2018年5月,广西某县某猪场突然有70多头35日龄猪发病,病猪症状为消瘦、腹泻、气喘、腹式呼吸,其中20多头猪病死.病死猪剖检病变为淋巴结肿大、出血;肺充血、出血,与胸膜粘连;肝充血;脾有梗死点;肾充血,表面有散在的出血点;膀胱黏膜有散在的出血点.应用抗生素对病猪进行治疗无效.该猪场将其中5头病死猪每头分别采取淋巴结、肺、肝、脾、肾等病料送实验室检测.
为了解广西猪群猪圆环病毒3型(PCV3)的遗传变异情况,以PCV3阳性DNA为模板,利用PCR的方法分2段扩增PCV3全基因序列并进行拼接,获得10株PCV3全基因组序列,全长均为2 000 bp.10株广西PCV3全基因组序列之间的核苷酸同源性为98.6%~ 99.8%.与国内其他毒株的同源性为97.9% ~ 99.8%;与国外其他毒株的同源性为98.8%~99.7%.10株广西PCV3 Cap基因的大小均为645 bp,编码214 aa.PCV3 Cap基因比较保守,10株广西PCV3 Cap基因与参考株相比,仅存在散在的突变位点.基于PCV3全基因和Cap基因构建的遗传进化树显示,两者结果基本相同,10株广西PCV3处于3a和3b两个亚群.本试验表明,广西地区猪群中流行的PCV3至少存在2个亚群,不同亚群PCV3毒株的致病性差异还有待进一步的研究.
本研究旨在确定猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异株CH/GX/750A/2015株在Vero细胞上转瓶培养的最佳条件,为大规模生产高效PEDV变异株疫苗提供技术支撑.试验以10 L转瓶培养病毒,对接毒时细胞维持液中胰酶浓度(0、2、4、6、8和10 μg/mL)、细胞密度(40%、60%、80%、100%、200%)、接毒剂量(MOI分别为1、0.1、0.01和0.001)、吸附时间(0、30、60、90、120、240 min)、收毒时间(接毒后12、24、36、48、60、72 h)、维持培养温度(35、36、37和38℃)和转瓶转速(6、8、10、12、14、16 r/h)7个条件进行优化.结果 显示,PEDV CH/GX/750A/2015株在10 L转瓶中的最佳培养条件为:细胞刚铺满单层时接毒,接毒量为MOI=0.01,维持液(无血清DMEM培养液)中胰酶质量浓度为6 μg/mL,不需吸附,维持培养温度为37℃,12 r/h旋转培养48 h后收获病毒液可获得较高效价的病毒液,效价可稳定达到106.50TCID50/0.1 mL.本试验为PEDV变异株大量培养提供了参考,为变异株疫苗研发奠定了基础.
为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行和变异情况,试验应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法对2016-2018年广西14个地区规模化猪场的1 564份主要脏器进行了PRRSV检测,选取部分阳性样品进行ORF5基因的扩增并进行序列分析.结果 表明:共检测出PRRSV阳性样品467份,阳性率为29.9%.在广西14个地区规模化猪场送检的样品中均能检测到PRRSV.从年份上看,2016年的PRRSV阳性率最高,为43.9%;2017年为26.9%;2018年最低,为23.7%.获得的25条PRRSV ORF5基因序列中有1株与NADC30株同源性较高,1株与GM2株同源性较高,其余23株均与高致病性PRRSV同源性较高.在25株PRRSV中有21株与TJM、JXA1、HuN等高致病毒株亲缘关系较近,并位于同1个分支;2株处于经典株和变异株之间,分别形成2个分支;1株与NADC30株亲缘关系较近,位于同1个分支;1株与GM2株亲缘关系较近,位于同1个分支.PRRSV ORF5基因编码氨基酸序列分析结果表明,25个毒株均为毒力较强的野毒株.说明广西地区仍以高致病性PRRSV为主要流行毒株,但2018年新发现类NADC30毒株和类GM2毒株的流行.
2018年11月广西一存栏1000头母猪的规模化猪场出现多头怀孕后期母猪流产现象,并将2窝流产胎儿送实验室进行检测.为了解引起母猪流产的病因,实验室采用细菌分离培养方法进行细菌分离鉴定;采用PCR/RT-PCR检测的方法检测猪瘟病毒(CSFV)、 猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪乙脑病毒(JEV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和PCV3.结果在流产胎儿内脏组织中未分离到细菌;2窝流产胎儿内脏组织中均检测到PCV3,而其他病原均为阴性,表明PCV3感染可能是引起本次母猪流产的主要原因.
试验旨在了解广西猪主要病毒性繁殖障碍疫病的发生态势,为预防和控制此类疫病提供科学依据.采用RT-PCR/PCR方法对2014年3月至2018年2月采自广西的349份流产胎儿样品进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)及猪乙型脑炎病毒(JEV)6种主要病毒性繁殖障碍疫病病原的检测并分析其阳性检出率在不同年份、季节之间的差异及病原混合感染情况.结果显示,2014-2017年,6种病原的猪场阳性率从高到低依次为JEV(36.00%)、PRRSV(16.00%)、PCV2(9.00%)、PRV(7.00%)、PPV(6.00%)和CFSV(5.00%),样品阳性检出率从高到低依次为JEV(27.06%)、PRRSV(6.18%)、PRV(5.88%)、PCV2(3.82%)、CSFV(2.35%)和PPV(2.35%).季节因素对6种病毒性繁殖障碍疫病的发生有一定影响:JEV在夏季、秋季检出率较高,春季、冬季检出率较低;PRRSV一年四季检出率均较高,且无明显差异;PCV2在春季检出率较高,其次是夏季和冬季,秋季检出率较低;PRV在春季、冬季检出率较高,夏季、秋季检出率均为0;PPV在夏季检出率较高,其次是春季和秋季,冬季检出率为0;CSFV在冬季检出率最高,其次是夏季,春季和秋季检出率均为0.流产胎儿以单一感染为主,6种病毒均存在不同程度单一感染情况,单一感染率JEV最高(23.82%)、PCV2最低(0.59%);混合感染以双重感染为主,其中以2016年双重感染情况较多,且感染组合多样;三重感染情况较少、仅在2016年送检样品中发现1例,未发现四重及四重以上感染情况.调查结果表明,2014-2017年,JEV均有较高的阳性检出率,已成为广西部分猪场母猪流产最主要病毒性病原.PRRSV和PRV仍是目前引起广西猪场母猪流产的主要病毒性病原.
猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种急性高度接触性肠道传染病.以呕吐、水样腹泻和脱水为特征,发病仔猪死亡率高.当前由PEDV主导的猪群腹泻是猪场重点防控的重要疫病之一,严重影响猪场经济效益及养猪业健康发展,其防控形势依然严峻.1971年英国首次报道PED,1977年比利时分离到病毒(经典代表毒株CV777).1982年中国台湾报道亚洲首例PED,其后该病在日本、韩国、中国、泰国等亚洲国家相继报道流行.2010年起,PED在中国、美国、欧洲等地再次暴发大流行,给养猪业造成严重经济损失.
<正>2011年8月5日,南宁市横县一韦姓火鸡养殖户送检一只刚死、三只病重的火鸡到我所门诊部诊疗。根据询问病史、病理剖检、实验室病菌分离镜检、药敏试验以及用药治疗效果观察,确诊为火鸡葡萄球菌病。1临床症状该火鸡养殖户果园空地圈养近1 000只、82日龄、体重约2㎏的火鸡,其中有26只病鸡明显消瘦,体重不到1.3㎏,病鸡卧地或站立不稳,减食或不食,羽毛松乱无光泽,部分火鸡的泄殖腔周边羽毛粘污灰白或淡绿色粪便。鸡群发病率低,约
鸡传染性支气管炎(IB)是由冠状病毒引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病,表现为气管哕音、咳嗽和打喷嚏。气候变化反复的冬春季节极易诱发户外圈养肉用土鸡群发生传染性支气管炎。鸡大肠杆菌病是由病原性大肠杆菌引起的急性或慢性常见传染病,环境应激或先前发生的疫病(如鸡新城疫、IB、鸡慢性呼吸道病等)常诱发鸡群大肠杆菌病。两病的混合感染常导致鸡群的死亡增多和增加治疗的难度。
2010年7月21日,玉林市兴业县某养殖户将9只病死番鸭拿到我所门诊部求治.经病史调查、病理剖检、实验室病原分离镜检、禽霍乱PCR检测及用药治疗观察,确诊该鸭群感染了由多杀性巴氏杆菌所引起的禽霍乱.
2010年5月4日,笔者应邀到南宁市南晓镇对某养鸡专业户山地荔枝园圈养的一群8 000只、70日龄、体重约0.65千克的肉用小麻土鸡进行诊疗.经鸡群观察、用药记录询问、病及死鸡的病理剖检变化和实验室鉴别诊断、鸡群的用药治疗效果,确诊鸡群为鸡传染性支气管炎与禽霍乱的混合感染.
2009年11月15日,我所门诊部应邀到南宁市良庆区某养鸡专业户对山地荔枝园圈养的一群发病阉鸡进行诊疗.经观察鸡群、用药记录询问、病鸡及死鸡的病理剖检和实验室鉴别诊断、鸡群的用药治疗效果综合分析诊断为鸡传染性喉气管炎.
2009年5月22日,我门诊部应邀到南宁市良庆区对某养鸡专业户山地荔枝园圈养的一群12 000只肉鸡进行诊疗.经询问观察、病理剖检和实验室病原分离鉴定结合鸡群的用药治疗效果,确诊为鸡肾型传染性支气管炎.
禽霍乱(俗称禽出败)是由禽多杀性巴氏杆菌引起的家禽及野生禽类的一种接触性传染病,主要危害较大日龄的禽类[1].该病传播快,致死率高,以腹泻,呼吸困难,常口含饲料甩头,拍翅抽搐、猝死为主要特征.