黄芩属植物种类繁多,主要含有黄酮、二萜、苯乙醇苷类等多种化学成分,具有抗肿瘤、抗菌、抗氧化和保护心血管系统等药理作用,临床应用广阔.系统综述了国内外黄芩属植物中主要化学成分及药理作用的研究进展,为黄芩属植物的药物研究和开发应用提供参考.
为了建立一种能快速鉴别猪日本脑炎病毒(JEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的准确、高效的多重常规PCR检测方法,针对JEV、PRRSV、PPV、PRV基因保守区域合成特异性引物,优化后获得最优反应条件,对该方法特异性、敏感性、重复性进行了测定,并应用该方法对临床样品进行初步应用.结果显示,该方法对JEV、PRRSV、PPV、PRV可进行特异性扩增,对混合阳性质粒检测下限达2×106 copies/μL,对猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒等相关病毒均无扩增,且重复性良好.用该方法检测51份2021年采集的广西区内组织样品,检出JEV、PRRSV、PPV、PRV阳性率分别为7.84%、50.98%、5.88%、23.53%,且存在多重混合感染的情况.所建立的多重PCR方法具有良好的特异性、敏感性及重复性,可应用于临床常见猪繁殖障碍性病毒病的快速诊断和监测预警,为猪繁殖障碍性病毒病提供了诊断技术支持.
【Objective】The present paper aimed to analyze the effects of endophytic fungus Y118 on the growth promotion and quality of its host, Zanthoxylum nitidum(Rox.) DC,so as to provide a reference for improving comprehensive benefits of Z.nitidum.【Method】Z.nitidum plants were cultured with endophytic fungus Y118 solid fermentation medium.The growth indexes(fresh weight, plant height, stem base width, stem middle width and fresh and dry weight of roots, stems and leaves) of Z.nitidum plants were measured at different growth stages.The contents of nitrine chloride and chelidonine in roots of Z.nitidum were determined by chromatographic method.【Result】After 3 months of culture, the fresh weight, plant height, stem base width and stem middle width of the fungus Y118 treatment group were 34.76 g, 34.47 cm, 6.54 mm and 4.25 mm, respectively, which were extremely significantly higher than those of the control group(P<0.01,the same as below).The fresh weight and dry weight of roots, stems and leaves were significantly increased(P<0.05,the same as below) or extremely significantly increased.After 6 months of culture, the fresh weight and plant height of Z.nitidum were 68.33 g and 47.85 cm, respectively, which were extremely significantly higher than control group.The fresh weight and dry weight of roots, stems and leaves were extremely significantly increased.After 9 months of culture, the fresh weight, plant height and stem base width of Z.nitidum treated with fungus Y118 were 73.80 g, 49.22 cm and 9.79 mm, respectively, which were extremely significantly higher than those of the control group.The fresh weight and dry weight of roots, stems and leaves were extremely significantly increased.After 12 months of culture, the fresh weight of Z.nitidum in Y118 treatment group was 78.71 g, which was extremely significantly higher than control group, and the fresh and dry weight of root, stem and leaf were significantly increased or extremely significant.After 9 and 12 months of co-culture, Z.nitidum alkali content in fungus Y118 treatment group was 0.783 and 0.904 mg/g, respectively, which increased by 42.11% and 44.18% compared with the control group.The content of chelidonine at 9 and 12 months of co-culture were 3.704 and 4.201 mg/g, respectively, which increased by 40.73% and 26.57% compared with the control.【Conclusion】Inoculation of endophytic fungus Y118 could significantly or extremely significantly increase the fresh weight, plant height, stem base width and stem middle width of Z.nitidum seedlings, which was beneficial to promote the growth and development of Z.nitidum seedlings, and could improve the fresh and dry weight and quality of roots, stems and leaves.It can provide the basis for the field production test of Z.nitidum.
将200多种的广西常见中草药的来源植物和药材或饮片原色图片,结合文字描述中草药的形态特征、性味归经、功能主治等全面信息,建设原色图谱数据库,作为教学资源在广西中医药大学校园网络平台实现共享,为全校学生更好地学习和掌握广西常见中草药的理论知识和实物鉴别提供教学服务.
Objective:To study the chemical constituents from the fruits of Decaisnea insignis.Methods:The chemical constituents from the fruits of Decaisnea insignis were isolated and purified by various chromatographic techniques,the structures were identified by spectroscopy methods.Results:Twenty-one compounds were isolated from the dichloromethane fraction of the fruit of Decaisnea insignis and identified as lupeol(1),betulinic acid(2),β-amyrin(3),β-amyrinpalmitate(4),β-amyrin ketone(5),bacosine(6),12-oleanene-3,11-dione(7),eupatoric acid(8),oleanol-12-ene-28-aldehyde-3β-hydroxy(9),stigmasterol(10),β-sitosterol(11),stigmast-4-ene-3-one(12),stigmast-4,22-diene-3-one(13),5 a,sa-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(14),5,7-dihydroxy-chromone(15),kaempferol(16),quercetin(17),(+)-pinonesinol(18),dipentyl phthalate(19),hexadec-9-enoic acid(20),(9 Z)-heptadec-9-en-1-ol(21),respectively.Conclusion:All compounds are isolated from the Decaisnea genus for the first time,compounds 4 to 8,12 to 15,18 to 21 are from Lardizabalaceae for the first time.
目的:优化巴西人参复方提取工艺并考察其抗疲劳作用.方法:以巴西人参复方浸膏冻干粉量、总多糖及总皂苷含量的综合加权分为考察指标,在单因素试验基础上运用Box-Behnken响应面法优化巴西人参复方的提取工艺,对巴西人参复方提取液进行抗疲劳作用研究.结果:巴西人参复方的最佳提取工艺条件为:水煎煮2 h,液药比为12:1(mL/g),提取2次.抗疲劳实验表明巴西人参复方提取液能延长小鼠的负重游泳时间、增高其肝/肌糖原的含量及降低其血清尿氮素/乳酸含量.结论:基于多指标综合优化巴西人参复方的提取工艺稳定可行,且其提取液有抗疲劳作用.
为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清学ELISA抗体检测方法,本研究以原核表达纯化的PEDV S2重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PEDV重组S2蛋白的间接ELISA抗体检测方法.结果显示,重组蛋白抗原最佳包被量0.8 μg/孔;血清最佳稀释倍数为1 ∶40,最佳血清孵育时间为120 min;酶标二抗最佳工作浓度为1 ∶4000,最佳二抗反应时间为45 min;最佳底物显色时间为15 min;待检血清样品S/P值>0.212时判定为阳性,待检血清样品S/P值<0.188时判定为阴性,当0.188≤待检血清样品S/P值≤0.212时判定为可疑.以S2蛋白作为包被抗原建立的PEDV抗体间接ELISA方法仅对PEDV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪丁型冠状病毒等主要猪源病毒阳性血清均无交叉反应,具有良好的特异性.该方法检测灵敏度较高、重复性好,批内和批间重复性变异系数均小于10%.利用本研究建立的PEDV S2蛋白间接ELISA抗体检测方法对广西地区不同阶段猪群血清样品共计622份进行检测,总体样品阳性率为76.05%,不同阶段阳性率相差较大.本实验建立的ELISA方法可应用于临床样品PEDV抗体检测以及PEDV血清流行病学调查.
为建立快速、准确的猪丁型冠状病毒(PDCoV)抗体ELISA检测方法,本研究以重组蛋白N作为包被抗原,建立了 PDCoV间接ELISA抗体检测方法.结果显示,经条件筛选,确定了该ELISA最佳反应条件:重组蛋白每孔包被0.2 μg;待检血清1:80稀释,孵育60 min;酶标二抗1:4 000稀释,反应30 min;底物显色10min.待检血清样品S/P值>0.200时判定为阳性,S/P值<0.173时判定为阴性,S/P值介于0.173和0.200之间则判为可疑.特异性试验结果表明,该检测方法不与HCV、FMDV、PRRSV、PRV、TGEV和PEDV的阳性血清发生交叉反应;重复性试验结果显示,批内变异系数为0.79%~4.75%,批间变异系数在1.92%~6.60%之间,表明重复性良好;敏感性试验结果显示,该方法可检测到血清最大稀释度为1:320.符合率试验结果显示,本方法与中和试验检测结果符合度高,阳性符合率、阴性符合率和总符合率分别为86.36%、96.43%和92.00%.利用本研究建立的ELISA方法对456份采自广西地区不同阶段猪群的血清样品进行检测,结果显示,总体样品阳性率为40.40%,不同阶段猪群抗体阳性率有较大区别,后备母猪的阳性率可高达100%,保育猪阳性率最低仅为3.90%.
BOPPPS是一种以教学目标为导向,以学生为中心的教学模式.在"花"一章的一个课时中融入BOPPPS教学模组进行教学设计,为BOPPPS教学模组与药用植物学课程的教学融合提供了范例.通过BOPPPS 6个教学环节的实施,学生学习的目的和重点更加明确,参与式教学环节发挥了学生学习主观能动性,调动了学生学习积极性,提高了学生的团体协作能力,改善了教学效果.
为了解广西猪场伪狂犬病毒(PRV)感染和免疫状况,2017年1月—2020年12月,对部分猪场随机采样送检的血清样品,应用ELISA方法开展PRV血清抗体检测,并对检测结果进行不同年份、不同季节、不同地区、不同生长阶段猪群的统计分析.结果显示:从时间分布上看,2018年PRV gE抗体场阳性率(57.71%)和个体阳性率(24.75%)均最高,此后呈逐年下降趋势,其中个体阳性率下降明显(P<0.05),2020年下降至6.14%;各年间的PRV gB抗体场合格率差异不显著(P>0.05),均在90%以上,而2019年的个体阳性率(88.71%)最低,与其他年份差异显著(P<0.05).冬季PRV gE和gB抗体个体阳性率最低,分别为14.96%和89.35%,与其他季节差异明显(P<0.05);冬季gE抗体场阳性率(42.97%)最低,与春季、秋季差异不显著(P>0.05),但显著低于夏季(P<0.05),而gB抗体场合格率一年四季差异不显著(P>0.05),均在95%以上.从空间分布上看,广西14个地市猪场均存在不同程度的PRV野毒感染,其中玉林市最严重,场阳性率和个体阳性率分别为69.51%和35.86%,而钦州市最轻,分别为16.67%和4.07%;PRV gB抗体个体合格率普遍较高,均在84%以上.从不同生长阶段猪群上看,后备母猪、育肥猪PRV gE和gB抗体个体阳性率均显著低于其他生长阶段猪群(P<0.05),其中gE抗体个体阳性率在13%以下,而gB抗体个体阳性率不足80%.结果表明,近年广西规模猪场PRV野毒感染率较高,而疫苗免疫并不能完全阻止野毒株感染.建议通过PRV净化和提高规模猪场生物安全水平等措施来控制其流行.本研究为制定合理的猪伪狂犬病防控与净化策略提供了依据.
目的 基于网络药理学方法挖掘巴西人参核心药效,结合动物实验验证其抗疲劳作用.方法 通过文献检索方法收集巴西人参的化学成分,运用Discovery studio软件筛选类药性成分,通过Swiss target Prediction数据库对类药性成分预测分析关键靶点,并对预测靶点进行蛋白质相互作用关系分析,采用Cytoscape 3.6.1软件中的MCODE插件筛选出PPI网络中的核心靶点,通过DAVID数据库对核心靶点进行生物信息学分析.将小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、巴西人参高、低剂量组,各组小鼠给药15天后进行转棒实验及负重游泳实验,检测小鼠血清乳酸、肝糖原含量,考察各组小鼠抗疲劳能力.结果 网络药理学结果提示巴西人参主要有调节甾体类激素以及物质代谢的作用;巴西人参高剂量组能够显著延长小鼠的转棒疲劳时间以及力竭游泳时间(P<0.05或P<0.01);巴西人参高、低剂量组均能够显著降低血清中乳酸堆积、增加肝糖原的含量(P<0.05或P<0.01).结论 巴西人参具有多成分、多靶点、多途径的作用特点,其核心功效可能为抗疲劳以及增强性功能作用;动物实验结果表明巴西人参具有良好抗疲劳效果,其机制可能为促进机体内乳酸的转化,增加体内储能物质即肝糖原的储备.
寄生茶是桑寄生的枝叶通过茶艺处理而成的一种别样茶,为中国传统保健茶饮,含有黄酮类、萜类、挥发油、维生素等活性成分,具有降脂、降压、抗炎等保健作用.本研究主要归纳寄生茶的应用现状、化学成分、药理作用等方面的成果,为寄生茶茶饮工艺迭代式发展及深加工上提供研究和开发的建议,旨在为寄生茶产品的创新与开发提供依据.
目的:分析大猪屎豆挥发油的主要化学成分.方法:采用水蒸气蒸馏法分别提取大猪屎豆茎叶及根的挥发油,并通过GC-MS技术对其进行分析,用面积归一化法计算其相对百分含量.结果:从大猪屎豆茎叶的挥发油中分离出84个化合物,鉴定出其中的46个成分,占挥发油总含量的86.93%,其中主要成分为:植醇(23.50%)、大马士酮(14.26%)、十六碳醛(9.18%)、正十六烷酸(6.06%)、9,12,15-十八碳三烯醛(5.40%);从大猪屎豆根的挥发油中分离出84个化合物,鉴定出其中的24个成分,占挥发油总含量的84.42%,其中主要成分为:正十六烷酸(46.33%)、肉豆蔻酸(7.57%)、十六酸乙酯(6.77%)、植醇(4.23%)、(Z)-9,17-十八碳二烯醛(2.68%);其茎叶与根有7个相同的化合物.结论:大猪屎豆茎叶与根的挥发油中含量较大的有正十六烷酸及植醇,可为大猪屎豆的合理利用及进一步的研究提供科学依据.
2018年5月,广西某县某猪场突然有70多头35日龄猪发病,病猪症状为消瘦、腹泻、气喘、腹式呼吸,其中20多头猪病死.病死猪剖检病变为淋巴结肿大、出血;肺充血、出血,与胸膜粘连;肝充血;脾有梗死点;肾充血,表面有散在的出血点;膀胱黏膜有散在的出血点.应用抗生素对病猪进行治疗无效.该猪场将其中5头病死猪每头分别采取淋巴结、肺、肝、脾、肾等病料送实验室检测.
目的:对瓜拉纳中的化学成分进行系统分析,为该植物的深入研究及开发利用提供依据.方法:参照国家标准及相关文献对瓜拉纳中所含的粗蛋白、粗脂肪、粗多糖、粗纤维等大分子成分进行含量测定,应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对瓜拉纳的化学成分进行系统定性分析,采用ACQUITY UPLC-HSS-T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~5 min,2%~10%B;5~6 min,10%~20%B;6~9 min,20%~30%B;9~9.5 min,30%~35%B;9.5~10.5 min,35%~45%B;10.5~13 min,45%~55%B;13~15 min,55%~80%B;15~19 min,80%~98%B;19~20 min,98%B;20~20.3 min,98%~2%B;20.3~23 min,2%B),电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式进行检测,扫描范围m/z 50~1500,根据精确相对分子质量及碎片信息,结合数据库匹配和对照品比对进行结构鉴定.结果:瓜拉纳中粗蛋白、粗脂肪、粗多糖及粗纤维质量分数分别为(0.63±0.03)%,(2.73±0.09)%,(3.23±0.12)%,(8.89±-0.59)%.通过UPLC-Q-TOF-MS分析从瓜拉纳中共鉴定出42个成分,包括3个甲基黄嘌呤类成分,2个核苷类成分,1个氨基酸类成分,3个有机酸,33个黄酮类成分,其中3个化合物(L-色氨酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、大豆苷元)是从瓜拉纳中首次发现.结论:瓜拉纳中的营养成分含量丰富,作为功能食品来开发具有良好潜力.UPLC-Q-TOF-MS技术为鉴别瓜拉纳药材中化学成分提供简便、快速、准确的方法,其主要化学成分为甲基黄嘌呤类、原花青素类成分,可为瓜拉纳药材的质量评价及药效物质基础研究提供参考.
为进一步了解近年广西猪场蚊媒携带乙型脑炎病毒(JEV)情况,采用套式RT-PCR(RT-nPCR)检测方法,于2016年—2019年间对猪乙型脑炎(JE)确诊阳性病例的部分猪场进行蚊子携带JEV情况初步检测调查.对抽选16个有JE阳性病例的猪场捕捉的蚊子进行JEV检测,结果均为阳性.表明广西猪JE确诊阳性病例猪场的蚊子携带JEV的几率很高.
为掌握广西地区导致猪群腹泻的主要病毒性病原的流行态势,为养殖场猪病毒性腹泻的综合防控提供依据,用实时荧光RT-PCR检测方法,对2017年1月—2021年6月广西14个地市489个猪场1206份临床腹泻样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪丁型冠状病毒(PDCoV)等病原检测,并分析其阳性检出率在不同年份、季节、地区、年龄段猪群之间的差异以及病原混合感染情况.结果显示,2017—2021年,PEDV、PDCoV、PoRV、TGEV样品阳性检出率分别为49.67%、7.63%、4.56%和0.33%,场阳性检出率分别为53.37%、8.18%、8.18%和0.61%;病毒性腹泻病原有一定的季节性流行特征,多表现为冬、春季流行加重;PEDV、PDCoV普遍流行,PoRV局部流行,TGEV散发流行;4种病原对不同年龄段腹泻猪群的感染率存在差异,其中对哺乳仔猪危害最为严重;猪群以单一感染为主,主要为PEDV单一感染,阳性检出率为47.93%,混合感染均为二重感染且感染率较低.结果表明,导致广西地区猪群腹泻的主要病毒性病原主要为PEDV、PDCoV和PoRV,其中PEDV为最主要病原,其他病原也呈流行加重趋势,需进一步加强病原监测和疫病综合防控.
Newcastle disease is an important poultry disease that also affects Columbiform birds. The viruses adapted to pigeons and doves are referred to as pigeon paramyxoviruses 1 (PPMV-1). PPMV-1 are frequently isolated from pigeons worldwide and have the potential to cause disease in chickens. The complete genomes of 18 PPMV-1 isolated in China during 2012–2018 were sequenced by next-generation sequencing (NGS). Comprehensive phylogenetic analyses showed that five of the viruses belong to sub-genotype VI1.2.1.1.2.1 and 13 isolates belong to sub-genotype VI.2.1.1.2.2. The results demonstrate that these sub-genotypes have been predominant in China during the last decade. The viruses of these sub-genotypes have been independently maintained and continuously evolved for over 20 years, and differ significantly from those causing outbreaks worldwide during the 1980s to 2010s. The viral reservoir remains unknown and possibilities of the viruses being maintained in both pigeon farms and wild bird populations are viable. In vivo characterization of the isolates’ pathogenicity estimated mean death times between 62 and 114 h and intracerebral pathogenicity indices between 0.00 and 0.63. Cross-reactivity testing showed minor antigenic differences between the studied viruses and the genotype II LaSota vaccine. These data will facilitate PPMV-1 epidemiology studies, vaccine development, and control of Newcastle disease in pigeons and poultry.
筛选优质鸡源益生菌菌种,为畜禽微生态制剂的研发提供优质的菌株来源,为开发禽用微生态制剂提供安全高效菌种资源和理论支撑.试验以健康鸡肠道为分离材料,使用MRS培养基(乳酸菌细菌培养基)进行分离培养,并对分离菌株进行形态特征、生理生化鉴定及分子生物学鉴定.试验研究发现在鸡盲肠中分离获得一株细菌,鉴定为发酵乳杆菌,编号为J4.分离获得的菌株具有耐热、耐酸、耐胆盐等特点,同时对动物机体安全无毒,可作为鸡源发酵乳杆菌益生菌的优良候选株.
为建立猪捷申病毒(PTV)的TaqMan实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,在PTV基因组序列保守区设计引物和TaqMan探针,构建重组质粒作为阳性标准品,通过优化反应条件,建立了检测PTV的RT-qPCR方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验.结果表明,该方法仅对PTV出现特异性扩增反应,与猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒等常见猪病毒均无交叉反应.该方法的标准曲线Ct值与4.6×108~4.6×102拷贝/μL的质粒浓度范围具有良好线性关系,标准曲线方程为Ct=-3.201 x logX+40.527,线性相关系数(R2)为0.996,检测下限为4.6 x 101拷贝/μL.对不同浓度的pMD18-PTV进行组内与组间重复检测,每个浓度重复试验的Ct值的变异系数均小于4.0%,具有良好的重现性.应用所建立的方法对235份临床猪腹泻样品进行检测,PTV阳性样品32份,样品阳性率为13.62%.本试验建立的RT-qPCR方法为PTV实验室检测及病毒研究分析提供了可靠的技术手段.