床中的应用.外泌体内蛋白质和miRNA的功能包括生理状态下诱导机体免疫、递呈抗原、参与细胞间信号传导;病理状态下改变肿瘤微环境、促进癌细胞增殖、侵袭、加快血管生成、促进癌症发展;以及某些病毒可将其组分包装、整合到外泌体中来实现细胞间传播,或劫持外泌体,实现免疫逃避.作者主要介绍了其作为肺癌、乳腺癌、胰腺癌及结直肠癌等多种癌症早期诊断的生物性标志物,以及作为稳定性高、转运效率高、靶向性强的药物载体在临床中的应用.

犬细小病毒(CPV)属细小病毒科细小病毒属成员.CPV为无囊膜的线性单股负链DNA病毒,其基因组全长约为5 300 nt,由4个开放阅读框(ORF)组成,为编码结构蛋白的VP1和VP2,.非结构蛋白NS1和NS2组成.衣壳蛋白VP1和VP2蛋白构成互相叠加,其中VP2蛋白占总衣壳的90％.VP2蛋白是构成病毒抗原决定簇的主要组成部分,该蛋白可使机体产生中和抗体[1].将近40年的流行过程,CPV发生了多次抗原变异,出现了CPV-2a、CPV-2b及CPV-2c亚型,而且病毒能在猫体内增殖并引起发病.

细小病毒作为一种宿主广泛的病毒,流行已将近一个世纪.而今,已成为侵染动物最频繁的病毒之一.第一例猫细小病毒(Feline parvovirus virus,FPV)是在20世纪初期由法国学者Verge发现,随后由Bilin和Johnson于1957年成功分离培养出该病毒[1].FPV属于细小病毒科、细小病毒属成员,该属病毒是自然分布极广的一种微小的单股负链DNA病毒粒子.自FPV被发现以来,相继衍生出犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)、水貂肠炎病毒 (Mink enteritis virus,MEV)和浣熊细小病毒(Raccon parvovirus,RaPV)等[2].近几年研究发现该属病毒成员不断增多,如博卡病毒(Bocavirus)等,严重危害了人兽健康.由于细小病毒的迅速传播和基因突变等变化,导致病毒产生较强的致病力和抗原漂移现象[3].同时细小病毒宿主范围仍在不断地扩大更新,现在已成为猫科、犬科、经济动物和珍稀野生动物的主要疫病之一.

为研究猫杯状病毒(FCV) CH-JL2分离株对猫的致病性,本研究采用滴鼻方式分别以108.97 TCID50/mL、107.97 TCID50/mL与106.97 TCID50/mL的病毒液(0.5 mL/只)感染6～11周龄健康未免疫中华田园猫,通过对临床症状、体温、排毒情况、组织病理变化以及组织中病毒分布情况的观察与监测,评价其致病性.结果显示,不同滴度的FCV CH-JL2分离株感染猫均可发病,发病率依次为100％、50％与25％,FCV感染5d后,感染猫开始排毒,出现体温升高、鼻眼分泌物增多、口腔溃疡等典型临床症状,但在感染猫的肺脏、心脏、脾脏、气管等全身组织脏器中均未检测到FCV的分布.结果表明CH-JL2分离株不同于FCV VSD株,感染猫后仅可引起上呼吸道感染,不能造成全身感染.本研究为FCV的防制奠定了基础.

Pantheratigris is a national first-class protected animal.At present,viral infectious diseases of Pantheratigris are mainly canine distemper virus (CDV),avian influenza (AIV) and feline parvovirus (FPV).In order to understand the infections and immune conditions of CDV,AIV and FPV in captive Pantheratigris in the three provinces of Northeastern China,the serum of 75 captive Pantheratigris was collected,and the antibody levels of CDV,AIV and FPV were texted via hemagglutination and hemagglutination inhibition experiment and neutralization experiment.The results showed the positive rates of H5,H9 subtype avian influenza and canine distemper antibody were 9.33％ (7/75),61.33％ (46/75) and 16.00％ (12/75) respectively in captive Pantheratigris of Northeastern China,and the infection rates of AIV and CDV in captive Pantheratigris were higher,indicating threats to the health of captive Pantheratigris.However,the antibody positive rate of FPV was 100％,which was related to the vaccine of feline fever,infectious rhinotracheitis and nasal conjunctivitis triple vaccine.

Feline herpesvirus-1 (FHV-1) is an important pathogenic agent of feline viral rhinotracheitis,which is characterized by upper respiratory and ocular diseases in felidae.The virus has spread worldwide rapidly,and has caused serious threats to cats and wild felidae such as tigers and leopards.This article reviews the genomic structure,codogenic proteinum,biologic functions,and mechanism of cell fusion of FHV-1.This review will be helpful for further study of the pathogenic mechanism as well as the prevention and treatment of FHV-1.

猫病毒性鼻气管炎(Feline viral rhinotracheitis,FVRs),又称猫传染性鼻气管炎,是由猫疱疹病毒1型(Feline herpesvirus type 1,FHV-1)引起的一种以上呼吸道感染和角膜结膜炎为主要特征的呼吸系统病毒病.FHV-1具有高度的种属特异性,只感染猫科动物,呈全球性分布,在一些地区猫群中发病率可达97％以上,严重影响着宠物猫及野生猫科动物的健康[1].FVRs多发生于2～4月龄幼猫,自然感染潜伏期为2～6d,感染幼猫主要表现为流涎、咳嗽、打喷嚏、鼻腔黏稠状分泌物等上呼吸道症状以及结膜炎、角膜树枝状溃疡、慢性间质性角膜炎等眼部临床症状,发病率为100％,幼猫病死率可达50％[2].感染猫康复后,FHV-1潜伏于三叉神经、视神经以及扁桃体内,造成持续性感染和潜伏性感染,机体免疫力低下时可再活化引起复发性疾病,给该病的诊断与防治造成了困难[2-3].