OBJECTIVE:To analyze the effect and molecular mechanism of Gehua Jiejiu Dizhi decoction (, GJDD) on alcoholic fatty live disease (AFLD) by using proteomic methods. METHODS:The male C57BL/6J mouse were randomly divided into four groups: control group, model group, GJDD group and resveratrol group. After the AFLD model was successfully prepared by intragastric administration of alcohol once on the basis of the Lieber-DeCarli classical method, the GJDD group and resveratrol group were intragastrically administered with GJDD (4900 mg/kg) and resveratrol (400 mg/kg) respectively, once a day for 9 d. The fat deposition of liver tissue was observed and evaluated by oil red O (ORO) staining. 4DLabel-free quantitative proteome method was used to determine and quantify the protein expression in liver tissue of each experimental group. The differentially expressed proteins were screened according to protein expression differential multiples, and then analyzed by Gene ontology classification and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway enrichment. Finally, expression validation of the differentially co-expressed proteins from control group, model group and GJDD group were verified by targeted proteomics quantification techniques. RESULTS:In semiquantitative analyses of ORO, all kinds of steatosis (ToS, MaS, and MiS) were evaluated higher in AFLD mice compared to those in GJDD or resveratrol-treated mice. 4DLabel-free proteomics analysis results showed that a total of 4513 proteins were identified, of which 3763 proteins were quantified and 946 differentially expressed proteins were screened. Compared with the control group, 145 proteins were up-regulated and 148 proteins were down-regulated in the liver tissue of model group. In addition, compared with the model group, 92 proteins were up-regulated and 135 proteins were down-regulated in the liver tissue of the GJDD group. 15 differentially co-expressed proteins were found between every two groups (model group vs control group, GJDD group vs model group and GJDD group vs control group), which were involved in many biological processes. Among them, 11 differentially co-expressed key proteins (Aox3, H1-5, Fabp5, Ces3a, Nudt7, Serpinb1a, Fkbp11, Rpl22l1, Keg1, Acss2 and Slco1a1) were further identified by targeted proteomic quantitative technology and their expression patterns were consistent with the results of 4D label-free proteomic analysis. CONCLUSIONS:Our study provided proteomics-based evidence that GJDD alleviated AFLD by modulating liver protein expression, likely through the modulation of lipid metabolism, bile acid metabolism and with exertion of antioxidant stress.

目的 应用蛋白质组学方法分析酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver disease,AFLD)小鼠肝组织蛋白表达谱变化及白藜芦醇干预影响.方法 采用NIAAA法制备C57BL/6J小鼠AFLD模型,连续9 d灌胃给予白藜芦醇(400 mg/kg)干预.采用4D非标定量蛋白质组方法对各实验组小鼠肝组织中的蛋白质进行鉴定和定量.以同时满足倍数变化≥1.5或≤0.67,且P<0.05的条件对正常对照组与AFLD组、AFLD组与白藜芦醇干预组,正常对照组与白藜芦醇等3个比较组中显著上调或下调差异表达蛋白进行筛选,然后进行差异表达蛋白的GO分类、KEGG通路富集和蛋白质网络互作分析.结果 分别鉴定和定量到4513、3763个蛋白质,筛选出1228个差异表达蛋白质和11个差异共表达蛋白质.与对照组比较(P<0.05),AFLD组分别有370、324个蛋白质显著下调和上调,白藜芦醇干预组分别有40、43个蛋白质显著上调和下调;与AFLD组比较(P<0.05),白藜芦醇干预组分别有224、227个蛋白质显著上调和下调.1228个差异表达蛋白质分别涉及GO注释的40个生物学过程、36个细胞组成、38个分子功能和45条KEGG通路,11个差异共表达蛋白经GO、KEGG及蛋白质质网络互作分析,其中9个差异共表达蛋白质涉及9种分子功能、5个差异共表达蛋白质涉及5条信号通路,4个差异共表达蛋白质发生了相互作用.结论 慢性酒精摄入后小鼠肝组织蛋白表达谱发生了显著变化,硫转移酶家族胞浆1B成员1(sulfotransferase family cytosolic 1B member 1,Sult1b1)、载脂蛋白A-IV(apolipoprotein A-IV,Apoa4)、甘油-3-磷酸酰基转移酶3(glycerol-3-phosphate acyltransferase 3,Gpat3)、环氧化物水解酶1(epoxide hydrolase 1,Ephx1)等4种蛋白质表达水平变化与AFLD的发生和白藜芦醇的AFLD干预作用具有密切关系.

目的 探讨适合现代医学实验室的高效组织总RNA提取方法,以及组织样本储存时间对后续实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测有效性的影响.方法 分别采用全自动样本处理器+磁珠法全自动核酸提取(方法1)、全自动样本处理器+离心柱法(方法2)、手工匀浆器+磁珠法全自动核酸提取(方法3)和手工匀浆器+离心柱法(方法4)4种方法制备小鼠新鲜心、肝、肾组织总RNA,比较各方法制备的总RNA质量.评价方法1和方法4制备的新鲜、-80 ℃储存1年和2年的小鼠肝组织总RNA质量及其对qRT-PCR检测结果的影响.结果 方法1制备的小鼠新鲜组织总RNA浓度、完整性均优于其他3种方法.方法1制备的1年和2年肝组织总RNA完整性均明显优于方法4.3个不同储存时间肝组织样本的Ct值范围分别为18～19、21～22和27～28,2年肝组织样本总RNA降解明显.结论 方法1是最佳的组织总RNA制备方法,尤其针对保存2年内的稀有生物样本.用于qRT-PCR检测的生物样本于-80 ℃储存时间最好不超过1年.

目的 基于网络药理学方法初探葛花解酒涤脂汤(GJDD)治疗酒精性脂肪肝(AFLD)的潜在活性化合物及其可能的作用靶点.方法 建立GJDD药物-化合物数据集、化合物-靶点数据集、AFLD靶点数据集,构建GJDD抗AFLD的"中药-化合物-靶点"交互网络图,并通过Cyto-scape软件对网络进行分析,初探GJDD抗AFLD的潜在活性化合物及其可能的作用靶点.结果 GJDD可能作用于PIK3CA、PIK3R1、MAPK1、APP等靶点,并通过炎症相关信号通路、激素相关通路、凋亡相关信号通路等多条通路达到其治疗目的.结论 该研究通过网络药理学再次肯定了GJDD治疗AFLD的有效性,为进一步研究AFLD发生及GJDD干预作用机制提供重要指导.

Objective:To observe the effects of Bunao No.1 medicated serum and bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) on neurofilament 200 (NF200) and intercellular adhesion factor-1 (ICAM-1) expression in hippocampal neurons with oxygen-glucose deprivation (OGD).Methods:BMSCs and hippocampal neurons were isolated and cultured, and hippocampal neurons were induced by OGD. Bunao No. 1 medicated serum and normal serum were prepared. MTT assay showed that the optimal concentration of Bunao No. 1 medicated serum for the intervention of hippocampal neurons with OGD was 10%, and the best duration was 72 hours. The cells was divided into a normal group, model group, BMSCs group, normal serum group, Bunao No. 1 medicated serum group, BMSCs＋normal serum group, and BMSCs＋Bunao No. 1 medicated serum group. The mRNA and protein expression of NF200 and ICAM-1 were detected by qRT-PCR and Western Blot, respectively.Results:Compared with the normal group, the mRNA and protein expression of ICAM-1 and NF200 in the model group, BMSCs group, normal serum group, BMSCs＋normal serum group, Bunao No.1 medicated serum group, and BMSCs＋Bunao No.1 medicated serum group increased significantly (P＜0.05). Compared with the model group, the mRNA and protein expression of NF200 significantly increased and those of ICAM-1 significantly decreased in the BMSCs group, BMSCs＋normal serum group, Bunao No. 1 medicated serum group, and BMSCs＋Bunao No.1 medicated serum group (P＜0.05). Compared with the BMSCs group, normal serum group, Bunao No.1 medicated serum group, and BMSCs＋normal serum group, the mRNA and protein expression of NF200 significantly increased and those of ICAM-1 significantly decreased in the BMSCs＋Bunao No.1 medicated serum group (P＜0.05).Conclusion:BMSCs and Bunao No.1 medicated serum can inhibit inflammation, promote nerve regeneration, and repair the hippocampal neurons damaged by OGD. Combined use of BMSCs and Bunao No.1 medicated serum is better than their single use.

目的 检测酒精性脂肪肝(alcoholic fatty liver disease,AFLD)小鼠肝组织肝脏X受体α(liver X receptor α,LXRα)及其调控的胆固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-lc)表达水平,探讨LXRα与AFLD发生的相关性及葛花解酒涤脂汤的干预作用.方法 将37只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,葛花解酒涤脂汤高、低剂量干预组,白藜芦醇干预组.采用Lieber-DeCarli经典法加1次95％乙醇灌胃的方法制备AFLD小鼠模型并分别灌胃给予干预组相应剂量的低、高剂量葛花解酒涤脂汤及白藜芦醇HS15溶液,连续9d.采用油红O染色检测肝组织脂肪变性情况,实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测肝组织LXRα及其调控的SREBP-1c mRNA及蛋白表达水平.结果 模型组小鼠肝脏LXRα蛋白表达水平显著降低(P=0.01),葛花解酒涤脂汤高剂量干预后能显著上调LXRα蛋白表达水平(P=0.02),与正常组水平相似(P=0.1).各组SREBP-1c mRNA表达水平相似,但AFLD小鼠肝组织SREBP-1c蛋白表达水平显著低于正常组、葛花解酒涤脂汤高剂量干预及白藜芦醇干预组(P=0.01).葛花解酒涤脂汤高剂量干预组能显著降低模型组小鼠肝组织硬脂酰辅酶A脱氢酶-1(stearoyl-CoA desatu-rates,SCD) mRNA表达水平(P=0.03).中药干预虽能降低模型组小鼠肝组织(fatty acid synthase,FAS) mRNA表达水平,差异无统计学意义(P=0.06).结论 LXRα介导的胆固醇代谢障碍可能是AFLD发生的重要因素之一,通过上调SREBP-1c表达可能不是慢性酒精摄入后脂肪肝形成的关键因素;葛花解酒涤脂汤可通过上调肝脏LXRα表达改善AFLD小鼠胆固醇代谢异常.

目的:探讨萎胃通调汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变大鼠胃黏膜病理及IκB激酶β(IKKβ),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达水平的影响.方法 :SD大鼠随机分为正常组、模型组、胃复春组、萎胃通调汤高、中、低剂量组.N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)复合造模法制备CAG癌前病变大鼠模型.萎胃通调汤高、中、低剂量组、胃复春组分别灌胃给予24,12,6g·kg1萎胃通调汤及0.45g?kg-1胃复春混悬液,1次/d,连续12周.苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃黏膜组织病理学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),免疫组织化学法(IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胃黏膜组织IKKβ,Bcl-2mRNA及蛋白水平表达.结果 :与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜组织镜下可见100％固有腺体萎缩及轻-重度肠上皮化生,25％低级别上皮内瘤变.胃复春、萎胃通调汤均能改善模型大鼠胃黏膜固有腺体萎缩,中、重度肠上皮化生及低级别上皮内瘤变组织病理损伤,其中高剂量效果明显;与正常组比较,模型组大鼠胃黏膜IKKβ,Bcl-2 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.01);与模型组比较,胃复春组与萎胃通调汤高、中、低剂量组大鼠胃黏膜IKKβ,Bcl-2 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05,P<0.01),呈一定的剂量依赖关系,其中萎胃通调汤高剂量组IKKβ,Bcl-2 mRNA和蛋白呈现与正常组相似的表达水平.结论 :萎胃通调汤能改善甚至逆转大鼠CAG癌前病变胃黏膜,其干预机制可能与通过下调胃黏膜IKKβ,Bcl-2表达有关.

慢性萎缩性胃炎是常见的消化系统疾病,合并肠上皮化生或上皮内瘤变时,癌变率明显增加,被认为是胃炎癌前病变.单纯西医治疗有一定局限性,对胃黏膜病变的改善效果欠佳.苗医学是我国民族医药的重要组成部分,运用苗医药理论治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变具有独特优势,可改善甚至逆转胃黏膜萎缩、肠上皮化生及低级别上皮内瘤变,其治疗精髓为苗医整病理论,与干预凋亡相关因子Bcl-2、Bax基因表达相同,都是以改善结构、恢复功能为最终目的,从而拓展了慢性萎缩性胃炎癌前病变的诊疗思路,对针对疾病靶向治疗具有研究价值.

目的 探讨补脑Ⅰ号治疗阿尔茨海默病(AD)的可能机制.方法 分离C57BL/6小鼠股骨骨髓细胞,传代培养获得第三代骨髓间充质干细胞(BMSCs).32只APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、BMSCs组、补脑Ⅰ号组、补脑Ⅰ号+BMSCs组,每组8只.同系种C57BL/6小鼠8只设为正常组.BMSCs组、补脑Ⅰ号+BMSCs组将第三代BMSCs移植入侧脑室内,移植2h后补脑Ⅰ号组、补脑Ⅰ号+BMSCs组予补脑Ⅰ号方26g/(kg·d)灌胃,BMSCs组、正常组、模型组予0.2ml生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃4周.Western blot法检测海马血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达,实时荧光定量(qRT-PCR)检测VEGF、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及BDNFmRNA表达,透射电镜观察海马区微血管形态、神经细胞、神经纤维及突触结构的改变.结果 与正常组比较,模型组BDNF、VEGF蛋白表达,BDNF、VEGF、bFGF mRNA表达均显著降低(P＜0.01);与模型组比较,BMSCs组、补脑Ⅰ号组、补脑Ⅰ号+BMSCs组VEGF蛋白表达,VEGF、BDNF、bFGF mRNA表达均升高(P＜0.05或P＜0.01),补脑Ⅰ号+BMSCs组BDNF蛋白表达升高(P＜0.05);与BMSCs组、补脑Ⅰ号组比较,补脑Ⅰ号+BMSCs 组 VEGF 蛋白表达,VEGF、BDNF、bFGF mRNA 表达升高(P＜0.05或 P＜0.01).补脑Ⅰ号组、BMSCs组、补脑Ⅰ号+BMSCs组均能够改善海马受损的血管、神经元、有髓神经纤维和突触的超微结构,以补脑Ⅰ号+BMSCs组更明显.结论 补脑Ⅰ号可促进AD模型小鼠脑内移植BMSCs后海马区血管、神经及突触结构的改善,其机制可能与提高海马区BDNF、VEGF、bFGF的表达,促进神经血管再生与突触重塑有关.

目的:观察萎胃通调汤对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)模型大鼠胃黏膜病变的影响,并探讨其作用机制.方法:90只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、萎胃通调汤高剂量组、萎胃通调汤中剂量组、萎胃通调汤低剂量组、胃复春对照组各15只.实验组大鼠采用N-甲基-N'-硝基-N'-亚硝基胍(MNNG)多因素复合法连续造模12周制备CAG大鼠实验模型,造模成功后分别灌胃给予萎胃通调汤高、中、低剂量组及胃复春对照组大鼠(18 g·kg-1/d、9g·kg-1/d、4.5g·kg-1/d)剂量的萎胃通调汤及(0.45 g·kg-1/d)胃复春水溶液,连续给药12周后收集大鼠胃黏膜组织,分别采用组织病理学HE染色、实时荧光定量(qRT-PCR)、免疫组化(IHC)及Western blot分析大鼠胃黏膜的病理情况和检测胃黏膜组织IL-6 mRNA及蛋白表达水平.结果:模型组大鼠胃黏膜固有腺体伴不同程度缺失、肠化,有大量炎性细胞浸润.萎胃通调汤能改善甚至逆转病变胃黏膜,萎胃通调汤及胃复春干预组胃黏膜组织IL-6 mRNA及蛋白表达水平较模型组显著下调(P＜0.01),其中高剂量组IL-6 mRNA表达水平与正常对照组相似(P＞0.05).结论:萎胃通调汤能改善甚至逆转CAG大鼠病变胃黏膜,其作用机制可能与萎胃通调汤下调CAG大鼠胃黏膜组织IL-6 mRNA及蛋白表达有关.

目的 应用多位点可变串联重复序列分析技术(MLVA)对贵州省结核分枝杆菌进行基因分型分析,为贵州省结核病防控提供科学依据. 方法 选取贵州省150株临床分离株结核分枝杆菌,采用水煮法提取基因组DNA,PCR扩增15个VNTR位点,统计菌株各VNTR位点的重复数目,通过遗传差异值(h)及Hunter-Gaston指数对VNTR位点进行遗传多态性及分辨力评价,采用BioNumerics 5.0软件对各菌株进行聚类关系和最小间距图(minimum spanning tree,MST)分析. 结果 PCR检测结核菌株VNTR各位点呈明显多态性,以Mtub21和MIRU26多态性尤为显著,以h值分别为0.559和0.505;MIRU10和ETRB显示较低基因多态性,h值分别为0.052和0.090.聚类分析显示,150株菌株分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个基因群,其中Ⅰ群占 10.67％(16/150),Ⅱ群占30.67％ (46/150),Ⅲ群占40.00％(60/150),Ⅳ群占18.67％(28/150).4个基因群呈现明显地域分布,毕节市以Ⅰ、Ⅱ群为主要流行菌株,安顺市以Ⅲ群菌株为主要流行菌株,遵义市以Ⅳ群菌株为主要流行菌株.MST分析显示,150株菌株形成3个克隆复合体(clonal complexes,CCs)及若干个独立分支(singleton),遵义、安顺、毕节分离株分别分布于不同的克隆复合体CCs. 结论 贵州省结核分枝杆菌存在明显的基因多态性和地域分布特性,以Ⅲ群和Ⅱ群菌株为主要流行菌株,应加强对上述两群菌株的监控.

慢性萎缩性胃炎是常见的消化系统疾病,与胃癌关系密切,属胃癌癌前状态,我国发病率较高,治疗效果较差,难以治愈.西医治疗该病具有一定的局限性,逆转胃黏膜病理改变疗效欠佳.苗药组方萎胃通调汤以中医药理论与苗医药理论为基石,经临床验证是治疗慢性萎缩性胃炎的有效方,对逆转胃黏膜萎缩及肠化具有较好疗效.故对此方的方药机制进行理论剖析探讨,以期拓展该病的治疗思路、改善治疗方法、提高治愈率.

目的 探讨慢性乙型病毒性肝炎患者不同病期血清HBV-DNA载量与外周血ALP、TBi、TBA、ALB的变化.方法 选取在贵州中医药大学第二附院治疗的慢性乙肝患者(包括轻度、中度、重度)526例,检测对比血清HBV DNA载量、ALP、TBi、TBA及ALB,分析血清ALP、TBi、TBA、ALB与血清HBV DNA载量的相关性.结果 中度、重度慢性乙肝组HBV-DNA载量、TBi高于轻度组(P＜0.05);重度乙肝组ALP、TBi高于中度、低度对照组(P＜0.05);重度组ALB高于中度组、轻度组.ALP、TBi、TBA、ALB与血清HBV-DNA载量无直线相关关系(P＞0.05).结论 慢性乙肝患者血清HBV-DNA载量可对肝功能产生影响,这对乙肝的发病机制研究及临床诊治有一定的现实指导意义,但是仅仅依据HBV DNA判断慢性乙肝病情的发展治疗是不够的,而肝功能中常用监测检查项目ALT、AST并不完全是随着乙肝病病程的加重而变化,而血清中的血清ALP、TBi、TBA、ALB在重症乙肝时有显著的变化,所以联合HBV-DNA诊治,能为乙肝患者的诊断与病程的治疗提供更有效的参考依据.

目的研究扶肝化纤汤对正虚毒蕴血瘀病证结合肝纤维化（HF）模型大鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响,探讨其抗HF的作用机制。方法清洁级SD大鼠120只,随机等分为正常组、模型组、秋水仙碱组、扶肝化纤汤高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组在经典四氯化碳（CCL4）皮下注射制备大鼠HF模型的基础上,以中医理论指导,建立正虚毒蕴血瘀型HF大鼠模型。造模6周验证模型,造模成功后,给药组相应灌胃给药,正常组和模型组给予等体积纯净水,均连续灌胃3周。末次灌胃的次日,检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白（ALB）、羟脯氨酸（HyP）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原肽（PⅢNP）的含量,肝组织行HE染色和Masson染色。用qRT-PCR、免疫组化法检测各组肝组织转化生长因子β1（TGF-β1）、果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白3（Smad3）、果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白7（Smad7）及其mRNA的表达。结果病理结果显示,与模型组比较,各给药组肝细胞损伤程度减轻,胶原纤维的增生减少; HE染色结果显示,肝纤维化程度分期好转（χ~2=54.722,P＜0.01）; M asson染色结果显示,肝脏胶原纤维面积占比减少（χ~2=52.149,P＜0.01）。与正常组比较,模型组大鼠血清ALT（χ~2=39.685,P ＜0. 01）、AST （F=659. 984,P ＜0. 01）、Hyp（χ~2=38. 613,P ＜0. 01）、LN （χ~2=50.057,P＜0.01）、PⅢNP（F=63.492,P＜0.01）升高、ALB（χ~2=51.908,P＜0.01）下降,肝组织TGF-β1（χ~2=40.900,P＜0.01）、Smad 3（χ~2=38.253,P＜0.01）、TGF-β1 mRNA（F=92.304,P＜0.01）、Smad 3 mRNA （F=119.563,P＜0.01）表达升高,Smad 7（χ~2=48.949,P＜0.01）及Smad 7 mRNA （F=42.120,P＜0.01）表达降低;与模型组比较,扶肝化纤汤不同剂量组均抑制上述指标的改变（P＜0.01）,且呈现出扶肝化纤汤高剂量组优于其余给药组（P＜0.01）。结论正虚毒蕴血瘀病症结合HF模型大鼠建模成功。扶肝化纤汤具有保护肝细胞、减轻肝损伤、抑制HF的作用。扶肝化纤汤能够调控TGF-β1、Smad3、Smad7及其mRNA的表达,可能是其抗HF的作用机制之一。

目的:探讨自拟更年汤对肾阳虚围绝经期模型大鼠卵巢功能的影响.方法:选取10～12个月龄雌性SD大鼠,采集阴道脱落细胞筛选出围绝经期模型大鼠,将围绝经期模型大鼠随机分为模型组、更年汤低剂量组、更年汤中剂量组、更年汤高剂量组、替勃龙组,每组24只,构建肾阳虚模型;另选24只4～6个月龄的青年大鼠为青年组;各组分别给予相应药物灌胃,末次给药24h后,检测血清中卵泡刺激素(FSH)水平及卵巢组织中FSHR、IGF-1以及其受体蛋白表达.结果:更年汤高剂量组、更年汤中剂量组、替勃龙组大鼠血清FSH水平明显低于模型组(P＜0.05或P＜0.01),卵巢组织中FSHR、IGF-1及其受体表达明显高于模型组(P＜0.05或P＜0.01).结论:更年汤能改善肾阳虚围绝经期模型大鼠卵巢功能,可能与调节大鼠血清中FSH水平,调节大鼠卵巢组织中FSH、IGF-1及其受体的表达有关.

目的:探讨肾阳虚围绝经期模型大鼠在自拟更年汤不同剂量干预下对卵巢PI3K/AKT/mTOR蛋白表达的影响.方法:选24只4～6月龄的青年大鼠作为对照组,构建肾阳虚模型.另采集阴道脱落细胞将10～12月龄雌性SD大鼠筛选出围绝经期模型,并将该模型大鼠随机分为模型组、利维爱组、更年汤低、中及高剂量共5组,每组24只.以上6组均给予相应药物灌胃,末次给药24 h后,检测卵巢组织中IGF-1、IGF-1R及PI3K/AKT/mTOR蛋白表达.结果:更年汤高剂量组、西药组IGF-1、IGF-1R及PI3K/AKT/mTOR蛋白表达均较高,与模型组比较均有统计学差异(P<0.05).结论:更年汤能改善肾阳虚型围绝经期模型大鼠卵巢组织中PI3K/AKT/mTOR蛋白表达,可能与能调节IGF-1及其受体的表达量有关.

目的 探讨扶肝化纤汤对肝纤维化模型大鼠MAPK信号通路的影响,研究其抗肝纤维化的作用机制.方法 120只SD大鼠,按照每组20只,随机分为对照组、模型组、秋水仙碱(2 mg/kg)组及扶肝化纤汤高、中、低剂量(67.08、33.54、16.77 g/kg)组.对照组不建模,其余各组在四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型的基础上,综合运用夹尾、强迫游泳、饥饱失常、ig大黄等方法,制备正虚毒蕴血瘀型肝纤维化大鼠模型.造模6周,进行肝病理检查,验证模型成功后,各给药组ig相应药物,对照组和模型组ig纯净水2 mL/d,连续给药3周.末次给药的次日,检测各组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、羟脯氨酸(Hyp)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢINP)水平,肝组织行HE染色和Masson染色.采用Western blotting法检测肝组织MAPK信号通路中ERK1/2、JNK1/2、P38相关蛋白及其磷酸化蛋白表达情况,定量分析结果以p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、p-p38/p38值表示.结果 模型组肝组织炎细胞浸润、纤维化程度重,各给药组肝损伤程度以及纤维化程度明显减轻.与对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP明显升高,ALB明显下降(P＜0.01),p-JNK、p-ERK、p-p38蛋白表达显著增高(P＜0.01).与模型组比较,扶肝化纤汤能降低大鼠血清ALT、AST、Hyp、LN、PⅢNP水平,升高ALB水平,下调p38、ERK1/2、JNK1/2的磷酸化蛋白表达,且呈现出剂量依赖性,以高剂量组效果最好.结论 正虚毒蕴血瘀病症结合肝纤维化模型大鼠建模成功.扶肝化纤汤具有保护肝细胞,减轻肝损伤,抑制肝纤维化的作用.扶肝化纤汤能够调控p-JNK、p-ERK、p-p38蛋白表达,抑制MAPK信号通路的活化,可能是其抗肝纤维化的作用机制之一.

目的:了解贵州草药组方顺胆和胃汤内服对脾虚湿热型胆汁反流性胃炎的临床疗效及其可能的影响机制.方法:将符合脾虚湿热型胆汁反流性胃炎纳入诊断标准的72例患者采用随机数字表法分为2组,每组36例,治疗组给予顺胆和胃汤内服,对照组给予铝碳酸镁片联合枸橼酸莫沙必利分散片治疗,30天为一疗程.其中对照组若14C尿素呼气试验提示幽门螺杆菌阳性,则增加抗幽门螺杆菌三联疗法治疗一周.观察、比较两组患者治疗前、后中医证候表现、胃镜像及胃粘膜组织炎症改善、幽门螺杆菌清除情况及血清胃泌素、血清前列腺素E2表达水平.结果:顺胆和胃汤显著改善患者胃脘饱胀、烧灼、疼痛、吐酸嘈杂、食少纳呆及嗳气等证候(P＜0.05),总有效率为94.44％.治疗组具有明显改善的电子胃镜象、胃粘膜炎症及增加的血清胃泌素、前列腺素E2水平(P＜0.01);具有与对照组相似的幽门螺杆菌根除能力(P＞0.05).结论:顺胆和胃汤可有效缓解脾虚湿热型胆汁反流性胃炎的临床症状、组织病理学及生化改变,可作为治疗脾虚湿热型胆汁反流性胃炎的有效方药.

目的 探讨王氏连朴饮治疗急性肺损伤的可能作用机制.方法 将36只SD大鼠随机分成对照组、模型组、地塞米松组和王氏连朴饮大、中、小剂量组,每组6只,雌雄各半.造模前先连续灌胃5天,地塞米松组用地塞米松注射液(浓度为0.9 mg/ml)灌胃,王氏连朴饮大、中、小剂量组分别给予浓度为1.75、0.87、0.43 g/ml药液灌胃,对照组和模型组用等量蒸馏水灌胃,每日1次,每次1 ml.第6天采用平刺尾静脉注射脂多糖(0.2 g/100g)后静置24h建立急性肺损伤模型.第7天检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)含量,HE染色观察肺、肠组织病理形态学状态.结果 与对照组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β含量明显增高(P＜0.01);与模型组比较,地塞米松组和王氏连朴饮各剂量组大鼠血清TNF-α含量明显降低,地塞米松组和王氏连朴饮大、中剂量组血清IL-1β含量降低(P＜0.01).与王氏连朴饮小剂量组比较,王氏连朴饮大剂量组大鼠血清TNF-α含量明显降低,王氏连朴饮大、中剂量组大鼠血清IL-1β含量亦降低(P＜0.01).HE染色显示,王氏连朴饮大、中、小剂量组对急性肺损伤大鼠肺、肠组织病理学均有所改善,且以王氏连朴饮大剂量组效果更佳.结论 王氏连朴饮对急性肺损伤大鼠肺、肠组织具有一定的保护作用,可能通过控制炎症反应,从而抑制其肠-肺轴转移.

Objective To explore the effect of a herbalcompound Gehua Jiejue Dizhi Decoction (GJDD) on the liver fat deposition and the expression of PXR, and the mRNA and protein expression of its target genes CYP3A11 and CYP3A25in the liver tissues of mouse models of alcoholic fatty liver.Methods Twenty-nine healthy male C57BL/6J mice were randomly divided into control group (n=5), model group (n=8), high dose GJDD group (n=8)and low dose GJDD group (n=8).The mouse model of alcoholic fatty liver was prepared according to the National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism (NIAAA) method.Then, the mice were treated with the high dose and low dose GJDD for 9 days.Serum glutamic-pyruvic transaminase (AST) and aspartate aminotransferase (AST) were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA).Liver fat deposition was detected by oil red O staining.Real-time RT-PCR and immunohistochemistry were performed to examine the expressions of PXR, CYP3A11 and CYP3A25.Results Compared with the model group, the liver fat deposition in the intervention groups was significantly reduced in a dose-dependent manner, with a significant increase of the expression of PXR and CYP3A25 (P < 0.01).The serum ALT level was significantly reduced in the model group (P < 0.01), while the transcriptional levels of CYP3A11 mRNA in the groups were similar (P ≥ 0.05).Conclusions Gehua Jiejue Dizhi Decoction has obvious therapeutic effect on the AFLD in mice, which may be related to the activation of PXR and its target genes CYP3A25.